【文章內(nèi)容簡介】 .　8　Snider H, Dowlatshahi K, Fan M, et al. Sentinel node biopsy in the staging of breast cancer. Am J Surg, 1998,176: 305310.　9　Crossin JA, Johnson AC, Stewart PB, et al. Gammaprobeguided resection of the sentinel lymph node in breast cancer. Am Surg, 1998, 64: 666668；discussion 669.10　Osborne MP, Wong GY, Asina S, et al. Sensitivity of immunocytochemical detection of breast cancer cells in human bone marrow. Cancer Res, 1991, 51: 27062709.11　Datta YH, Adams PT, Drobyski WR, et al. Sensitive detection of occult breast cancer by the reversetranscriptase polymerase chain reaction. J Clin Oncol, 1994,12: 475482.12　Schoenfeld A, Kruger KH, Gomm J, et al. The detection of micrometastases in the peripheral blood and bone marrow of patients with breast cancer using immunohistochemistry and reverse transcriptase polymerase chain reaction for keratin 19. Eur J Cancer, 1997, 33: 854861.13　Shak S. Overview of the trastuzumab (Herceptin) antiHER2 monoclonal antibody clinical program in HER2overexpressing metastatic breast cancer. Herceptin Multinational Investigator Study Group. Semin Oncol, 1999,26(Suppl 12): 7177.14　Jimenez RE, Wallis T, Tabasczka P, et al. Determination of Her2/Neu status in breast carcinoma: parative analysis of immunohistochemistry and fluorescent in situ hybridization. Mod Pathol, 2000,13:3745VEGF、CD34在乳腺癌中的表達(dá)研究 作者：　　時間：20071122 14:19:00　　來源：論文天下論文網(wǎng) 作者：姜乃光 李秋霞 單景軍 張玉英 石青嶺 【關(guān)鍵詞】 免疫組織化學(xué)　　【摘要】 目的 探討血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）與乳腺癌血管生成及臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 方法 采用SP免疫組化法，檢測54例乳腺癌石蠟標(biāo)本中VEGF蛋白的表達(dá)及平均微血管密度（miscrovessel density，MVD）。 結(jié)果 %。VEGF表達(dá)及MVD值與組織學(xué)分級（P）和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P），而與組織學(xué)分型無關(guān)（P）。VEGF陽性組MVD值明顯高于VEGF陰性組（t=，P）。 結(jié)論 VEGF與乳腺癌血管生成密切相關(guān)，并能促進(jìn)其生長、浸潤及轉(zhuǎn)移。檢測VEGF和MVD可作為反映乳腺癌生物學(xué)行為的指標(biāo)之一。 　　關(guān)鍵詞 乳腺腫瘤 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 血管生成 免疫組織化學(xué) 　　腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移是一個多步驟的復(fù)雜過程，在很大程度上依賴于腫瘤血管生成。目前的研究認(rèn)為:血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是腫瘤血管生成過程中作用最強(qiáng)、特異性最高的促血管生長因子 ［1］ 。筆者應(yīng)用免疫組化法檢測乳腺癌組織中VEGF和MVD的表達(dá)情況，分析VEGF及微血管密度（miscroressel density，MVD）與乳腺癌各臨床病理參數(shù)的關(guān)系，并為臨床預(yù)后判定和治療提供進(jìn)一步的理論根據(jù)。 　　1 材料與方法 　　 標(biāo)本來源 選取我院普外科1996～2003年乳腺癌根治術(shù)或改良根治術(shù)切除標(biāo)本54例。病理及臨床資料分析結(jié)果:浸潤性癌40例，其他特殊類型癌14例。組織學(xué)分級:Ⅰ級9例，Ⅱ級32例，Ⅲ級13例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者30例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者24例?；颊呔鶠榕?，年齡23～68歲（平均52歲），術(shù)前均未經(jīng)任何治療。 　　 主要試劑 所用VEGF、CD34單克隆抗體及超敏（鼠）SP試劑盒，均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。 　　 SP免疫組化染色 操作步驟從略。其中鼠抗人VEGF單克隆抗體采用高溫高壓進(jìn)行抗原修復(fù)。每次試驗(yàn)以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照，以已知VEGF陽性的切片作為陽性對照?！　?結(jié)果判定 　　 VEGF表達(dá) 根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)及染色強(qiáng)度進(jìn)行綜合判定，即按5%以上細(xì)胞漿或細(xì)胞膜呈棕黃色染色者為VEGF蛋白表達(dá)陽性。 　　 MVD計(jì)數(shù) 參照Maeda等報(bào)道 ［2］ 的方法，即低倍鏡下，全面觀察CD34染色陽性的血管，選取腫瘤微血管密度最高區(qū)域，然后在高倍鏡下（200）選取5個不重復(fù)視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，求其平均數(shù)即作為該病例的MVD值。統(tǒng)計(jì)的微血管標(biāo)準(zhǔn):單個的棕黃色內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)均計(jì)數(shù)為一個血管。肌層較厚及管腔紅細(xì)胞數(shù)8個的血管不被計(jì)數(shù)?！　?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用χ 2 檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)及q檢驗(yàn)。 　　2 結(jié)果 　　 VEGF蛋白表達(dá) VEGF蛋白定位于腫瘤細(xì)胞胞漿及胞膜，陽性表達(dá)為胞漿或胞膜染為棕黃色，呈彌漫或散在的顆粒狀。在54例乳腺癌組織中，VEGF表達(dá)陽性41例（%），癌間質(zhì)內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)或呈弱陽性表達(dá)，癌旁組織幾乎不表達(dá)。 　　 MVD檢測 CD34定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿，呈棕黃色。所有的病例的血管內(nèi)皮細(xì)胞均為CD34染色陽性。癌組織MVD值11～106個不等，平均為（177。）個。　　 VEGF蛋白表達(dá)及MVD與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系 　　 組織學(xué)分級 VEGF表達(dá)陽性率及MVD值隨組織學(xué)分級增高而逐漸增加。VEGF表達(dá)在Ⅰ級與Ⅱ級、Ⅰ級與Ⅲ級間，差異具有顯著性（P均）。單因素方差分析顯示，三組間MVD值比較差異具有非常顯著性（P）。兩組