高二生物dna和蛋白質(zhì)技術(shù)(編輯修改稿)
2024-12-16 06:18 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 解度不同的多種雜質(zhì)。 5. 最后析出 DNA必須使用冷酒精 (至少在 5℃ 以下存放 24小時(shí) )，并且將 1份含 DNA的 NaCl溶液加入到 2份的冷酒精中。如果懸浮在溶液中的 DNA絲狀物較少，可將混合液放入到冰箱中再冷卻幾分鐘。 1. (改編 )在 DNA分子的粗提取實(shí)驗(yàn)中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是 ( ) A. 稀釋血液、沖洗樣品 B. 使血細(xì)胞破裂、降低 NaCl濃度使 DNA析出 C. 使血細(xì)胞破裂、增大 DNA溶解量 D. 使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的 DNA 【 解析 】 在該實(shí)驗(yàn)過程中，第一次加入蒸餾水的目的是使血細(xì)胞吸水而破裂，以使核物質(zhì)溶解。第二次加入蒸餾水是為了降低 NaCl溶液的濃度至 mol/L，因?yàn)榇藭r(shí)的 DNA溶解度最小，可使 DNA析出。 【 答案 】 B PCR擴(kuò)增技術(shù) 一、 PCR相關(guān)技術(shù)原理與條件 1. PCR：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡(jiǎn)稱，是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。 2. 引物：是一小段 RNA單鏈或單鏈 DNA，它能與 DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)。 3. 擴(kuò)增方向： DNA的合成方向總是從子鏈的 5′端向 3′端延伸。 4. 解旋：利用了 DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合。 5. 酶：耐高溫的 Taq－ DNA聚合酶，高溫不會(huì)失活。 6. PCR的條件：一定的緩沖溶液下才能進(jìn)行，需提供 DNA模板、兩種引物、四種脫氧核苷酸、耐熱的 DNA聚合酶，同時(shí)要控制溫度。 二、過程 1. 變性：當(dāng)溫度上升到 90 ℃ 以上時(shí)，雙鏈 DNA解旋為單鏈，如下圖： 2. 復(fù)性：溫度下降到 50℃ 左右，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈 DNA結(jié)合，如下圖： 3. 延伸：溫度上升到 72℃ 左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在 DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的 DNA鏈，如下圖： 三、結(jié)果 1. PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。 3. 兩引物之間的固定長(zhǎng)度的 DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。 (1)DNA聚合酶的特性，只從 DNA的 3′ 端開始延伸 DNA鏈，而不能從頭合成，故 DNA復(fù)制需引物。 (2)子鏈的延伸從引物 3′ 端開始，所以 DNA的合成方向是子鏈的 5′ 端 ―→3′ 端。 【 例 2】 關(guān)于 DNA的復(fù)制，下列敘述正確的是 ( ) A. DNA 聚合酶不能從頭開始合成 DNA，只能從引物的 5′端延伸 DNA 鏈 B. DNA 復(fù)制不
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