【文章內(nèi)容簡介】 5 ’ B o s e p a i n i n g b e t w e e n r R N A a n d m R N A a t i n i t i a t i o n A G U A G C A C C U G C G G U U A CCUCCU U U A 3 ’ G 3 ’ G G A G G A 5 ’ m R N A G G G A U G C C A A U G G A 5 ’ 圖 1 5 1 6 S r R N A 和 S D 序列互補配對 3 真核生物 mRNA的特征 （ 1） 一般為單順反子 。 （ 2） 5’ 端的帽子對翻譯有增強作用，且 5’ 帽子和 3’polyA尾對翻譯效率的調(diào)節(jié)有協(xié)同作用。 （ 3） “第一 AUG規(guī)律” 即 絕大部分以 AUG作為起 始密碼子。 第四節(jié) 核糖體的結構 ? 核糖體 (ribosome)亦稱核蛋白體； ? 翻譯的場所 ； ? 細菌中常以多聚核糖體的形式； ? 分為兩類： ? 附著于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) ：合成白蛋白、胰島素等分泌性蛋白； ? 游離于胞漿 ：合成參與細胞固有蛋白質(zhì)。 Prok. protein 約占細胞的 10％， rRNA占總 RNA的 80％， Euk中相對比例小些。 Euk中約 20220個核糖體 /cell。 1 核糖體的構成 ? 由大、小亞基構成，每個亞基含不同的蛋白質(zhì)和 rRNA。 1 2 3 8 5 4 6 7 9 表 1 4 8 核糖體的活性位點活性位點 功能 位置 組分m R N A 結合位點結合 m R N A 和 IF因子30S ,P 位點附近 S1 、 S1 8 、 S 2 1 ；及 S3 、 S4 、 S5 、S1 2 1 6 SrRN A 3 ′末端區(qū)域P 位點 結合 fMe t t RN A 和肽基 t RN A大部分在 50S 亞基 L2 、 L 2 7 及 L 1 4 、 L 1 8 、 L 2 4 、 L 3 316S 和 2 3 SrRN A 3 ′附近區(qū)域A 位點 結合氨?；?t RN A 大部分在 30S 亞基 L1 、 L5 、 L 7 / L 1 2 、 L 2 0 、 L 3 0 、 L 3 316S 和 2 3 SrRN A （ 16S 的 1 4 0 0區(qū)）E 位點 結合脫酰 t RN A 50S 2 3 SrRN A 是重要的5 SRN A 和 23S rRN A 結合 P 和 A 位點的附近 L5 、 L 1 8 、 L 2 5 復合體肽?；D移酶將肽鏈轉移到氨基酰 t RN A 上50S 的中心突起 L2 、 L3 、 L4 、 L 1 5 、 L 1 6 2 3 SrRN A是重要的E FT u 結合位點氨基酰 t RN A 的進入30S 外部E FG 結合位點移位 5 0 S 亞基的界面上， L 7 / L 1 2 附近，近 S1 2L 7 / L 1 2 GTP 酶需要 50S 的柄 L7 、 L 1 22 核糖體的活性位點： 3’端 5’端 16SrRNA分子中的功能區(qū)域 第五節(jié) 原核生物的翻譯過程 蛋白質(zhì)生物合成的機制 翻譯過程可分為起始、延長、終止三個階段。 組成過程： 30S+50S+mRNA+fMet tRNAfmet 70SmRNAfMet tRNAfmet+GDP+Pi 1 起始 IF13,GTP 起始復合物 70S三元復合物 IF 不同 形式 MW GTP結合 能力 生物學活性 IF1 9500 無特異功能，但具有加強 IF2和IF3的活性作用。 IF2 IF2a IF2b 117000 85000 + 生成 30S小亞基形成前起始復合物 IF3 IF3a IF3β 20668 19997 1. 使得 30S與 mRNA起始部位連接 ,形成三元復合物 。 ，使 70S核糖體顆粒解離為 30S和 50S亞基 。 起始因子 (Initiation factor， IF） ： 參與蛋白質(zhì)生物合成起始的蛋白因子。 ? Ecoli 三種 : IF1 IF2 IF3 。 ? IF的性質(zhì)特點： ☆ IF3－－賦予 30S 亞基與 mRNA 結合的能力。 （ 30S亞基沒有與 mRNA主動結合的能力） ☆ IF3 使 30S 亞基不能與 50S亞基結合，保證解離狀態(tài) ☆ 30S 亞基與 mRNA 的結合。 SD（ 5’AGGAGG3’） 與 16S rRNA的 3’ 端 (3’UCCUCC5’） ,使AUG定位在 P位上。 ☆ 30S 復合物中，起始密碼子位于 P位點，只有 fMettRNAfMet能進入。 30SIF3 + mRNA 30SIF3mRNA（ 30S復合物） IF3 + 30S 30S 亞基與 mRNA的結合 起始 tRNA 的結合 IF2 + fMettRNAf IF2fMettRNAf ＋ 30SIF3mRNA 30SIF3mRNAIF2fMettRNAfGTP GTP 70S 起始復合物的形成 a、 IF3游離 30SIF3mRNAIF2fMettRNAfGTP與 50S亞基的結合導致。 b、 70S 起始復合物形成 ◎ 50S亞基的結合激活 IF2 的 GTP酶活性，水解 GTP并解離下來（ IF1 IF2 ）。 ◎ GTP水解釋放的能量改變兩者的構象形成 70S 起始復合物 30SmRNAfMettRNA50S c、 Met的甲?；?….. 合成到 15～ 30個 AA ◎ 去甲?；福毦?、線粒體）； ◎ 氨肽酶去除 Met。 2 延伸 以氨酰－ tRNA 進入 70S 起始復合物的 A位為標志（第一個進位過程）。 延伸因子 (Elongation factor， EF） 延伸因子 MW GTP結合能力 生物學活性 EFT EFTu 4500 + 結合后有活性 EFTuGTP結合氨基酰 tRNA（延伸tRNA）進入核糖體 A位與 mRNA結合 EFTs 3000 + EFTu 在 EFTs幫助下完成 GDP被GTP取代，恢復活性 EFG 80000 + 使肽基 tRNA從核糖體的 A位向 P位移動 延伸 的三個階段： ⑴ 進位反應：主要是密碼子 反密碼子的識別； ⑵ 轉肽反應：涉及肽鏈的形成； ⑶ 移位反應： tRNA和 mRNA相對核糖體的移動 。 (1)進位 ? 氨基酰 tRNA與核糖體結合，進入 A位的過程。