高二生物dna和蛋白質(zhì)技術(shù)(文件)
【正文】 提取含雜質(zhì)較少的 DNA 【 解析 】 在該實驗過程中，第一次加入蒸餾水的目的是使血細胞吸水而破裂，以使核物質(zhì)溶解。 3. 擴增方向： DNA的合成方向總是從子鏈的 5′端向 3′端延伸。 二、過程 1. 變性：當溫度上升到 90 ℃ 以上時，雙鏈 DNA解旋為單鏈，如下圖： 2. 復(fù)性：溫度下降到 50℃ 左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈 DNA結(jié)合，如下圖： 3. 延伸：溫度上升到 72℃ 左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在 DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的 DNA鏈，如下圖： 三、結(jié)果 1. PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。 【 例 2】 關(guān)于 DNA的復(fù)制，下列敘述正確的是 ( ) A. DNA 聚合酶不能從頭開始合成 DNA，只能從引物的 5′端延伸 DNA 鏈 B. DNA 復(fù)制不需要引物 C. 引物與 DNA 母鏈通過堿基互補配對進行結(jié)合 D. DNA 的合成方向總是從子鏈的 3′端向 5′端延伸 【 解析 】 由于 DNA 聚合酶只能從引物的 3′端延伸 DNA 鏈；由于 DNA 分子是反向平行的，子鏈是依據(jù)堿基互補配對原則，在 DNA 聚合酶作用下合成的，其合成方向是從子鏈 5′端向 3′端延伸。 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。 (2)過程：取 1 mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中，將透析袋放入盛有 300 mL的物質(zhì)的量濃度為 20 mmol/L的磷酸緩沖液中(pH為 )，透析 12小時。 【 例 3】 在蛋白質(zhì)的提取和分離中 ， 對于樣品的處理過程的分析正確的是 ( ) A. 洗滌時離心速度過高 ， 時間過長 ， 白細胞等會沉淀 ， 達不到分離的效果 B. 洗滌紅細胞的目的是除去血漿中的葡萄糖 、 無機鹽 C. 洗滌過程中用 %的生理鹽水 D. 透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì) 【 解析 】 洗滌紅細胞的目的是去除表面的蛋白質(zhì) ， 該過程中要用 %的生理鹽水 ， 而透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 。 【 答案 】 D 。江蘇高考 3. 純化：一般采用凝膠色譜法對血紅蛋白進行分離和純化。 三、實驗操作程序 1. 樣品處理 (1)紅細胞的洗滌：除去血漿蛋白等雜質(zhì)，有利于后續(xù)步驟的分離純化； (2)血紅蛋白的釋放：使紅細胞破裂，血紅蛋白釋放出來； (3)分離血紅蛋白溶液：經(jīng)過離心使血紅蛋白和
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