大曲中紅曲霉的簡易分離方法(編輯修改稿)
2025-08-19 02:20 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 層紗布過濾，濾液用雞蛋清法除濁后稀釋到 8 — 10 波美度。按 設(shè)計配方配制， /cm 2 滅菌 20 分鐘即成 [5] 。 4 大曲中紅曲霉的分離方法與技術(shù) 方法 稀釋平板法 （ pour plate method) 即 運用無菌操作， 將目的菌源微生物用無菌水作梯度稀釋，取定量菌液通常不超過 1ml 于無菌培養(yǎng)皿中，然后倒入融化冷卻至 50 ℃ 的培養(yǎng)基，混合搖勻，凝固后倒置、恒溫培養(yǎng) 1 — 3 天，就會出現(xiàn)單菌落，達(dá)到純種分離的目的。稀釋平板法，接種溫度較高，接種器具簡單，適合于利用孢子懸液等分離。 技術(shù) 根據(jù)紅曲霉的生物學(xué)特征及其生理特性在紅曲霉的分離純化過程中主要采用了基內(nèi)接種技術(shù)和無菌過濾收集孢子懸液技術(shù)。 基內(nèi)接種技術(shù) 基內(nèi)接種技術(shù)是相應(yīng)于稀釋平板法而言的，菌液接種于培養(yǎng)基的內(nèi)部，菌液與培養(yǎng)基充分混合，基內(nèi)接種技術(shù)，接種溫度較高，可使 某些熱敏感菌死亡 ，同時培養(yǎng)基內(nèi)部缺氧，某些好氧菌的生長受到抑制，可減少非目的微生物在培養(yǎng)基上的生長，而紅曲霉的孢子有一定的耐受性和抗逆力，因此影響不大。 無菌過濾收集紅曲霉孢子懸液技術(shù) 采用無菌過濾收集紅曲霉孢子懸液，用于紅曲霉純菌分離，可以縮短分離純化的次數(shù)，確保分離培養(yǎng)基平板上的紅曲霉菌落是單菌落，同時紅曲霉孢子的耐受力較強(qiáng)，有一定的抗逆性，適合基內(nèi)接種。 .1 無菌過濾裝置的準(zhǔn)備 用一玻璃短柄漏斗，在漏斗柄和頸結(jié)合處包棉花成棉塞狀，將漏斗柄插放到試管或三角瓶內(nèi)，棉塞要松緊適宜（以手握漏斗，試管或三角瓶不掉為準(zhǔn)），漏斗內(nèi)放折疊好的圓錐形濾紙，要求濾紙邊緣低于漏斗邊緣，然后用牛皮紙將整個漏斗包扎，滅菌備用。 .2 無菌過濾操作 用無菌小刀在漏斗的牛皮紙上劃一銳角形小口，在無菌環(huán)境中，用無菌鑷子掀起小口，將待濾樣液緩緩倒入
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