各類標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(編輯修改稿)
2025-08-11 22:13 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 一側(cè)輕抬，亦可使多數(shù)氣泡逸出。攪拌時(shí)產(chǎn)生的氣泡可隨時(shí)用針將其移出。裝片用的液體如易揮發(fā)，應(yīng)裝片后立即觀察。用水裝片也較易蒸發(fā)而干涸，通常滴加少許甘油可延長(zhǎng)保存時(shí)間。需用水合氯醛試液透化時(shí)，應(yīng)注意掌握操作方法。裝片后用手執(zhí)其一端，保持水平置小火焰上約1～2cm處加熱，并緩緩左右移動(dòng)使之微沸，見氣泡免同時(shí)離開火焰，待氣泡停止逸出再放在小火上，并隨時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)的試液，如此反復(fù)操作，直至粉末呈透明裝為止，放涼后滴加甘油鏡檢。粉末藥材制片時(shí)，每片鄧用量宜少不宜多，為使觀察全面可多做些制片。如取量多，顯微特征單一輪廓不清，反而費(fèi)用時(shí)，不易得出準(zhǔn)確強(qiáng)論。中成藥制劑的粉末檢查，因在多味藥材粉末中尋找某一味藥的某一顯微特征，有時(shí)較難查見，可以取粉末量多些，置試管或小燒杯中，加入水合氯醛試液，加熱透化。透化好后再用吸管吸出，滴在載玻片上，加蓋玻片，即可觀察。 表面標(biāo)本片：主要用于葉類、花類（萼片、花瓣）、果實(shí)、草質(zhì)莖及鱗莖等藥材的表面特征如毛茸、氣孔、表皮細(xì)胞等的觀察。質(zhì)地菲薄的藥材可以整體裝片；較厚的藥材則須撕下表皮然后裝片。 整體裝片：適用于較薄的葉片、萼片和花瓣、剪取欲觀察部位約4mm2的兩小片，一反一正放在載玻片上，加水合氯醛試液，加熱透化至透明為止，蓋好玻片即得。 表面撕離裝片：凡較厚的或新鮮藥材，用上法不能使之透或不便于整體裝片。將軟化了的或新鮮材料固定住，然后用鑷子夾住要?jiǎng)內(nèi)∷弘x的部分，小心的撕離，或用解剖刀輕輕割（刮）去不需要的各層組織，只保留表皮層（上層或下層），將欲觀察的表破表面觀朝上，置載玻片上，加透化劑透化后，放冷，加稀甘油1滴，蓋上玻片，貼品名簽，即得。 解離組織片：適用于厚壁組織或輸導(dǎo)組織等的單個(gè)細(xì)胞的顯微觀察。將樣品切成段（長(zhǎng)約5mm，粗約2mm）或片（厚約1mm），對(duì)于木類或莖類木質(zhì)部，最好切成縱長(zhǎng)的小段。然后根據(jù)細(xì)胞壁的性質(zhì)，按照下列方法之一進(jìn)行處理：如樣品堅(jiān)硬，木化組織羅多或集成較大群束，可用硝鉻酸法或氯酸鉀法；對(duì)于薄壁組織占大部分或分散存在的樣品，可用氫氧化鉀法。 氫氧化鉀法：置樣品于試管中，加5%氫氧化鉀溶液2～5ml，加熱至用玻璃棒擠壓，能離散為止，傾去堿液，加水洗滌后，取出少量置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_，以稀甘油裝置觀察。 硝鉻酸法：置樣品于小燒杯中，加20%硝酸與20% 鉻酸的等量混合液適量，使之浸沒樣品，放置約30～60分鐘，堅(jiān)硬的樣品需時(shí)要長(zhǎng)些，也可在水浴上微溫，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，用水洗滌后，取出少量置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_，以稀甘油裝置觀察。 氯酸鉀法：置樣品于試管中，加硝酸溶液（1～2ml）及氯酸鉀少量，緩緩加熱，待產(chǎn)生的氣泡漸少時(shí)，再及時(shí)加入氯酸鉀少量以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生，至用玻璃棒擠壓能離散為止。傾去酸液，用水洗滌后，撕開，封藏。 注意事項(xiàng)：用氯酸鉀法制片時(shí)，每次加入的氯酸鉀不可過多，加熱溫度不宜過高，否則突沸騰容易使液體逸出管外。加熱時(shí)間長(zhǎng)短因樣品的硬度和木化程度而異，通常約需5～15分鐘。操作過程中產(chǎn)生的氯氣有毒，應(yīng)注意通風(fēng)。用硝鉻酸法解離也可在載玻片上進(jìn)行。即取一塊厚度適當(dāng)?shù)那衅?，置載玻片上，滴加硝鉻酸試液使之浸沒，放置約20分鐘后，輕輕壓下或移動(dòng)蓋玻片使之分離其余操作同前，此法解離的細(xì)胞，可以看清其分離的組織部位。 花粉粒與孢子制片：取花粉、花藥（或小的花）或孢子囊群（干燥樣品浸于冰醋酸中軟化），用玻璃棒搗碎，紗布過濾，濾液置離心管中，離心，取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸（9：1）的混合液1～3ml，置水浴上加熱2～3分鐘，離心，取沉淀，用水洗滌2次，加50%甘油與1% 苯酚3～4滴，用品紅甘油膠封藏觀察。也可直接用水合氯醛試液裝片，具體操作同粉末標(biāo)本片。 磨片：凡需觀察斷面，以一般切片無(wú)法制作的標(biāo)本，如堅(jiān)硬的動(dòng)物類藥材珍珠、石決明、動(dòng)物骨骼、礦物藥等可采用磨片法制片。片的厚度一般為20～50μm。磨片方法有手工磨制與機(jī)器磨制。 手工磨制：選取合適的材料，一般以1～2mm為度，先置粗磨石（或磨砂玻璃板）上，加適量水，用食指、中指夾材料，在磨石上往返研磨,待兩面磨均勻，厚度約數(shù)百μm后，改用軟木塞壓在上面，再在細(xì)磨石上加水磨，磨至透明時(shí)（20～50μm），用水沖洗，再用95%乙醇處理，封藏。 機(jī)器磨制：地質(zhì)礦產(chǎn)部門有專門人員機(jī)構(gòu)與設(shè)備制作。 顯微測(cè)量顯微鑒定時(shí)應(yīng)用測(cè)量方法以測(cè)定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小，應(yīng)用最多的則是長(zhǎng)度測(cè)定。常用的量具是目鏡測(cè)微尺與載物臺(tái)測(cè)微尺。 目鏡測(cè)微尺，又稱目鏡量尺或目微尺。它是放在目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺，是一個(gè)直徑18～20mm的圓形玻璃片，中央刻有精確待距離的平行線刻度，常為50或者100條。目鏡測(cè)微尺是用以直接測(cè)量物體用的，但其刻度所代表的長(zhǎng)度是根據(jù)顯微鏡放大倍數(shù)不同而改變，故使用前必須用載物臺(tái)測(cè)微尺來(lái)標(biāo)化。 載物臺(tái)測(cè)微尺，又稱鏡臺(tái)測(cè)微尺或臺(tái)微尺。它是一種特制的載皮片，中央粘有一小圓形玻片、上刻有將1mm（或2mm）精確等分為100（或200）小格的細(xì)線，每一小格長(zhǎng)為 10μm，它是用以標(biāo)化目鏡測(cè)微尺的。 目鏡測(cè)微尺的標(biāo)化，以確定使用同一顯微鏡及特定倍數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長(zhǎng)度時(shí)，目鏡測(cè)微尺上每一格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。標(biāo)化方法：將載物臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡鏡臺(tái)上，按常規(guī)對(duì)光調(diào)焦，并移動(dòng)測(cè)微尺物象于視野中央；從鏡筒中取下目鏡，旋下接目鏡的目鏡蓋，將目鏡測(cè)微尺放入目鏡筒中部的光欄上（應(yīng)正面向上），旋上目鏡蓋后返置鏡筒上。此時(shí)在視野中，除鏡臺(tái)測(cè)微尺的象外，還同時(shí)可觀察到目鏡測(cè)微尺的分度小格，移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和旋轉(zhuǎn)目鏡，使兩種量尺的刻度平行。左邊的“0”刻度重合，尋找第二條重合刻度。記錄兩刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度（μm）。例如：接目鏡頭為10，接物鏡頭為40時(shí)，目鏡測(cè)微尺每17小格相當(dāng)于載物臺(tái)量尺4小格，則目鏡測(cè)微尺每1小格的長(zhǎng)度為4010um247。17＝。 測(cè)定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物的方法將載物臺(tái)測(cè)微尺取下，換以裝有待測(cè)的標(biāo)本載片。對(duì)光，調(diào)焦，移動(dòng)載片，使需測(cè)量的目的物置于目鏡量尺范圍內(nèi)，調(diào)清物象，計(jì)數(shù)出目的物占測(cè)微尺的小格數(shù)，乘以目鏡尺每1小格的長(zhǎng)度值即得。計(jì)算公式： 待測(cè)物體長(zhǎng)度（μm）＝鏡臺(tái)微尺與目鏡微尺重合時(shí)所具的長(zhǎng)度所測(cè)物體占有目鏡測(cè)微尺的格數(shù)／目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺重合時(shí)所占的格式例如：測(cè)得淀粉粒長(zhǎng)徑為20小格，20＝47μm。 注意事項(xiàng)3 測(cè)量通常是在高倍鏡下進(jìn)行，因目鏡量尺的每一小格的長(zhǎng)度值較小，結(jié)果較為準(zhǔn)備。 每次測(cè)量記下數(shù)據(jù)，并分析數(shù)據(jù)最小量值、最大量值和多見值（μm）。 目鏡測(cè)微尺所代表的長(zhǎng)度值隨不同目鏡與物鏡配合而異因此在實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將專用的目鏡測(cè)微尺，在所用顯微鏡不同倍數(shù)的目鏡與物鏡組合后，進(jìn)行測(cè)量其長(zhǎng)度值，全部測(cè)定后記載于實(shí)驗(yàn)記錄本或?qū)?shù)值表貼在顯微鏡子座上，備用。 測(cè)量時(shí)，如大小與規(guī)定有差異時(shí)，允許有少量略高于或低于規(guī)定的數(shù)值。 顯微鑒別法注意事項(xiàng) 粉碎用具用完后，必須處理干凈，干燥后才能使用于另一種藥材。 所用蓋玻片和載玻片應(yīng)絕對(duì)干凈。溶解標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1 儀器及用具架盤藥物天平（最大稱量100g，）玻璃棒1支容量瓶1個(gè)燒杯1個(gè)滴管1個(gè)2 操作方法 取出架盤天平，放在水平桌面上，在左右兩盤上放兩張等大小的稱量紙，調(diào)節(jié)天平平衡。 在干凈的右盤上放相應(yīng)的砝碼，并調(diào)節(jié)游碼共a（g）。 然后取出A試劑瓶，打開瓶蓋，倒扣在桌面上。用藥勺逐量添加A試劑到天平左盤上至天平平衡。蓋好A試劑瓶蓋，并放回原位置。 小心取下左盤的稱量紙及藥，輕輕倒入小燒杯中，打開溶劑B瓶蓋，倒扣在桌面上，拿起試劑瓶（注意把有標(biāo)簽的一側(cè)朝向手心），加溶劑少許使A溶解。蓋好A試劑瓶蓋，并放回原位置。 用玻璃棒轉(zhuǎn)移至b（ml）的容量瓶中。轉(zhuǎn)移時(shí)，將玻璃棒伸入容量瓶中，使其下端靠住瓶頸內(nèi)壁，上端不要碰瓶口，燒杯嘴緊靠玻璃棒，使溶液沿玻璃棒和內(nèi)壁流入。 溶液全部轉(zhuǎn)移后，將玻璃棒稍向上提起，同時(shí)使燒杯直立，將玻璃棒放回?zé)?用洗瓶中的純化水吹洗玻璃棒和燒杯內(nèi)壁，將洗滌液也轉(zhuǎn)移至容量瓶中。 如此反復(fù)洗滌多次（至少3次）。 完成定量轉(zhuǎn)移后，加水至容量瓶容積的3/4左右時(shí)，將
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