【文章內容簡介】 核化并體積變小，僅將嗜堿性粒細胞保持原有狀態(tài)，體積明顯大于其他類的白細胞。在散點圖上處于上面區(qū)域的為嗜堿性粒細胞；散點圖的橫坐標可表示細胞核結構的復雜性，處于左側的為單個核的細胞群，包括單核細胞和淋巴細胞；處于右側的為分葉核細胞；中間部位則考慮為桿狀核細胞；左下端為單個核的原始細胞區(qū)。圖7：ADVIA 120/2120儀器Perox通道和Baso通道散點圖該儀器在紅細胞、血小板的測定上也采用了光學檢測技術。通過激光照射掃描每個通過Flowcell的紅細胞，低角度散射光（2 176。~3 176。）用于測量細胞體積；高角度(5176?！?5176。)散射光測量每個紅細胞內的血紅蛋白濃度（CH）和血紅蛋白含量平均值CHCM。這兩個值不受紅細胞數(shù)量和血紅蛋白測定的影響。還可根據(jù)每個紅細胞內血紅蛋白濃度，計算出紅細胞內血紅蛋白分布寬度（HDW）值。其根據(jù)紅細胞在體積大小和單個紅細胞內血紅蛋白含量的分析，將紅細胞劃分為9個區(qū)域，得到紅細胞體積和色素含量分布的九分圖，也是該儀器在紅細胞分析方面獨有的特色，根據(jù)紅細胞分布情況可初步判斷疾病類別（下圖中）。在血小板計數(shù)分析上也同樣采用了二維光散射分析法，即可獲得血小板體積大小，可測量1~60fl內的各種大小不同的血小板，還可對血小板內容物含量（MPC）進行測定。血紅蛋白測定采用連續(xù)流動比色法和紅細胞散射光直接測定法兩種方法，有助于高脂血和高膽紅素血標本的血紅蛋白測定準確性。圖8：ADVIA 120/2120 紅細胞散點圖（左）和血小板散點圖（右）4 雙鞘流技術和細胞化學染色法ABX是法國生成血細胞分析儀器的著名廠家，其生產(chǎn)的全自動血細胞分析儀Pentra 120型為其高端產(chǎn)品。在白細胞分類上采用該公司特有的專利技術雙鞘流（DHSS）分析法。雙鞘流是專利技術，而測定本身是通過電阻抗和光吸收法雙重原理。標本首先在第一鞘流液中經(jīng)過電阻抗測定分析，得到細胞體積測定結果，然后通過第二鞘流引導再行光吸收率分析，對細胞內容物進行測定，最終將細胞測定信息在散射圖相應的位置表現(xiàn)出來。雙鞘流技術的核心部件是含有紅寶石小孔的復雜的鞘流池，在雙鞘流系統(tǒng)的上下兩端分別加上恒定電流，是保證電阻法的測量要素。為了保證被檢測的細胞能夠正確通過計數(shù)孔和鞘流通道，需要利用外來鞘流來進行矯正，因此通過左側鞘流泵注入稀釋液形成第一鞘流液，其作用是保護溶液能夠直接通過計數(shù)小孔，并且保證其中攜帶的細胞處于中心部位，液流不發(fā)生偏移和扭曲；溶液通過計數(shù)小孔后，再通過中間鞘流泵注入稀釋液形成第二股鞘流，用以保證吸光度測量。這樣的過程被稱為雙鞘流分析技術。圖9 雙鞘流技術示意圖儀器通過兩個通道來完成白細胞的五項分類。其采用的細胞化學染色技術（Cytochemistry）的原理是經(jīng)典的細胞分類技術，此染色劑中含有溶血素及氯唑黑活體染料（Chlorazol Black E）。在儀器的LMNE檢測池中，全血樣品與染色劑充分混勻，在35℃條件下進行孵育，此過程的作用是：① 溶解紅細胞 ②對單核細胞的初級顆粒、嗜酸性粒細胞和中性粒細胞的特異顆粒進行不同程度的染色，同時對細胞的膜（細胞膜、核膜、顆粒膜）也進行不同程度的著色 ③ 固定細胞的形態(tài)，使其保持自然狀態(tài)。由于淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞對染色劑的著色程度不同、每種細胞特定的細胞核形態(tài)和顆粒的結構造成光散射的強度不同，產(chǎn)生了特定的吸光率。染色后的標本被引導進入鞘流池進行雙鞘流分析，首先經(jīng)過60mm紅寶石小孔進行電阻法分析，用于判斷細胞體積大小，在LMNE散點圖上的橫坐標即可表示出細胞大小的特性。然后樣本迅速進入直徑為42mm的第二鞘流檢測通道進行光吸收率測定，以判斷細胞形態(tài)和內容物等情況。根據(jù)每類細胞在這兩個分析參數(shù)上所表現(xiàn)出來的特性，形成二維分布的散點圖。在此通道內可完成白細胞中淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞和嗜酸細胞群的分類。此通道內在分析的同時還能夠檢測兩群異常白細胞亞群：巨大未成熟細胞（LIC）百分比及絕對值，異型淋巴細胞（ALY）百分比及絕對值，同時還可提供多達82種提示和報警信息。在LMNE散點圖上，各類白細胞的特點是：①淋巴細胞：典型的淋巴細胞體積較小、形態(tài)規(guī)則、胞漿內沒有顆粒，其吸光率最低，所以定位在散點圖的右下部矩陣中，正常淋巴細胞散點圖為正態(tài)體積分布。②單核細胞：典型的單核細胞體積較大、腎狀核、胞漿內有初級顆粒（幾乎不著色），細胞核大且不分葉，光散射較少，所以位于吸光率軸的最下端，依據(jù)單核細胞的體積，位于體積軸的最右端，而異常單核細胞及特大單核細胞則可能出現(xiàn)在LIC的矩陣中。③中性粒細胞：典型的中性粒細胞具有嗜中性顆粒及分葉核的結構，中性顆粒部分著色，同時由于顆粒及核的分葉等形態(tài)上的復雜性，而產(chǎn)生光散射。所以中性粒細胞群散點圖位于中部。核分葉越多的中性粒細胞，吸光性越強，在散點圖上的位置向右移。同時桿狀細胞（Bands）體積與中性粒細胞接近，但核的復雜程度低，吸光率低，散點圖位于中性粒細胞與單核細胞之間。④嗜酸性粒細胞：由于嗜酸性粒細胞含有特異性顆粒，與染色液特異性著色，其著色強度最深，位于Y軸的最上端，此方法提高了嗜酸性粒細胞的分類的準確性。⑤巨大未成熟細胞（Large Immature Cell）：未成熟粒細胞因其體積較大，可含有顆粒，光散射強，位于嗜中性粒細胞散點圖的右側，在LIC矩陣圖中從左到右依次排列晚幼粒、中幼粒、早幼粒細胞，另外各種原始細胞位于單核細胞的右側區(qū)域中。由于此散點圖中可能有大單核細胞，可引起LIC假性計數(shù)增加（LIC的計數(shù)結果被計算到在嗜中性粒細胞中）。LIC包括：大單核細胞、高嗜堿性的單核細胞、巨大中性粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細胞、晚幼粒細胞、原始細胞。⑥異型淋巴細胞(Atypical Lymphs)：在散點圖中位于淋巴細胞與單核細胞之間的一群細胞，包括：小原始粒細胞、大淋巴細胞等。在WBC/BASO檢測池中，全血樣品與BasolyseII（）溶血素混合，在35176。C恒溫下，溶解紅細胞，由于嗜堿性粒細胞具有抗酸性，能夠保持形態(tài)完整，而其他白細胞胞漿溢出，成為裸核狀態(tài)。細胞通過一個直徑為80mm的鞘流微孔時，根據(jù)電阻抗原理進行測定，以細胞體積大小為橫坐標繪制WBC/BASO直方圖。依據(jù)閾值設定區(qū)分裸核化的白細胞與嗜堿性粒細胞。在直方圖上可以看出在中心界標左側的是細胞體積變小的其它細胞群，界標右側是體積較大的嗜堿性粒細胞。因嗜堿性粒細胞