【文章內(nèi)容簡介】 物，雖仍有藥效，但會迅速進一步氧化、斷裂、生成一系列有色的無效物質(zhì)。氧化反應式如下：抗壞血酸 去氫抗壞血酸2，3二酮L古羅糖酸 +草酸 L丁糖酸 溶液的pH值、氧、重金屬離子和溫度對Vitamin C的氧化均有影響。針對Vitamin C溶液易氧化的特點，在注射液處方設計中應重點考慮怎樣延緩藥的氧化分解，通常采取如下措施：（1）除氧，盡量減少藥物與空氣的接觸，在配液和灌封中通入惰性氣體，常用高純度的氮氣和二氧化碳。（2）加抗氧劑。（3）調(diào)節(jié)溶液pH在最穩(wěn)定pH范圍。（4）加金屬離子絡合劑。金屬離子對藥物的氧化反應有強烈的催化作用，當Vitamin ，其氧化速反可以增大104倍，故常用依地酸鈉或依地酸鈣鈉絡合金屬離子。三、儀器和材料儀器：燒杯，量筒，普通天平。3號垂熔玻璃漏斗，安瓿（2ml），pH計，灌注器，熔封設備，電爐，水浴，澄明度檢查臺。材料：Vitamin C（注射用規(guī)格）、碳酸氫鈉（注射用規(guī)格）、焦亞硫酸鈉（注射用規(guī)格）、依地酸二鈉（注射用規(guī)格）、二氧化碳、注射用水、鋼瓶、亞甲藍、硫酸銅。四、實驗內(nèi)容 處方： 維生素C 52g 碳酸氫鈉 亞硫酸氫鈉 依地酸二鈉 注射用水 加至1000ml 制法：（1）原輔料質(zhì)檢與投料計算 供注射用的原料藥與輔料必須經(jīng)檢驗達到注射用原料標準才能使用。按處方計算投料量,如注射劑滅菌后含量下降,應酌情增加投料量（2）空安瓿的處理空安瓿→鋸口→圓口→灌水→熱處理→洗滌→烘干（3）注射液的配制量取處方量80%的注射用水，通二氧化碳飽和，加依地酸二鈉、Vitamin C使溶解，分次緩緩加入碳酸氫鈉，攪拌使完全溶解，加焦亞硫酸鈉溶解，攪拌均勻，調(diào)節(jié)藥液 ，添加二氧化碳飽和的注射用水至足量。用G3垂熔漏斗預漏。檢查濾液澄明度。（4）灌注與熔封將過濾合格的藥液，立即灌裝于2ml安瓿中，通二氧化碳于安瓿上部空間，要求裝量準確，藥液不沾安瓿領壁。隨灌隨封，熔封后的安瓿頂部應圓滑、無尖頭、鼓泡或凹陷現(xiàn)象。（5）滅菌與檢漏將灌封好的安瓿用100℃流通蒸氣滅菌15分鐘。滅菌完畢立即將安瓿放入1%亞甲蘭水溶液中，剔除變色安瓿，將合格安瓿洗凈、擦干，供質(zhì)量檢查。2. 質(zhì)量檢查：(1)pH值：~。 按中國藥典2000版二部附錄 VI H檢查方法進行；(2)顏色：按中國藥典2000版二部附錄檢查方法進行；(3)澄明度： 按中國藥典2000版二部附錄檢查方法進行；(4)熱原：按中國藥典2000版二部附錄XI A檢查方法進行；(5)含量測定：%~%；其他: 按中國藥典2000版二部注射劑通則(附錄I B)項下。實驗指導一、預習要求：1． 1．了解Vitamin C的有關化學性質(zhì)，復習影響藥物氧化速度的因素2． 2．掌握注射用水的制備方法與質(zhì)量要求；3． 3．了解注射劑生產(chǎn)上常用的潔凈技術(shù)；4． 4．了解常用濾器的特性與使用方法；5. 復習注射劑成品質(zhì)量檢查的標準與方法。二、操作要點和注意事項：（一） （一）注射劑制備一般要點 由于注射劑直接注入人體組織或血管，吸收快，作用迅速, 特別是靜脈注射，無吸收過程，常用于搶救危重病人，所以對注射劑的生產(chǎn)原料、生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制的要求都極其嚴格。注射劑的生產(chǎn)車間設施必須符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求，必須按生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量的要求劃分潔凈級別：一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)。控制區(qū)與潔凈廠區(qū)內(nèi)的空氣中塵粒數(shù)?；钗⑸飻?shù)、溫度、濕度應符合有關規(guī)定。 安瓿切割前須先經(jīng)外觀檢查、清潔度試驗、耐熱、耐酸、耐堿性試驗以及中性試驗等。切割的長度應符合要求以利于洗滌和灌封；切割后斷面須用火焰圓口，以免玻璃悄掉入安瓿內(nèi)。為提高洗滌效果，在洗滌前安瓿內(nèi)先灌入去離子水（%鹽酸），經(jīng)100℃蒸煮30分鐘的熱處理后，再趁熱甩水，以濾凈的去離子水（或蒸餾水）灌洗數(shù)次。大生產(chǎn)時，1～2ml小安瓿須經(jīng)灌水機和甩水機反復數(shù)次操作，洗凈的安瓿應立即烘干備用。調(diào)配器具使用前，要用洗滌劑或硫酸清潔液處理洗凈。臨用前用新鮮注射用水蕩洗或滅菌處理，不得引入雜質(zhì)及熱原。3．配液方法 有稀配法和濃配法兩種，可根據(jù)原料純度加以選用。4. 藥液過濾 有減壓過濾、加壓過濾以及高位自然滴濾等。過濾用具的種類較多，砂濾棒、壓濾機等常用作初濾，再依次經(jīng)垂熔玻璃濾器和微孔濾膜精濾，使藥液澄明并除去微粒。5．灌封 灌注藥液時盡量不使藥液碰到安瓿頸口，以免封口時產(chǎn)生炭化和白點等。灌裝后隨即封口。手工熔封時，火焰應用調(diào)節(jié)至細而呈藍色，待玻璃燒紅后用鑷子夾去頂部并在火焰中斷絲。6．滅菌、檢漏 封口后應及時滅菌，趁熱放入亞甲藍溶液中檢漏。（二）維生素C注射液制備要點1．維生素C顯強酸性，加入碳酸氫鈉使其部分中和成鈉鹽，又可避免酸性太強，在注射時產(chǎn)生疼痛。加入碳酸氫鈉至維生素C溶液中時應緩慢，以防溶液溢出，并應充分攪拌以免局部堿性過強。2．維生素C易氧化變色、含量下降，尤其當金屬離子（特別是銅離子）存在時變化更快。故在處方中加入NaHSO3作抗氧劑，EDTA作金屬離子絡合劑，并在藥液內(nèi)和灌封時均通CO2氣，盡量避免藥液與金屬器具接觸，以減少氧化。3．惰性氣體的使用 對維生素C等易氧化藥物的注射液，除加入抗氧劑、金屬離子絡合劑等外，較有效的方法是在配液和灌封時通入高純度氮氣或二氧化碳等惰性氣體。惰性氣體應先通過洗氣裝置，除去微量雜質(zhì)。使用純度較低的二氧化碳時，可將氣體分別通過盛裝濃硫酸，1%硫酸銅、1%高錳酸鉀溶液的洗氣瓶處理，以分別除去水分、硫化物、有機物和微生物，最后經(jīng)注射用水洗氣瓶除去可溶性雜質(zhì)和二氧化硫。若惰性氣體純度較高時，只需通過甘油和注射用水洗滌即可。氮氣應依次通過堿式焦性沒食子酸溶液和10%高錳酸鉀溶液（除去氧和有機物質(zhì)）。4. 為減少維生素C氧化變色，滅菌時間控制在100℃、15分鐘。三、思考題 1．分析影響注射劑澄明度的因素。2．用NaHCO3調(diào)節(jié)維生素C注射液的pH值，應注意什么問題？為什么？3．影響藥物氧化的因素有哪些？如何防止？4．何謂注射用水？制備時主要采用哪些方法和設備？實驗四 維生素C注射液穩(wěn)定性加速實驗一、目的和要求1．了解應用化學動力學方法預測注射液穩(wěn)定性的原理。2．掌握應用恒溫加速實驗法測定維生素C注射液的貯存期的方法。二、基本概念和實驗原理在研究制劑的穩(wěn)定性以確定其有效期（或貯存期）時，室溫留樣考察法雖然結(jié)果可靠但所需時間較長（一般考察2～3年），而加速試驗法（如恒溫加速試驗法等）可以在較短得時間內(nèi)對有效期或貯存期作出初步的估計。維生素C（VC）的氧化降解反應已由實驗證明為一級反應。一級反應的速度方程為： （ －1）式中:－ 表示VC濃度減少的瞬時速度，C表示VC在瞬間t的濃度。對式（ －1）積分，以C0表示反應開始時（t＝0）VC的濃度，則得： （ －2） 式中k為VC得氧化降解速度常數(shù)。由式（ －2）可知，以lgC對t作圖呈一直線關系，其斜率為－k∕,截距為lgCO，由斜率可求出速度常數(shù)k。反應速度常數(shù)k和絕對溫度T之間的關系，可用Arrhenius公式表示： （ －3） 或 （ －4）式中：A—頻率因子；Ea—活化能；R—氣體常數(shù)（?度－1?摩爾－1）。由式（－4）可知，以lgk對1/T作圖呈一條直線，其斜率為－Ea∕，截距為lgA，由此可求出反應活化能Ea和斜率因子A。將Ea和A再代回式（－4），可求出室溫（25℃）或任何溫度下得氧化降解速度常數(shù)和貯存期。三、儀器和材料儀器：恒溫水浴，酸式滴定管（25ml）,錐形瓶（50～250ml）等。材料：維生素C注射液（2ml∶），∕L碘液，丙酮，稀醋酸，淀粉指示液等。四、實驗內(nèi)容（一）試驗方法放樣 將同一批號的VC注射液樣品（2ml∶）分別置4個不同溫度（如70、80、90和100℃）的恒溫水浴中，間隔一定時間（如70℃為間隔24h，80℃為12h,90℃為6h，100℃為3h）取樣，每個溫度的間隔取樣次數(shù)均為5次。樣品取出后，立即冷卻或置冰箱保存，供含量測定。VC含量測定方法 精密量取樣品液1ml，置150ml錐形瓶中，加蒸餾水15ml與丙酮2ml，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4ml與淀粉指示液1ml,用碘液（∕l）滴定，至溶液顯藍色并持續(xù)30秒不褪。每1ml碘液（∕l）（C6H8O6）,分別測定各樣品中的VC的含量, 同時測定未經(jīng)加熱試驗的原樣品中VC含量，記錄消耗碘液的毫升數(shù)。 （二）實驗數(shù)據(jù)處理1．數(shù)據(jù)整理 由于含量測定所用的是同一種碘液，故不必考慮碘液的精確濃度，只要比較消耗碘液的毫升數(shù)即可。將未經(jīng)加熱的樣品（表1－1中時間項為0）所消耗碘液的毫升數(shù)（即初始濃度）作為100％相對濃度，各加熱時間內(nèi)的樣品所消耗碘液的毫升數(shù)與其相比，得出各自的相對濃度百分數(shù)（C相，％）。實驗數(shù)據(jù)如表 －1。表 －1 70℃恒溫加速試驗各時間內(nèi)樣品的測定結(jié)果加熱間隔時間h消耗碘液 mlC相，％lg(C相，％)123平均024437296120100在其它溫度下考察的實驗數(shù)據(jù)，均按表（ －1）的格式記錄并計算。2．求4種試驗溫度的VC氧化降解速度常數(shù)（k70~k100） 用回歸方法求各溫度的k 值時，先將各加熱時間（x）與其對應的lg(C相，％)值（y）列表（表 －2）表16－2 加熱時間及其相對濃度（％）對數(shù)值的回歸計算表（70℃）x. 加熱時間024487296120y. lg(C相，％) 用具有回歸功能的計算器，將x和y值回歸，直接得出截距，斜率和相關系數(shù)。由斜率b即可計算出降解速度常數(shù)k，例如在70℃：k70=b（－） （ －5）同上,求出各溫度的k值。3. 根據(jù) Arrhenius公式求VC氧化降解反應的活化能（Ea）和頻率因子（A） 將計算求得的降解速度常數(shù)k和對應溫度（T）記錄在表－3。表 －3 不同溫度下VC注射液的降解速度常數(shù)T343(273+70℃)353(273+80℃)363(273+90℃)373(273+100℃)x’ 103y’ lgk以x’為橫坐標y’為縱坐標, 進行回歸計算。計算出直線斜率b’，截距a’和相關系數(shù)r’，故VC氧化降解活化能為：Ea＝b39。()R （ －6）式中，R為氣體常數(shù)；頻率因子即為直線截距的反對數(shù)。4．求室溫（25℃）時的氧化降解速度常數(shù)（k25） 根據(jù)式（ －4）有： （ －7）或 （ －8）代入Ea、A、R或已知溫度T及對應的氧化降解速度常數(shù)k，即可計算k25。該值亦可將 lgk－ 圖中的直線外推至室溫求出。 5． (損失10％所需的時間) 由下式計算：＝∕k25 ( －9)實驗指導一、預習要求1．掌握研究藥物制劑穩(wěn)定性的意義。2．了解藥物制劑穩(wěn)定性實驗方法。3．熟悉VC注射液用碘量法測定時的操作要點。4．列出實驗步驟、要點及掌握數(shù)據(jù)處理方法。二、操作要點和注意事項1．實驗中所用VC注射液的批號應全部相同。按規(guī)定間隔時間加熱、取出后，應立即測定VC含量，否則應置冰箱保存，以免含量起變化。2．測量VC含量時，所用碘液的濃度應前后一致（宜用同一瓶的碘液），否則含量難以測準。因各次測定所用的是同一碘液，故碘液的濃度不必精確標定，注射液VC含量亦可不必計算，只比較各次消耗的碘液毫升數(shù)即可。一般將零時間樣品（即未經(jīng)加熱的VC注射液）消耗的碘液毫升數(shù)作為100％相對濃度，其它各時間消耗的碘液毫升數(shù)與它比較，從而得出各時間的C相，％（見表16－1）3．經(jīng)典恒溫法常采用4個溫度進行加速實驗，各溫度的加熱間隔時間點一般應取5個。間隔時間的確定，應以各次消耗的碘液毫升數(shù)有明顯差別為宜。4．測定VC含量時，加丙酮的作用是：因VC注射液中加有亞硫酸氫鈉等抗氧劑，其還原性比烯二醇基更強，因此要消耗碘；加丙酮后就可避免發(fā)生這一作用，因為丙酮能與亞硫酸氫鈉起發(fā)應。5．測定VC含量時，加稀醋酸的作用是：VC分子中的烯二醇基具有還原性，能被碘定量地氧化成二酮基，在堿性條件下更有利于反應的進行，但VC還原性很強，在空氣中極易被氧化，特別在堿性時；所以，加適量醋酸保持一定的酸性，以減少VC受碘以外其它氧化劑的影響。三、思考題1．藥物制劑穩(wěn)定性研究的范圍是什么？2．留樣觀察法有何特點？3．經(jīng)典恒溫加速試驗法的理論依據(jù)是什么？設計實驗時應考慮那些步驟及注意點？4．參考數(shù)理統(tǒng)計方法等有關內(nèi)容，試計算加速試驗預報的貯存期的可信區(qū)間。計算結(jié)果說明什么問題，為什么？實驗五 W/O/W型利福平復乳的制備一、目的和要求1．熟悉復乳的特點及類型。2．熟悉二步法制備復乳的方法。3．熟悉影響復乳的因素及增加復乳穩(wěn)定性的方法，了解復乳的乳化劑類型。