【文章內(nèi)容簡介】 乙二胺溶液：取二鹽酸Ｎ－（１－萘基）－，溶于95%乙醇約400ml中，再加乙醇稀釋至500ml,置棕色玻璃瓶中冰箱保存；(6)貯存標(biāo)準(zhǔn)液：，然后加4N硫酸175ml，并用蒸餾水稀釋至1000ml；(7)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液：，置100ml容量瓶中，用3%三氯醋酸液稀釋至刻度?！　∪⊥茫敝唬o脈注射10%磺胺嘧啶注射液1ml/kg，半小時后心臟采血，檢查血藥濃度（游離磺胺測定法）。記錄　，放置15分鐘；(1) 加15%，混勻，并過濾；(3)在試管中加上述濾液5ml作為測定管，在另一試管中加入空白對照液5ml作為空白管；。%亞硝酸鈉液，混勻，放置３分鐘。(4)%。(5)%二鹽酸Ｎ－(1－萘基)－，充分混合，放置１０分鐘。(6)用分光光度計或光電比色計于550nm波長處進行比色，以空白管校正光密度到０點，讀取標(biāo)準(zhǔn)管和測定管光密度，計算游離磺胺藥含量。例如：，則采血后立即將兔處死，打開腹腔，稱取肝組織2g，在研缽中加蒸餾水5ml研磨，取上清液，殘渣再加蒸餾水沖洗研缽，并回收于刻度試管，共得16ml，然后加15%三氯醋酸4ml，混勻，靜置后過濾，待測定。測定藥物濃度的方法同上。計算時樣品稀釋倍數(shù)為10，，則記錄并計算血藥濃度——肝藥學(xué)濃度——［討論題］試分析磺胺血藥濃度和肝藥濃度的高低與臨床應(yīng)用的關(guān)系。　磺胺嘧啶藥動學(xué)的生物半衰期的測定［目的］　了解磺胺嘧啶（ＳＤ）在雞體內(nèi)的代謝動力學(xué)動態(tài)規(guī)律并計算出其生物半衰期，為臨床用藥提供依據(jù)。［材料］　動物：雞（成年健康家雞）。１、１０％磺胺嘧啶鈉注射液２、１５％三氯醋酸３、％亞硝酸鈉（貯存冰箱可保存二周）４、％氨基橫酸銨５、%二鹽酸Ｎ－（１－萘基）乙二胺，用95％乙醇400ml溶解，再用乙醇稀釋至500ml，置于棕色瓶中，（貯存于冰箱中）。６、貯存標(biāo)準(zhǔn)液：，溶于蒸餾水中，并稀釋至1000ml，因其不易溶于水，然后加4N硫酸175ml，并用蒸餾水稀釋至1000ml。７、應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液：，置于100ml溶量瓶中，用3%三氯醋酸稀釋至刻度。器材：721型分光光度計、容量瓶、刻度試管、注射器、吸管、手術(shù)器械。［方法］１、動物準(zhǔn)備：取健康成年家雞一只，稱體重后，通常用毛巾將雞裹住，即可被固定?；蛞皇治兆梢砀浚皇治罩鴥勺㈦u固定好，暴露并剝離一側(cè)靜脈，手插入一根細(xì)硬塑料膠管，固定，供采血時用。２、（１）在注藥前，作空白管用。（２）快速靜脈推注10%SD鈉（70mg/kg）,注后計時。３、采血：于注藥后的下述時間各采一次，分別在5’、10’、15’、20’、30’、45’、60’，使全部溶血，放置15’后，置冰箱保薦（４℃）。４、加15%，并過濾。５、，混合，放置三分鐘。６、%，混合，并放置二分鐘。７、%二鹽酸N—（１—萘基），充分混勻，放置10分鐘。721型分光光度計于545—550nm波長處進行比色，以空白管校正光密度到0點,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和測定管光密度,標(biāo)出血液中游離磺胺嘧啶的含量(mg/100ml)。　?。?、模型選擇與生物半衰期（t1/2）的計算：（１）模型選擇：將測得不同時間的血藥濃度取其自然對數(shù)為縱座標(biāo)，以相應(yīng)時間為橫座標(biāo)繪制Inc—t曲線草圖，按直觀法（數(shù)點法）用計算器回歸，求出n與b值，再確定動力學(xué)模型（此步略）。　?。ǎ玻┌锤鞔窝褐校樱牡臐舛戎担蟪霭胨テ冢╰1/2）：將多次血藥濃度值，用直線回歸法求出ＳＤ半衰期；設(shè)Ｘ為用藥后的時間（以分計算），Ｙ為血液中ＳＤ濃度對數(shù)值（濃度mg%計算）得一座標(biāo)點，各點間連成直線的斜率b：　　　　消除速率常數(shù)Ｋe=bⅹ　　　　　在未知初始濃度Ｃ０，而知道任意時間t1和t2時的濃度C1和C2時，可用下式求Ｋ值：　　??；　　　　?。蹖嶒炗涗洠莶裳獣r間（t）號　數(shù)（Ｎ）光密度（Ｅ）血藥濃度（Ｃ）０１２３取值標(biāo)準(zhǔn)值１２３取值５’１２３取值10’１２３取值15’１２３取值20’１２３取值30’１２３取值第三章　各　論　普魯卡因與丁卡因表面麻醉作用的比較［目的］　了解普魯卡因與丁卡因作用的區(qū)別。［材料］　兔１只；%鹽酸普魯卡因溶液、%鹽酸丁卡因溶液、兔固定箱、毛剪、滴管。［方法］１、取兩眼無眼疾的健康家兔１只，放入固定箱內(nèi)，用毛剪剪去兩眼睫毛。用同一根兔須以相等的力量輕觸角膜，試驗正常的角膜反射。觸及部位可按上、中、下、左、右的順序，刺激五個點。全部陽性（５次都不霎眼）時記５/５，全部陰性（５次都霎眼）時記０/５，其余類推。２、用拇指和食指將兔下眼瞼拉成囊狀，再用中指壓住鼻淚管（以兔藥液流入鼻腔），然后在兩眼滴藥，%的普魯卡因溶液２滴；%的鹽酸丁卡因溶液２滴。輕揉眼瞼，使藥液與角膜充分接觸，并在眼中存留１分鐘，然后放手。滴藥后每隔５分鐘測試角膜反射１次，到３０分鐘為止。同時觀察有無結(jié)膜充血等反應(yīng)，記錄并比較兩藥之作用。［記錄］兔眼滴入藥物滴藥前角膜反射滴藥后角膜反射5min10min15min20min25min30min左普魯卡因右丁卡因［討論題］１、影響藥物表面麻醉效果的因素有哪些？使用中需注意什么問題？　腎上腺素對普魯卡因浸潤麻醉作用的影響［目的］　了解腎上腺素與普魯卡因聯(lián)合用藥可延長局部麻醉作用的特點。［材料］　兔子１只；注射器、毛剪、燒杯、酒精棉球；%普魯卡因注射液、含有１/。［方法］１、取家兔１只，在脊背兩側(cè)各選擇相互對稱，直徑２cm左右的部位一塊，將毛剪凈裝于盛水的燒杯里（以免兔毛飛揚），用酒精消毒后，用針頭刺皮膚，試其痛覺反應(yīng)，用手掌緊貼兔背部皮膚，感覺刺激部位肌肉抽縮為痛感指標(biāo)。刺激方式按左、中、右、上、中、下的順序進行。全部陽性反應(yīng)記6/6，全部陰性反應(yīng)記為0/6，其余類推。２、%%普魯卡因腎上腺素注射液2ml作皮下注射。注射后于１min、2min、5min分別刺激注射部位測其痛覺，然后每5min測試一次，并比較兩種藥液的麻醉作用、維持時間及注射部位皮膚顏色有何不同？［記錄］藥　　　物用藥前反應(yīng)用藥后反應(yīng)5min10min15min20min25min30min35min普魯卡因普魯卡因＋Ａd［討論題］以實驗結(jié)果說明普魯卡因與腎上腺素合用的臨床意義？　氯丙嗪鎮(zhèn)靜作用及其強化麻醉的觀察［目的］觀察氯丙嗪的鎮(zhèn)靜作用和強化麻醉作用。［材料］家兔３只；注射器；%鹽酸氯丙嗪、２％戊巴比妥鈉溶液、酒精棉球。［方法］　　每組取家兔１只，稱其體重，根據(jù)下列規(guī)定藥物、劑量、用法、并記錄反應(yīng)。［記錄］兔號體重%氯丙嗪注射液%戊巴比妥鈉液麻　醉作　用用　　藥　　前用　藥　后發(fā)生時間維持時間痛覺瞳孔大小眼瞼反射角膜反射體溫痛覺瞳孔大小眼瞼反射角膜反射體溫甲1ml/kgiv乙1ml/kgiv1ml/kgiv丙1ml/kgiv注：甲、乙兔各靜注氯丙嗪１０分鐘后，再給乙、丙兔分別注射戊嘏比妥鈉。［討論題］以上結(jié)果說明了什么問題？ 藥物的鎮(zhèn)痛作用一、化學(xué)刺激法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用[目的] 觀察哌替啶、羅通定的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，掌握扭體法鎮(zhèn)痛實驗方法。[材料]　小白鼠，體重18～22g；1ml注射器、鼠籠、苦味酸等；生理鹽水、 % 哌替啶溶液、 % 羅通定溶液、 %酒石酸銻鉀溶液[方法]　取健康小白鼠6只，稱重，隨機分成3組，每組2只，觀察各鼠活動情況后， %哌替啶溶液、 % 顱痛定溶液及生理鹽水。給藥30min后， % ，觀察10min內(nèi)產(chǎn)生“扭體”反應(yīng)的動物數(shù)。[記錄]藥物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用1 2 3 4 5 6 7 8 總 總扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭 扭 不扭哌替啶羅通定生理鹽水[結(jié)果]匯總?cè)珜嶒炇业膶嶒灲Y(jié)果，將所測得的結(jié)果代入下列公式計算： 實驗組無扭體反應(yīng)的動物數(shù)對照組無扭體反應(yīng)的動物數(shù) 藥物鎮(zhèn)痛百分率 = ————————————————————————— 100% 對照組扭體反應(yīng)的動物數(shù)注：“扭體”反應(yīng)的標(biāo)志：腹部內(nèi)凹，軀體與后腿伸張，同時肢體扭曲，抬臀豎尾等。二、熱板法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用[目的] 學(xué)習(xí)熱板法鎮(zhèn)痛實驗方法；觀察哌替啶和羅通定的鎮(zhèn)痛作用。[原理] 將小鼠置于恒溫的熱板上，以熱刺激小鼠足部產(chǎn)生疼痛反應(yīng)（舔后爪），通過測定小鼠痛閾（出現(xiàn)疼痛反應(yīng)即舔后爪時間），比較組與對照組小鼠痛閾的差異，判定藥物有無鎮(zhèn)痛作用。[材料] 小鼠，雌性，體重18~22 g；器材：1ml注射器、鼠籠、天平、智能熱板儀；％哌替啶生理鹽水溶液、％羅通定生理鹽水溶液。[方法]準(zhǔn)備工作 打開智能熱板儀，設(shè)定溫度為55177。，預(yù)熱15分鐘左右，使其達到恒溫。小鼠的選擇及正常痛閾的測定 取小鼠數(shù)只，依次放入熱板儀上。自放入熱板儀至出現(xiàn)舔后足所需的時間（秒）作為該鼠的痛閾值。凡在30秒內(nèi)不舔足或逃避者棄置不用。取篩選合格的小鼠6只，隨機分為3組，各鼠編號后重復(fù)測其正常痛閾值一次，將所測兩次正常痛閾平均值作為該鼠給藥前痛閾值。給藥及給藥后痛閾值測定 ，％哌替啶溶液，％羅通定溶液，第3組給予生理鹽水作為對照。給藥后10min、30min后各測小鼠痛閾值1次。若放入燒杯內(nèi)60秒仍無反應(yīng)，應(yīng)將小鼠取出，痛閾值以60秒計。實驗完畢后，按下列公式計算不同時間的痛閾提高百分率： 給藥后平均痛閾值 – 給藥前平均痛閾值痛閾提高百分率（％）= ——————————————————— 100％給藥前平均痛閾值[記錄]藥物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用組別 動物數(shù) 給藥前平均痛閾值（秒）給藥后平均痛閾值（秒） 痛閾提高（％）10min 30min 10min 30min哌替啶羅通定生理鹽水[思考題]比較兩種鎮(zhèn)痛的實驗方法。根據(jù)實驗結(jié)果討論鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛作用。[注意事項] 小鼠以雌性為好，因雄性小鼠受熱后陰囊松弛觸及熱板，易致過敏反應(yīng)。 室溫對本實驗有一定影響，以15 ～20186。C為宜，過低小鼠反應(yīng)遲鈍，過高則鼠過于敏感易引起跳躍，影響結(jié)果準(zhǔn)確性。 正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象，這些動作不能作為疼痛指標(biāo)，只有舔后足才作為疼痛指標(biāo)。 解熱鎮(zhèn)痛藥對發(fā)熱家兔體溫的影響［目的］觀察解熱鎮(zhèn)痛藥的解熱作用。［材料］兔２只；電子秤、體溫表、注射器；１０％復(fù)方氨基比林溶液、10％蛋白胨?！　。鄯椒ǎ荨　∪≌３赡晖茫仓?，編號為甲、乙，分別檢查并記錄正常體溫（℃－℃者為合適）。于４小時前給乙兔皮下注射10％蛋白胨10ml／kg，體溫可比正常時升高１℃以上，則進行試驗，甲、乙兩兔各腹腔注射１０％復(fù)方氨基比林溶液２ml／kg，、1小時、觀察各兔體溫的變化。［記錄］兔　號體　重藥　物正常體溫　　給　藥　后　體　溫1h甲乙［討論］實驗結(jié)果說明了什么問題？臨床上應(yīng)用解熱鎮(zhèn)痛藥應(yīng)注意些什么？　強心甙對離體蛙心的作用觀察［目的］　學(xué)習(xí)離體蛙心灌注法，觀察強心甙對離體蛙心收縮強度、頻率和節(jié)律的影響以及強心甙和鈣離子的協(xié)同作用。［材料］　蛙或蟾蜍；剪子、蛙板、探針、斯氏蛙心插管、蛙心夾、張力換能器、記錄儀、記錄裝置；任氏液、低鈣任氏液（所含CaCl2量為一般任氏液的1/4，其他成分不變）、５％洋地黃溶液、１％氯化鈣溶液。［方法］　?。?、取蛙１只，用探針破壞腦及脊髓，背位置于蛙板上。先剪開胸部皮膚，再剪除胸部肌肉及胸骨，打開胸腔，剪破心包膜，暴露心臟?！　。?、在主動脈干分支處之下穿一線，打好松結(jié)，備結(jié)扎插管之用。于左動脈上剪一Ｖ形切口，插入盛有任氏液的蛙心插管，通過主動脈球轉(zhuǎn)向左后方，同時用鑷子輕提動脈球，向插管移動的反方向拉，即可使插管尖端順利進入心室。見到插管內(nèi)的液面隨著心搏而上下波動后，將松結(jié)扎緊、固定，然后剪斷兩根動脈。持插管提起心臟，用線自靜脈竇以下把其余血管一起結(jié)扎，在結(jié)扎處下剪斷血管，使心臟離體。用滴管吸去插管內(nèi)血液，并用任氏液連續(xù)換洗，至無血色?！　。?、用帶有長線的蛙心夾夾住心尖，將長線聯(lián)于張力換能器，在記錄儀上記錄心臟搏動?！　。?、記錄一段正常心搏曲線后，依次換加下列藥液。每加一種藥液后，密切注意心縮強度、心率、房室收縮的一致性等方面的變化。（１） 換入低鈣任氏液。（２） 當(dāng)心臟收縮顯著減弱時，向插管內(nèi)加入５％∽（%）。（３） 當(dāng)作用明顯時，再向插管內(nèi)加入１％氯化鈣溶液２～３滴。［記錄］　剪貼或復(fù)制心臟的收縮曲線，圖下注明加藥