【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 選用 3只家兔或 5只豚鼠。 ● 一次皮膚涂抹實(shí)驗(yàn)： 脫毛后 ， 將藥物 1m1 (液體 )或 (固體 )涂于 藥物區(qū) 和 破損皮膚區(qū) ，每區(qū) 均為 體表面積的 3%~5%，各區(qū)之間留有適當(dāng)距離。 賦 形劑則涂于 對(duì)照區(qū) ， 用適宜方法固定。 24 小時(shí)后用溫 水或無(wú)刺激性溶劑去除殘留藥物及賦形劑。去除藥物 后 2 48 小時(shí)和 72 小時(shí)觀察涂抹部位有無(wú)紅斑和 水腫等情況 ， 以及上述變化的恢復(fù)情況和時(shí)間。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 皮膚刺激試驗(yàn) 一 2022/8/23 任立群 41 [試驗(yàn)方法 ] 至少選用 3 只家兔或 5 只豚鼠。 ● 多次皮膚刺激實(shí)驗(yàn)： 多次給藥實(shí)驗(yàn)則一般每 日涂抹一次 , 連續(xù)一周 , 其余均與一次給藥物的方法和 要求一致。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 皮膚刺激試驗(yàn) 一 [結(jié)果判斷與評(píng)價(jià) ] 每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果按 下 表進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)分 。 皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 刺激反應(yīng) 分值 刺激反應(yīng) 分值 紅斑： 水腫： 無(wú)紅斑 0 無(wú)水腫 0 勉強(qiáng)可見 1 勉強(qiáng)可見 1 中度紅斑 2 明顯可見 2 嚴(yán)重紅斑 3 皮膚隆起輪廓清楚 3 紫紅色紅斑并有 4 皮膚隆起約 1mm并 4 焦痂形成 范圍擴(kuò)大 總 分 8 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 2022/8/23 任立群 43 皮膚刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià) 刺激反應(yīng) 分值 無(wú)刺激性 ﹤ () 輕度刺激性 ﹤ () 中度刺激性 ﹤ () 強(qiáng)刺激性 ﹥ () 計(jì)算出平均分值按 下 表進(jìn)行刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià) : 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 2022/8/23 任立群 44 直接接觸引起的刺激作用 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 藥物作用于眼的方式 2022/8/23 任立群 45 通過(guò)全身給藥 也 能影響角膜 , 如氯 喹 、氯普馬 嗪 等。 Potts 等曾觀察到這些藥物對(duì)角膜有損傷 ， 其作用可能是通過(guò)淚管或通過(guò)血 — 房水屏障 ， 這些作用對(duì)人來(lái)說(shuō)僅在較大劑量情況下才發(fā)生 。 全身給藥是否會(huì)引起角膜的損傷 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 直接接觸引起的刺激作用 藥物作用于眼的方式 2022/8/23 任立群 46 直接接觸引起的刺激作用 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 藥物作用于眼的方式 全身給藥引起角膜損傷 2022/8/23 任立群 47 由藥物直接接觸角膜所引起的刺激作用 ， 表現(xiàn)為炎癥。 如果短時(shí)間接觸刺激性較強(qiáng)的藥物 ， 引起角膜結(jié)膜炎、角膜表層水腫、上皮脫落 ； 結(jié)膜充血、水腫、發(fā)生灼痛、流淚、畏光等。 如果長(zhǎng)時(shí)間接觸刺激性較弱的藥物 ， 可引起慢性結(jié)膜炎或 瞼 腺炎 ,表現(xiàn)出充血、分泌物增多等。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 接觸刺激物后角膜的表現(xiàn) 2022/8/23 任立群 48 1. 兔和猴 ： 對(duì)猴眼有中等刺激 ( 主要是表層的改變 和水腫以及輕微的表層改變 ) 的物質(zhì) ， 可引 起兔眼的嚴(yán)重反應(yīng) ， 包括不同程度的角膜混 濁 、 血管 翳 形成以及結(jié)膜炎 。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 不同物種之間眼對(duì)刺激反應(yīng)的差異 2022/8/23 任立群 49 2. 兔與人 ： （ 1） 對(duì)各種物質(zhì)刺激后流淚的量不一樣 ； （ 2） 兔眨眼次數(shù)較人少 （ 20 次 /5 分鐘 ）； （ 3） 兔淚水與人和其它動(dòng)物淚水 pH 值不一樣 （ 兔 ， ； 人 ， ~； 猴 ， ）； 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 不同物種之間眼對(duì)刺激反應(yīng)的差異 2022/8/23 任立群 50 （ 4） 兔角膜損傷后 ， 因 其 眼腺有豐富的血管叢 ，對(duì)損傷的反應(yīng)快而強(qiáng)烈 ， 又因角膜基質(zhì)松弛 ， 因此易有新生血管和血管 翳 形成 ，且 形成迅速 ( 比人 和 猴快 )， 通常在 4~7 天形成， 如果角膜損傷較大時(shí) ， 在 14 天內(nèi) 翳 將包裹整個(gè)角膜。一般情況下 , 雖可消退一點(diǎn) , 但不會(huì)完全消失 , 而終生殘留下來(lái)。當(dāng)人眼有 翳 反應(yīng)時(shí) , 一般都伴有慢性疾病 , 而不是急性刺激作用 , 在治療后 ，翳 可能消退 。 （ 5） 兔眼瞬膜大 ， 而人則已消退 。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 不同物種之間眼對(duì)刺激反應(yīng)的差異 2022/8/23 任立群 51 3. 不同種屬眼的各個(gè)部位反應(yīng)是不同的。 如 兔眼虹膜和結(jié)膜反應(yīng)強(qiáng) ； 角膜反應(yīng)狗眼強(qiáng) ， 猴 眼 反應(yīng)輕 猴的虹膜有色素 ， 對(duì)虹膜血管充血改變不便觀 察 。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 不同物種之間眼對(duì)刺激反應(yīng)的差異 2022/8/23 任立群 52 因此 ， 目前仍首選 白 兔來(lái)作眼刺激試驗(yàn) 。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 也可使用狗和靈長(zhǎng)類。 如果是研究藥物對(duì)晶狀體、視網(wǎng)膜和眼神經(jīng)的作用，可選用大鼠和貓。 2022/8/23 任立群 53 [試驗(yàn)?zāi)康?] 用于評(píng)價(jià)藥物的眼刺激作用。特別是眼科用藥 ， 必須進(jìn)行動(dòng)物的眼刺激試驗(yàn) ， 以保證臨床用藥的安全性。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 2022/8/23 任立群 54 [試驗(yàn)動(dòng)物 ] 首選白色家兔 ，至少 4只，體重 2~3kg。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 [試驗(yàn)藥物 ] 液體或膏劑。 2022/8/23 任立群 55 ① 家兔來(lái)源廣 ， 較馴服 ， 便于操作 ， 價(jià)格相對(duì) 便宜 ， 并且易飼養(yǎng) ； ② 白兔的眼球大 ， 角膜表面積和球結(jié)膜范圍都 大 ， 易于觀察 ； ③ 虹膜無(wú)色素 ， 便于對(duì)虹膜血管的改變進(jìn)行觀 測(cè)和攝像。 第二節(jié) 刺激試驗(yàn) 眼刺激試驗(yàn) 二 選用白色家兔作眼刺激試驗(yàn)的優(yōu)越性 2022/8/23 任立群 56 [試驗(yàn)方法 ] ● 一次性眼刺激試驗(yàn)： 將液態(tài)或軟膏 或 直接 滴入或涂入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi) ， 另一側(cè)眼作為對(duì)照。滴藥后使眼被動(dòng)閉合 5~10 秒 ， 記錄滴藥后 2 48小時(shí)和72小時(shí)對(duì)眼的局部反應(yīng) ， 第 7天觀察恢復(fù)情況 ， 觀察時(shí)應(yīng)用熒光素 鈉 檢查角膜損害 ， 用裂隙燈檢查角膜透明度、虹膜紋理改變