醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)本科畢業(yè)論文正稿doc(編輯修改稿)
2025-08-13 18:51 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 質(zhì)控品及空白對(duì)照，每孔50ul?？瞻讓?duì)照加入1PBS緩沖液。．加樣步驟加入酶標(biāo)抗體，50 ul/well，震蕩。37℃電熱恒溫培養(yǎng)箱溫育60min，取出后洗板4次， 加入A、B液, 50 ul/ well，37℃電熱恒溫培養(yǎng)箱溫育15 min。加入終止液，50 ul/ well。酶標(biāo)板放入酶標(biāo)儀，蓋上蓋子，在電腦上打開Microplate Manager ，選擇450nm波長(zhǎng)（參照波長(zhǎng)630nm），設(shè)置LAYOUT和報(bào)告模式，測(cè)定各孔吸收值。2. 結(jié)果 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍標(biāo)準(zhǔn)品理論濃度對(duì)應(yīng)的實(shí)測(cè)OD值以HBsAg理論濃度為橫坐標(biāo)，所測(cè)OD值為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線觀察線性關(guān)系，結(jié)果顯示R2=，顯示具有良好的相關(guān)性 準(zhǔn)確度（回收率）的驗(yàn)證 質(zhì)控品理論稀釋濃度對(duì)應(yīng)實(shí)測(cè)濃度值質(zhì)控品做了3個(gè)濃度梯度，每個(gè)濃度做了5個(gè)復(fù)孔，下表是對(duì)每個(gè)濃度梯度進(jìn)行準(zhǔn)確度（回收率）的驗(yàn)證。結(jié)果顯示HBsAg 6ng/ml和3ng/%，%，滿足限度要求在85%115%的范圍內(nèi)，而HBsAg ，滿足方法定量限在80%120%的范圍內(nèi)。%，顯示準(zhǔn)確性好。 板內(nèi)精密度的驗(yàn)證上表中RSD(%)這一參數(shù)表示相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，也就是變異系數(shù)CV值，HBsAg 6ng/%，顯示孔間差異較大，精密度不高，但是也符合ng/ml級(jí)RSD水平的一般應(yīng)15%的要求，與其它孔比較差異較大，可能是由于操作引起例如加樣不準(zhǔn)。而3ng/ml,，%，符合顯示孔間重復(fù)性好，符合ng/ml級(jí)RSD水平的一般應(yīng)15%的要求，精密度高。 板間精密度的驗(yàn)證 從同一實(shí)驗(yàn)室中獲取2組同樣的數(shù)據(jù)，做板間精密度的驗(yàn)證。首先對(duì)同一實(shí)驗(yàn)條件下不同實(shí)驗(yàn)人員所獲得的數(shù)據(jù)是否可用于板間分析做驗(yàn)證。以HBsAg理論濃度為橫坐標(biāo)，所測(cè)OD值為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線觀察線性關(guān)系。以上標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果顯示第二組數(shù)據(jù)的R2 =，第三組數(shù)據(jù)R2 =。第二組數(shù)據(jù)由于有一些孔與標(biāo)準(zhǔn)曲線偏離較大，但考慮到隨機(jī)抽樣與均數(shù)存在一定誤差，還是可以用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。下表對(duì)3組數(shù)據(jù)做板間分析。從表中3個(gè)組的數(shù)據(jù)比較可知，HBsAg 6ng/ml和3ng/%，%，滿足對(duì)ng/ml級(jí)水平的RSD一般應(yīng)15%的要求，精密度高。而HBsAg ，不滿足ng/ml級(jí)水平的RSD一般應(yīng)15%的要求，顯示低濃度的孔間重復(fù)性差，精密度不是很高。 ，精密度分析 從上表可知第一組數(shù)據(jù)和第三組數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性差，精密度高。而第二組數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高，而精密度相對(duì)于第一組和第三組數(shù)據(jù)要好。 檢測(cè)限（LOD）計(jì)算 LOD為取空白孔的OD值的均數(shù)加2倍標(biāo)準(zhǔn)差。由上表可知。檢測(cè)限（LOD）表示分析方法檢測(cè)低濃度樣品的能力，也稱為方法的靈敏度，LOD通常為標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)，要求標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)應(yīng)LOD，大于LOD（），故此標(biāo)準(zhǔn)曲線線性好。3. 討論 乙肝表面抗原定量分析的意義乙肝表面抗原是乙肝兩對(duì)半的其中一項(xiàng)，乙肝兩對(duì)半定性檢測(cè)對(duì)乙肝疾病的診斷，病情監(jiān)測(cè)，療效觀察起到了一定的作用。但隨著臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，乙肝兩對(duì)半定性檢測(cè)已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床及患者的要求，特別是在療效觀察以及乙肝疫苗注射后抗體產(chǎn)生情況的觀察上有明顯的不足。隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，乙肝兩對(duì)半定量測(cè)定成為可行，大大彌補(bǔ)了乙肝兩對(duì)半定性檢測(cè)的不足。而且乙肝兩對(duì)半定量檢測(cè)可與HBV DNA熒光測(cè)定相互補(bǔ)充，綜合評(píng)價(jià)患者病情與藥物療效，為低含量的慢性乙肝、病毒攜帶者提供了正確判斷病情的依據(jù)【2】。這在目前的臨床治療中應(yīng)用十分廣泛。 常用定量
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