【文章內(nèi)容簡介】 鏡中可以看到一個明亮的圓形視野，只要視野中光亮程度適中，光就對好了。 3 、放玻片 將要觀察的玻片標本，放在載物臺上，用彈簧夾或移光器將玻片固定。將玻片中的標本對準通光孔的中心。 4 、調(diào)焦 調(diào)焦時，旋轉(zhuǎn)粗焦螺旋，為了防止物鏡與玻片標本相撞。先慢慢降低鏡筒，降低時，必須從側(cè)面仔細觀察，直到物鏡與玻片標本相距5 mm 以上，切勿使物鏡與玻片標本接觸，然后一面用左眼自目鏡中觀察，一面用右手旋轉(zhuǎn)粗準焦螺旋（切勿弄錯旋轉(zhuǎn)方向），直到看清標本物像為止。 5 、觀察 對光、調(diào)焦都是用的低倍物鏡。觀察時，還是先用低倍物鏡，焦距調(diào)準后，移動玻片標本，全面的觀察材料，如果需要重點觀察的部分，將其調(diào)至視野的正中央，再轉(zhuǎn)換高倍鏡進行觀察。轉(zhuǎn)換高倍鏡后，只有輕輕扭轉(zhuǎn)細準螺旋，就能看到清晰的物像，注意使用高倍鏡時，切勿使用粗準焦螺旋，否則容易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭的透鏡。一般凡是用低倍物鏡能夠觀察清楚的標本，就不一定要換用高倍鏡。 觀察完畢，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭偏于兩旁，降下鏡筒，擦抹干凈，裝入鏡箱。 四、臨時裝片 PDF 文件使用 p d f F a c t o r y Pr o 試用版本創(chuàng)建 . f i n e p r i n t . c n 5 將要觀察的材料放在載玻片的水滴中，加蓋蓋玻片，以備顯微鏡下觀察，這種方法叫做臨時裝片，臨時裝片的優(yōu)點在于，新鮮材料組織不會破壞，可保持原來生活狀態(tài)，同時操作簡便，不受設(shè)備條件限制，隨時隨地可以進行。 制作臨時裝片時首先將載玻片，蓋玻片擦拭干凈[ 注意試擦玻片動作要輕，手指用力要均勻，否則易試破] 。在載玻片中央，滴加一、二滴清水。然后用鑷子鑷洋蔥內(nèi)表皮0 . 5 c m0 . 5 c m，放在載玻片上，再將蓋玻片輕輕蓋上，注意：為了不使其內(nèi)有氣泡，必須將蓋玻片先從一側(cè)放下，使接觸到水，然后慢慢放下，如仍有氣泡，可用鑷子輕輕加壓蓋玻片，或者解剖針對蓋玻片稍為提高，然后再放下，水不能過多，水量過多，則蓋玻片易浮動，這時可用小濾紙條將水分吸干，如水分過少，水沒有填滿蓋玻片，可以側(cè)面用滴管加水少許?？傊?，應(yīng)使蓋玻片緊貼載玻片，不能浮動，這樣才利用觀察。 最后試干玻片四周的水分，置顯微鏡下觀察。 臨時裝片技術(shù)，是本課程實驗課最常用的基本技術(shù)，要求每個同學(xué)反復(fù)練習(xí)，熟練掌握。 五、生物繪圖法 生物實驗圖不同于一般美術(shù)圖，也不同于機械制圖。生物繪圖要求將標本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準確的措施下來，然后詳加說明，要求形象自然，比例適當(dāng)，線條清晰。 生物繪圖一般用點、線表示，輪廓用線條描繪，明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細點的蔬密表示之，圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮試擦的上好白紙，繪圖時先用中軟（EB）銅筆繪出輪廓，然后用較硬（3 H）的鉛筆繪出全圖，圖中各部分應(yīng)注字說明，圖與字之間用水平細線連系之，圖的標題填在圖的下方。 很多細不生物體或解剖結(jié)構(gòu)是通過顯微鏡觀察認識的。因此要逐步訓(xùn)練用左眼觀察，右眼看圖紙。將觀察結(jié)果準確地描繪出來。 [ ] 1 、為什么要用蓋玻片蓋著標本，才能放在顯微鏡下觀察？ 2 、觀察細胞時，在蓋玻片下滴加碘液有什么作用？ 3 、洋蔥表皮細胞的細胞膜你看到了嗎? 為什么? [ ] 繪一個洋蔥鱗片葉的表皮細胞，并注明各部名稱。 PDF 文件使用 p d f F a c t o r y Pr o 試用版本創(chuàng)建 . f i n e p r i n t . c n 6 實驗二 植物細胞有絲分裂染色體制片及觀察 [ ] 1 、學(xué)習(xí)和掌握植物根尖細胞有絲分裂染色體壓片技術(shù)； 2 、觀察有絲分裂過程中染色體的形態(tài)特征和動態(tài)變化。 [ ] 洋蔥或蠶豆根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、醋酸洋紅或改良堿性品紅、酒精燈。 [ ] 一、植物細胞的有絲分裂過程 取洋蔥或蠶豆根尖壓片（或已制好的洋蔥根尖縱切片）置顯微鏡下觀察。仔細找出分裂的細胞或正在分裂中各期細胞。正在分裂的細胞內(nèi)部發(fā)生了十分復(fù)雜的變化。在顯微鏡下可以觀察到顯著的變化是細胞核。所以，平時著重觀察細胞核變化中的幾個階段。變化過程的連續(xù)的，為了便于說明，分為以下幾個時期： 間期[ 即未進行細胞分裂的時期，又叫靜止期] 在切片上這個時期的細胞數(shù)目最多，細胞核無變化，具純一構(gòu)造核內(nèi)染色質(zhì)分布均勻、核膜、核仁均存在。 前期[ 染色體形成時期] 細胞由不分裂狀態(tài)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榉至褷顟B(tài)，最顯著的是細胞核內(nèi)的染色質(zhì)。由分散狀態(tài)形成許多小顆粒[ 染色質(zhì)粒] ，進而連成細絲狀，最后成一條條的棒狀。帶狀物即染色體，前期之未。每一個染色體縱裂為二，但并不立即分開，仍然互相靠攏，同時核膜，核仁逐漸消失。 中期[ 紡錘體形成時期] 染色體在細胞內(nèi)發(fā)生移動，原來散亂的各個染色體最后排列在細胞中央的一個平面上，這個平面叫赤道面。這些在赤道面上的染色體合成赤道板。同時，在這個時期，一些無色的細絲從細胞的兩極仲到赤道板的附近。與縱裂兩半的染色單體聯(lián)系著。這些無色細絲從細胞的兩極伸到赤道板的附近，與給裂兩半的染色單位聯(lián)系著。這些無色細絲叫做紡錘絲。全部紡錘絲合成紡錘體。[ 紡錘絲在普通顯微鏡下，往往不易見到，要縮小光圈，轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)輪，有時亦可見到。 后期[ 染色體分離時期] 縱裂后的兩個染色單體開始向細胞的兩極移動，由于紡鍾絲收縮而產(chǎn)生的牽引力，兩組染色單位從赤道板趨赴紡錘體的兩極。從染色體開始移動的兩組染色單體到達細胞的兩極，這個階段是細胞分裂的后期。 末期[ 子核成立時期] 到達細胞兩極的染色單體逐漸改變形態(tài)。染色體解螺旋、變細、伸長，逐漸形成染色質(zhì)，最后成統(tǒng)一的構(gòu)造。周圍產(chǎn)生核膜。中間出現(xiàn)核仁，這時紡錘體消失。在原來赤道面的地的的細胞壁，將細胞分裂成兩個部分。這時，一個母細胞就分裂成為兩個子細胞了。 繪幾個正在進行分裂的細胞，分別表示細胞分裂的各個時期。 二、植物根尖分生組織壓片法 1 、取材 切取洋蔥根尖0 . 5 厘米進行前處理。 [ 一般在上行1 0 －1 1 時取材] 2 、前處理 PDF 文件使用 p d f F a c t o r y Pr o 試用版本創(chuàng)建 . f i n e p r i n t . c n 7 將切下的根尖放在0 . 4 －0 . 2 %的秋水仙堿溶液處理2 －5 小時，然后用水沖幾次，或?qū)⒉牧戏湃胝麴s水中，在0 －3 ℃的條件下處理2 4 小時。 3 、固定 在醋酸—純酒精（1 ：3 ）固定1 5 －3 0 分鐘，然后用9 5 %酒精洗凈其醋酸移入7 0 %酒精中，在陰涼處保存。 4 、解離 將根從固定液中取出，用流水沖洗1 0 分鐘，放入1 mo l / l 鹽酸中，于6 0 ℃下水解1 0 分鐘，或置鹽酸酒精（鹽酸與9 5 %酒精各半），取出水洗1 －2 次。 5 、染色和壓片 取解離后的根尖于載玻片上，滴加幾滴改良堿性品紅或醋酸洋紅染液。放置約1 0 分鐘，待根尖染成暗紅色，加蓋玻片，用吸水紙放在蓋玻片上面，用右手拇指在吸水紙上對準根尖輕壓，或用解部針柄端輕輕敲擊，將根尖材料壓成一均勻薄層，注意不要移動蓋玻片。 6 、鏡檢 將所做玻片置顯微鏡下觀察，可看到有絲分裂過程中不同分裂時期的染色體，為了觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和進行計數(shù)，應(yīng)找到分裂中期的細胞，若染色嫌淺，可從蓋玻片一側(cè)加酒液，同時在另一側(cè)用濾紙片吸染料，又可將載玻片在酒精燈上微微加熱，染色體著色效果更好些。 洋蔥根尖的培養(yǎng) 1 . 培養(yǎng)洋蔥生根時, 避免用新采收的洋蔥, 因它尚在休眠不易生根。培養(yǎng)過程中, 注意每天至少換水一次, 以防爛根。 如果必須用當(dāng)年剛采收的新洋蔥