不同生長(zhǎng)期異堇葉碎米薺葉揮發(fā)性成分及硒含量分析畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2024-07-25 09:37 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 高的價(jià)值，目前國(guó)內(nèi)對(duì)于碎米薺的研究有很多。盧金清等[22]對(duì)華中碎米薺揮發(fā)性物質(zhì)通過(guò)氣相色譜質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行了測(cè)定，分析出華中碎米薺中各種化學(xué)成分以及相對(duì)百分含量。丁莉等[23]對(duì)堇葉碎米薺營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)維生素C、纖維素、%、g1，含量均比同類(lèi)蔬菜高。一定程度證實(shí)了碎米薺中硒含量較高，而且擁有很好的食用價(jià)值，對(duì)于富硒產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)有著一定的參考價(jià)值。彭誠(chéng)等[24]對(duì)堇葉碎米薺不同時(shí)期營(yíng)養(yǎng)成分與含硒量的關(guān)系進(jìn)行了研究，表明含硒量和可溶性蛋白、可溶性糖含量變化趨勢(shì)基本一致，在苔期達(dá)到最高。說(shuō)明了硒含量和可溶性蛋白、可溶性糖三者之間可能存在一定的聯(lián)系，這個(gè)猜想需要進(jìn)一步的研究。牟敏等[25]對(duì)恩施堇葉碎米薺通過(guò)采用環(huán)已烷萃取有機(jī)硒，將無(wú)機(jī)硒與總硒同時(shí)測(cè)定，通過(guò)恩施雙河漁塘壩溪溝邊、石煤渣堆和坡地上生長(zhǎng)的三種恩施堇葉碎米薺進(jìn)行測(cè)定，表明堇葉碎米薺有機(jī)硒含量最低92%以上，生長(zhǎng)在溪溝邊的堇葉碎米薺總硒和有機(jī)硒含量最高；雷紅靈等[26]對(duì)恩施碎米薺葉片的抗氧化酶活性進(jìn)行了研究，通過(guò)不同硒濃度研究，得出恩施碎米薺的葉片抗氧化酶活力的最適硒質(zhì)量濃度是3060mgL1。證實(shí)了恩施碎米薺的高度耐硒能力，為研究恩施碎米薺提供了一定的參考價(jià)值。向天勇等[27]通過(guò)不同濃度的外加硒對(duì)恩施碎米薺生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)了恩施碎米薺對(duì)硒的耐受能力隨著成熟度的增加而提高。還有很多關(guān)于碎米薺的研究，但總的來(lái)說(shuō)這些研究都為碎米薺與硒的關(guān)系提供了很好的研究?jī)r(jià)值，建立了一定的研究體系。硒作為一種人體必需的營(yíng)養(yǎng)元素，在我們的生活中對(duì)于疾病的預(yù)防和治療有著重要的作用，通過(guò)對(duì)植物中硒含量的研究，進(jìn)而研究植物中硒的代謝途徑，了解植物體內(nèi)硒的代謝機(jī)理，通過(guò)一定技術(shù)手段，從而提高植物內(nèi)硒含量，對(duì)于有機(jī)硒的應(yīng)用有著重要的意義。我國(guó)大部分地區(qū)屬于低硒、缺硒地帶，人們?cè)谄綍r(shí)生活飲食中的硒攝入量不足，嚴(yán)重影響著我國(guó)人口的身體健康，對(duì)于缺硒人群進(jìn)行補(bǔ)硒迫在眉睫。因此生產(chǎn)富硒產(chǎn)品，進(jìn)而提高缺硒人群體內(nèi)的硒含量顯得十分重要。而異堇葉碎米薺在富硒土壤中生存，對(duì)于硒有著強(qiáng)耐受能力，其體內(nèi)硒濃度很高，屬于聚硒植物，研究其體內(nèi)硒代謝途徑，對(duì)于開(kāi)發(fā)富硒產(chǎn)品，從而提高人體的硒含量，保持人體內(nèi)正常的硒含量水平，對(duì)于疾病的預(yù)防和治療有著重要的指導(dǎo)意義。通過(guò)測(cè)定異堇葉碎米薺不同時(shí)期葉片的揮發(fā)性成分以及硒含量，尋找揮發(fā)性物質(zhì)中是否存在硒化合物，為研究硒在異堇葉碎米薺中的代謝機(jī)理奠定了一定的基礎(chǔ)，為開(kāi)發(fā)新的富硒產(chǎn)品提供了一定的參考價(jià)值。2材料與方法供實(shí)驗(yàn)用的異堇葉碎米薺來(lái)自于2012年湖北恩施雙河的種子，通過(guò)取自湖北恩施雙河的硒礦渣培育獲得的不同生長(zhǎng)時(shí)期異堇葉碎米薺。優(yōu)級(jí)純：硝酸；鹽酸分析純：無(wú)水氯化鈣；硼氫化鉀；氫氧化鉀10μgmL1硒標(biāo)準(zhǔn)溶液 分析天平（ME204E/02，瑞士梅特勒托利多有限公司）；石墨消解儀（SH220，濟(jì)南海能儀器有限公司）；數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（GZX9420MBE，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent6890N/5975C，美國(guó)安捷倫公司）；萃取頭（DBV/CAR/PDMS 50/30μm，美國(guó)Supelco公司）；雙道原子熒光光度計(jì)（AFS9760，北京海光儀器公司）取處于幼苗期、抽苔期、開(kāi)花期、結(jié)莢期的異堇葉碎米薺葉片，按照葉片大小的不同，取樣的數(shù)量不同。一般表面積較大的葉片取1片，表面積較小的葉片取23片，輕輕去掉葉片上面的雜質(zhì)，用濾紙擦干葉片表面的水分。 SPMEGCMS測(cè)定揮發(fā)性物質(zhì)取樣：稱(chēng)取2g無(wú)水氯化鈣（用于干燥）放入潔凈干燥的50mL試劑瓶中，剪取一張與50mL試劑瓶瓶底大小一致的濾紙放入瓶中，完全蓋住無(wú)水氯化鈣。將擦拭干凈的葉片放入瓶中的濾紙上，用8層封口膜對(duì)試劑瓶瓶口進(jìn)行密封，并用2根橡皮筋將瓶口的封口膜扎緊。萃?。悍湃朐O(shè)置為60℃的數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱中，保持30min，然后將裝有樣品的試劑瓶取出冷卻至室溫，迅速插入已在進(jìn)樣口（250℃）老化30min的萃取頭，用手柄推出纖維頭，在常溫下萃取30min。進(jìn)樣：將已經(jīng)萃取好的纖維頭推回，將萃取頭迅速插入氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的進(jìn)樣口，推出纖維頭，解吸3min，進(jìn)行測(cè)定。色譜條件：HP5MS石英毛細(xì)管柱（30m),載氣為氦氣，流速為1mLmin1，進(jìn)樣口溫度為250℃，不分流進(jìn)樣。程序升溫條件（40℃保持2min，再以5℃min1升溫至130℃，保持1min；再以15℃min1升溫至280℃，保持2min）。質(zhì)譜條件：離子源EI源，電子能量70eV，離子溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，掃描質(zhì)量范圍m/z35～550。分別量取10mL濃度為20μgL1的硒標(biāo)準(zhǔn)溶液在原子熒光光度計(jì)上測(cè)定硒含量，以B道濃度為橫坐標(biāo)，以B道熒光值為縱坐標(biāo)作圖。得出線性回歸方程y=。相關(guān)系數(shù)為R2=，說(shuō)明120μgL1之間線性關(guān)系良好。 The standard curve of selenium contents將彎嘴漏斗、消解管、25mL容量瓶、10mL離心管、燒杯、50mL量筒、玻璃棒放入酸缸（里面為20%HNO3）中浸泡一夜，然后取出清洗，經(jīng)UP水潤(rùn)洗后，放入設(shè)置為60℃的數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱中干燥備用。 取處于不同時(shí)期異堇葉碎米薺的葉片，首先用自來(lái)水沖洗干凈后，然后用UP水潤(rùn)洗，再放入經(jīng)UP水潤(rùn)洗后的潔凈干燥燒杯中，最后將燒杯放入設(shè)置為60℃的數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱中將葉片烘干（約8小時(shí)），再用經(jīng)UP水潤(rùn)洗后的干燥潔凈的研缽將干燥的葉片磨碎，裝入2mL離心管中備用。 用分析天平分別稱(chēng)取50mg樣品并記錄，加入消解管，同時(shí)增加一組不加入樣品的空白對(duì)照。向消解管中加入5mL濃硝酸，蓋上彎嘴漏斗，放入設(shè)置溫度為160℃的石墨消解儀中，直至消解管中液體透明、無(wú)顆粒物質(zhì)。將消解管上的彎嘴漏斗取開(kāi)，繼續(xù)消解，直至消解管中液體體積剩余2mL左右，從石墨消解儀上取下消解管，將消解管及其液體冷卻至室溫。向冷卻的消解管中加入2mL濃度為6molL1鹽酸溶液，輕輕震蕩均勻，放入石墨消解儀中在160℃條件下保持6min，再?gòu)氖鈨x上取下消解管，并冷卻至室溫。最后將消解管中的液體轉(zhuǎn)入對(duì)應(yīng)編號(hào)的25mL容量瓶中，用5%鹽酸定容，震蕩均勻。分別量取10μL定容后的液體，轉(zhuǎn)入對(duì)應(yīng)編號(hào)的事先準(zhǔn)備的10mL離心管中，用10%鹽酸定容至10mL，通過(guò)雙道原子熒光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)系列：10%鹽酸；載流：10%鹽酸；還原劑：1%硼氫化鈉+%氫氧化鈉儀器條件：總燈電流：80mA；輔陰極燈電流：40mA；光電倍增管負(fù)高壓：280V；原子化器高度：8mm；載氣流量：300mLmin1；屏蔽器流量：800mLmin1 ，然后得出相應(yīng)的結(jié)論。3結(jié)果與分析對(duì)于處于不同時(shí)期異堇葉碎米薺的葉片按照上述方法進(jìn)行測(cè)定后，對(duì)總離子流圖譜中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得質(zhì)譜圖，并結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)，確定了異堇葉碎米薺葉片中揮發(fā)性成分的化學(xué)組成，其結(jié)果見(jiàn)下圖。Fig ion in seedling stage of Cardamine violifolia leaf volatile ponent
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