【文章內(nèi)容簡介】 溫度變化呈較好的指數(shù)關(guān)系，隨著溫度的升高，青蒿物的單萜釋放速率會迅速增大[2224]。 CO2濃度、相對濕度、氣孔除光照強度和溫度外，許多環(huán)境因子對青蒿的揮發(fā)性有機物釋放速率都具有一定的影響。CO2濃度對揮發(fā)性有機物的釋放有影響，在環(huán)境CO2濃度低時(l00mL/m3)，青蒿的揮發(fā)性有機物隨CO2升高而增加，當CO2濃度在100~600 mL/m3之間時青蒿揮發(fā)性物質(zhì)的速率相對穩(wěn)定，當CO2濃度＞600mL/m3時其揮發(fā)性有機物的釋放速率逐漸降低。有研究發(fā)現(xiàn)[2528]相對濕度和青蒿的揮發(fā)性有機物的釋放速率呈線性關(guān)系，濕度增加釋放的揮發(fā)性有機物的速率會相應(yīng)增加，說明濕度也可能影響青蒿揮發(fā)性物質(zhì)的釋放。 光照在時間(日、月)尺度上，多數(shù)植物揮發(fā)性物質(zhì)的釋放速率受光照強度的影響很大。青蒿的異戊二烯釋放速率與光合有效輻射關(guān)系密切。在無光照或低光照時，異戊二烯釋放速率極低，隨著光合有效輻射增大，異戊二烯的釋放速率迅速增加。有報道指出[29]：地中海地區(qū)棟屬植物釋放的所有揮發(fā)性有機物都具有光依賴性，而其它植物的揮發(fā)性有機物的釋放，光依賴性變化較大。 脅迫干擾(擾動、脅迫)和傷害在自然界中普遍存在，會對植物的揮發(fā)性有機物釋放速率產(chǎn)生明顯的影響。在氧氣不足時，青蒿的釋放揮發(fā)性有機速率會明顯增加[30]。許多植物葉片在風(fēng)干、衰老、霜凍過程中，CS和C6化合物釋放量會增加。動物、昆蟲、草食動物取食、放牧均會增加植物的揮發(fā)性有機物釋放速率，增加幅度因物種、受損葉的比例而有所差異[3132]。2 材料與方法 材料供實驗的青蒿植株由湖北恩施農(nóng)科院提供的種子在實驗室種植所得。 試驗方法 儀器分析天平（瑞士，梅特勒托利多有限公司，ME204E/02，）；氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國，Agilent，6890N/5975C）；萃取頭（美國，Supelco公司，DBV/CAR/PDMS 50/30μm）。 青蒿揮發(fā)性測定取樣：在晴朗無風(fēng)天氣，摘取已經(jīng)培育好的青蒿植株上、中、下位置的成熟葉，輕輕去掉葉片上面的雜質(zhì)，用濾紙擦干葉片上面的水，放入分析天平中進行稱重，并記錄。兩天后雨天收集方法同前。收集原則：對青蒿揮發(fā)性物質(zhì)采集堅持鮮葉收集原則，保持植株正常的生理狀態(tài)。所采集的葉或花沒有損傷，避免因為損傷引起的實驗誤差。萃?。?，放入潔凈干燥的50mL試劑瓶中，用8層封口膜對試劑瓶瓶口進行密封，并用2根橡皮筋將瓶口的封口扎緊，放入25℃室內(nèi)，迅速插入已在進樣口（250℃）老化30min的萃取桿，推出萃取頭，在常溫下萃取45min。 測定：將已經(jīng)萃取完畢的萃取頭推回，將萃取桿迅速插入氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的進樣口，推出萃取頭，解吸3min，進行測定。色譜條件：色譜柱：HP5Ms(30m**)彈性石英毛細管柱；進樣口溫度：250℃；進樣方式：不分流進樣；載氣：高純氦氣，；程序升溫：35℃保持2min，再以5℃min1升溫至125℃，不保持；2℃min1升溫至145℃，不保持；再以15℃min1升溫至280℃，保持1min；接口溫度：280℃。質(zhì)譜條件：離子源EI源，電子能量70eV，離子溫度230℃，四級桿溫度為150℃，掃描質(zhì)量范圍m/z35～550。 實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析軟件數(shù)據(jù)分析軟件：MSD ChemStation Data Analysis Application和Excel。3 結(jié)果分析 天氣對青蒿揮發(fā)性單萜及其衍生物的影響單萜及其衍生物通常指由二分子異戊二烯聚合而成的萜類化合物及其含氧的和飽和程度不等的衍生物。單萜按分子的基本碳骨架分為：無環(huán)單萜、單環(huán)單萜、雙環(huán)單萜及三環(huán)單萜四大類。除三環(huán)單萜天然成分數(shù)目較少外，其他三類均有許多天然成分存在，主要存在于各種揮發(fā)油中[33]。本研究選取晴天和雨天青蒿葉片利用SPMEGC/MS方法進行了揮發(fā)性單萜及其衍生物的分析，共鑒定出了20種揮發(fā)性單萜及其衍生物化合物。 青蒿樣本中晴天單萜及其衍生物相對百分含量較高的有樟腦、異丙基甲苯等；雨天相對百分含量較高的有樟腦、莰烯、()π蒎烯、異丙基甲苯、桉樹腦等?？梢钥闯銮缣旌陀晏烨噍锏膿]發(fā)性單萜及其衍生物的種類和相對百分含量是不同的：如樟腦，在晴天和雨天相對百分含量均較高，但樣本中晴天相對百分含量高于雨天；而(1R)(+)α蒎烯 、莰烯 、水芹烯、()π蒎烯 、異丙基甲苯 、檸檬烯 、桉樹腦 、萜品烯等揮發(fā)性單萜及其衍生物的相對百分含量雨天高于晴天。并且在數(shù)據(jù)分析和圖譜中可明顯看出：(1R)(+)α蒎烯、水芹烯在雨天的含量很高，而在晴天測出來的量極少。而π薰衣草乙酯和順2蒈烯4醇 在晴天的含量很高，雨天幾乎沒有。表 青蒿晴雨天主要揮發(fā)性單萜及其衍生物相對百分含量（n=3，）Tab. The percentages of the mainly volatile monoterpene and its derivatives of Artemisia annua L in sunny and runny days（n=3，）相對保留時間化合物名稱相對百分含量(%)平均值晴天雨天(1R)(+)α蒎烯 0177。莰烯 177。177。水芹烯 0177。()π蒎烯 177。177。異丙基甲苯 177。177。檸檬烯 177。177。桉樹腦 177。177。萜品烯 177。177。3,3,2甲基6亞甲基環(huán)己烯 177。177。樟腦 177。177。馬鞭草烯醇 177。177。菊酮 177。177。反馬鞭草烯醇 177。177。柏尼醇177。177。胡椒醇 177。177。反3（10）蒈烯2醇 177。177。胡椒酮 177。177。π薰衣草乙酯 177。0順2蒈烯4醇 177。0 418號青蒿晴雨天揮發(fā)性單萜及其衍生物離子圖譜比較Fig. Comparison of the volatile monoterpene and its derivatives of Artemisia annua L in sunny and runny days by ion chromatogram 青蒿晴雨天蒎烯離子圖譜比較Fig. Comparison of the pinene of Artemisia annua L in sunny and runny days by ion chromatogram 青蒿晴雨天水芹烯離子圖譜比較Fig. Comparison of the phellandrene of Artemisia annua L in sunny and runny days by ion chromatogram 青蒿晴雨天π薰衣草乙酯和順2蒈烯4醇離子圖譜比較 Comparison of the π Lavender ethyl ester and cis 2 carene 4 alcohol of Artemisia annua L in sunny and runny days by ion chromatogram 天氣對青蒿揮發(fā)性倍半萜及其衍生物的影響。倍半萜是指分子中含15個碳原子的天然萜類化合物。倍半萜類化合物分布較廣，在植物體內(nèi)常以醇、酮、內(nèi)酯等等形式存在于揮發(fā)油中，是揮發(fā)油中高沸點部分的主要組成部分[34]。實驗青蒿樣本中晴天倍半萜及其衍生物相對百分含量較高的有石竹烯、法尼烯、蓽澄茄油萜等；雨天相對百分含量較高的有石竹烯、法尼烯 、蓽澄茄油萜等。可以看出晴天和雨天青蒿的揮發(fā)性倍半萜及其衍生物的種類和相對百分含量是不同的；本實驗樣本實驗數(shù)據(jù)可以看出青蒿揮發(fā)性倍半萜及其衍生物的相對百分含量大多晴天高于雨天。在數(shù)據(jù)分析和圖譜中可明顯看出：環(huán)氧法尼烯在雨天檢測出來較多，而在晴天幾乎檢測不出來。 表 青蒿晴雨天主要揮發(fā)性倍半萜及其衍生物相對百分含量（n=3，）Tab. the percentages of volatile sesquiterpenes and its derivatives of Artemisia annua L in rainy and sunny days（n=3，）