分離工程第七章ppt課件(編輯修改稿)
2024-09-18 22:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 能 多孔玻璃載體 硅酸鹽 堅(jiān)硬、耐酸堿、易修飾 聚丙烯酰胺 凝膠載體 丙烯酰胺 N,N亞甲基雙丙烯酰胺 親水性好 可供活化基團(tuán)多 纖維素載體 多糖類物質(zhì) 來源豐富，但非特異性吸附及空間位阻強(qiáng)，對分離不利 葡聚糖凝膠載體 經(jīng)環(huán)氧丙烷交聯(lián)的多糖類 理化性質(zhì)穩(wěn)定，但粒徑太小 ?常用制備親和吸附介質(zhì)的方法有： CNBr活化法、環(huán)氧基活化法和硅膠的活化。 ?間隔臂 –當(dāng)配基的分子量較小時(shí)，將其直接固定在載體上，會由于載體的空間位阻，配基與生物大分子不能發(fā)生有效的親和吸附作用。 –在配基與載體之間連接間隔臂，可增大配基與載體之間的距離，使其與生物大分子發(fā)生有效的親和結(jié)合。 含有 6~8亞甲基，親和力最大。 Affinity adsorption 載體的活化和偶聯(lián) ? 親和吸附的載體通常是惰性的，往往不能直接與配基連接，偶聯(lián)前需要先活化，活化的方法主要有： – 溴化氰活化法：瓊脂糖、葡聚糖引入亞氨基碳酸鹽 – 高碘酸活化法：氧化多糖，生成烷基胺 – 環(huán)氧化法 ：多糖類載體與環(huán)氧氯丙烷作用生成環(huán)氧化合物，再與氨基偶聯(lián) – 甲苯磺酰氯法：雙功能試劑法 二乙烯砜 環(huán)氧化法 O H + C H2OC H CH2C l O CH2C H C H2O+P N H2O CH2N H P表氯醇 Activation 配基偶聯(lián)方法 ? 載體經(jīng)活化后，就可以進(jìn)行與配基的偶聯(lián)反應(yīng)。具體方法如下： – 碳二亞胺縮合法 (脫水 ) – 酸酐法 – 疊氮化法 – 重氮化法 三、應(yīng)用 ?最初用于蛋白質(zhì)特別是酶的分離和精制上，后來發(fā)展到大規(guī)模應(yīng)用在酶抑制劑、抗體和干擾素等的分離精制上。 ?思考題：制備親合吸附介質(zhì)時(shí)，為什么需要在配基與載體之間引入間隔臂？ 第三節(jié) 親和膜 一、原理 ?利用親和配基修飾的微濾膜為親和吸附介質(zhì)親和純化目標(biāo)蛋白質(zhì)，是親和層析的變形
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