【文章內(nèi)容簡介】 獲得的菌絲體富硒能力的測(cè)量。圖2：測(cè)定硒的標(biāo)準(zhǔn)曲線:Determination of selenium standard curve表3 白色金針菇及其誘變菌株在液體富硒培養(yǎng)基中的生長特性Table growth characteristics of the white Flammnlina velutipes and its mutant strains in Se accumulating liquid training medium菌種培養(yǎng)液滅菌發(fā)酵出瓶菌絲球過濾后生物量類型硒濃度前終點(diǎn)總體積直徑余液干重(μg/L)pH值pH值(mL)(mm)(mL)(g/100mL)白色金針菇原種CK93～88589～801088～841589～812092～812593～843092～824092～85白色金針菇誘變5minCK93～83590～711091～8515—————2092～872592～783090～804087～71白色金針菇誘變10minCK93～85588～831092～861589～682090～852590～803092～844091～81注:1)搖瓶體積250mL,裝液量為100mL。2)轉(zhuǎn)速為250r/min,溫度為25℃；3）在測(cè)定滅菌前pH值時(shí)，℃，緩沖液的pH值按照20℃的標(biāo)準(zhǔn)來校正pH計(jì)。在測(cè)定發(fā)酵終點(diǎn)pH值時(shí)，緩沖液的實(shí)時(shí)溫度是24℃，緩沖液的pH值按照25℃的標(biāo)準(zhǔn)來校正pH計(jì)。本次實(shí)驗(yàn)觀察了白色金針菇、金針菇201及其誘變菌株在液體富硒培養(yǎng)液中的生長特性，由表3~4可知：發(fā)酵液基本清澈透明，透出淡淡的香味，表明這些培養(yǎng)基未被污染。菌絲球基本呈現(xiàn)球狀，例如星球狀、微球狀、橢球狀、圓柱狀等。菌絲球基本呈現(xiàn)白色，隨著硒濃度的提高，滅菌前pH值逐漸升高。發(fā)酵終點(diǎn)pH與菌絲體干重有著較為明顯的相關(guān)性。在本實(shí)驗(yàn)中，我觀察到，菌絲球小的培養(yǎng)液中菌絲球的數(shù)目多，生物量也大，干燥時(shí)間也比較快。表4 金針菇201原種及其誘變菌株在液體富硒培養(yǎng)基中的生長特性Table 3. The growth characteristics of the Flammnlina velutipes 201 and its mutant strains in Se accumulating liquid training medium菌種培養(yǎng)液滅菌發(fā)酵出瓶菌絲球過濾后生物量類型硒濃度(μg/L)前pH值終點(diǎn)pH值總體積(mL)直徑(mm)余液(mL)干重(g/100mL)金針菇201原種CK87～73588～751088～811591～832088～832590～793090～804092～87金針菇201誘變5minCK89～81588～801089～8215—————2091～822588～793089～794088～80金針菇201誘變10minCK92～87589～831087～791592～8520—————2587～803089～814088～84注:1)搖瓶體積250mL,裝液量為100mL。2)轉(zhuǎn)速為250r/min,溫度為25℃；3）在測(cè)定滅菌前pH值時(shí)，緩沖液的實(shí)時(shí)溫度是12℃，緩沖液的pH值按照10℃的標(biāo)準(zhǔn)來校正pH計(jì)。在測(cè)定發(fā)酵終點(diǎn)pH值時(shí)，℃，緩沖液的pH值按照20℃的標(biāo)準(zhǔn)來校正pH計(jì)。 金針菇在液體富硒培養(yǎng)基中的富硒特性由表6和圖3可知，白色金針菇原種在富硒CM液體培養(yǎng)基上具有較強(qiáng)的富硒能力。在一定硒濃度范圍內(nèi)，菌絲體的富硒能力隨著硒濃度的增加而增強(qiáng)，在培養(yǎng)基硒含量為20μg/L時(shí)富硒能力最強(qiáng)。添加高濃度硒(40μg/L)時(shí)，富硒能力明顯下降（%）。針對(duì)菌絲球干重，它也是在一定的硒濃度范圍內(nèi)，隨著硒濃度的提高而增大，在15~20μg/L之間達(dá)到了頂峰。菌絲體的含硒量與干重呈正相關(guān)?？梢姷蜐舛鹊陌l(fā)酵液硒含量有助于白色金針菇原種的生長及其富硒能力的提高。隨著培養(yǎng)基硒濃度梯度的增加，硒的回收率呈下降趨勢(shì)。因此，富硒能力及生長速度均達(dá)到最大。所以最佳育種方案是選擇含硒量為20μg/L的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)白色金針菇原種菌絲體。表6 白色金針菇菌種在液體富硒培養(yǎng)基中對(duì)硒的富集特性Table characteristics of white Flammulina velutipes in the Seleniumenriched medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)生物量干重(g/100mL)菌絲體的吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)硒回收率（％）CK5101520253040注：每個(gè)硒濃度梯度下。 圖3 白色金針菇菌種菌絲體含硒量和干重與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and dry weight of mycelium of white Flammulina velutipes in different selenium concentration gradient 表7 Table characteristics of white Flammulina velutipes ()in the Seleniumenriched medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)生物量干重(g/100mL)菌絲體的吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)硒回收率（％）CK5 10 15 20 25 30 40 注：每個(gè)硒濃度梯度下。 Curves of the selenium and dry weight of mycelium of white Flammulina velutipes ()in different selenium concentration gradient 由表7和圖4可知，白色金針菇誘變5min菌種在富硒CM液體培養(yǎng)基上具有較強(qiáng)的富硒能力。在所測(cè)硒濃度范圍內(nèi)，菌絲體的富硒能力出現(xiàn)了兩個(gè)峰值，分別是在培養(yǎng)基硒含量為0和30μg/L時(shí)富硒能力最強(qiáng)。在培養(yǎng)基含硒量為15μg/L時(shí)，富硒能力降到最低（%）。菌絲球干重在該硒濃度范圍內(nèi)，在5μg/L時(shí)達(dá)到了頂峰。可見適宜濃度的發(fā)酵液硒含量有助于白色金針菇誘變5min菌種的生長及其富硒能力的提高。因此，白色金針菇誘變5min菌種在培養(yǎng)基含硒量為0和30μg/L的時(shí)候，富硒能力達(dá)到最大。菌絲體干重在在5μg/L時(shí)達(dá)到了頂峰。綜合考慮，可選取含硒量為5μg/L的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)白色金針菇誘變5min菌種菌絲體，此時(shí)其富硒能力及菌絲球干重均處于較佳狀態(tài)。表8 白色金針菇 ()在液體富硒培養(yǎng)基中對(duì)硒的富集特性Table 8. Seaccumulated characteristics of white Flammulina velutipes ()in the Seleniumenriched medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)生物量干重(g/100mL)菌絲體的吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)硒回收率（％）CK 　5 10 15 20 25 30 40 注：每個(gè)硒濃度梯度下。圖5 白色金針菇（）菌種菌絲體含硒量和干重與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and dry weight of mycelium of Flammulina velutipes () in different selenium concentration gradient由表8和圖5可知，白色金針菇誘變10min菌種在富硒CM液體培養(yǎng)基上具有較強(qiáng)的富硒能力。在一定硒濃度范圍內(nèi)，菌絲體的富硒能力在培養(yǎng)基硒含量為5μg/L時(shí)富硒能力最強(qiáng)，隨著硒濃度的增加呈下降趨勢(shì)，但不明顯。其菌絲球干重，在15μg/L的硒濃度的時(shí)候達(dá)到了頂峰，顯著高于所測(cè)的其他硒濃度梯度。菌絲體的含硒量與干重的關(guān)系不明顯?？梢娺m宜濃度的發(fā)酵液硒含量有助于白色金針菇原種的生長。隨著培養(yǎng)基硒濃度梯度的增加，硒的回收率呈下降趨勢(shì)且較為明顯。因此，白色金針菇誘變10min菌種在培養(yǎng)基含硒量為15μg/L的時(shí)候，富硒能力及生長速度均達(dá)到較佳值。因而較好的培養(yǎng)方案為配置含硒量為15μg/L的培養(yǎng)基發(fā)酵白色金針菇誘變10min菌種菌絲體。表9 金針菇201原種()在液體富硒培養(yǎng)基中對(duì)硒的富集特性Table 9. Seaccumulated characteristics of Flammulina velutipes 201 in the seleniumenriched medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)生物量干重(g/100mL)菌絲體的吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)硒回收率（％）CK5101520253040注：每個(gè)硒濃度梯度下。圖6 金針菇201原種菌絲體含硒量和干重與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and dry weight of mycelium of Flammulina velutipes 201 in different selenium concentration gradient由表9和圖6可知，金針菇201原種在富硒CM液體培養(yǎng)基上具有較強(qiáng)的富硒能力。菌絲體的富硒能力隨著硒濃度的增加而上下波動(dòng)，在培養(yǎng)基硒含量為15和40μg/L時(shí)菌絲體含硒量曲線出現(xiàn)三處峰值，但在5μg/L時(shí)其富硒能力遠(yuǎn)高于其他兩個(gè)梯度。針對(duì)菌絲球干重，它也是在所測(cè)的硒濃度范圍內(nèi)，隨著硒濃度的提高而呈總體下降趨勢(shì)，在0、25和30μg/L時(shí)出現(xiàn)峰值，但在發(fā)酵培養(yǎng)基含硒量為0μg/L時(shí)，菌絲球干重最大。可見低濃度硒含量的發(fā)酵液有助于金針菇201原種的生長及其富硒能力的提高。隨著培養(yǎng)基硒濃度梯度的增加，硒的回收率呈下降趨勢(shì)。因此，金針菇201原種在培養(yǎng)基含硒量為5μg/L的時(shí)候，富硒能力最強(qiáng)，在培養(yǎng)基含硒量為0μg/L的時(shí)候，生長速度均達(dá)到最大。所以最佳育種方案是選擇含硒量為5μg/L的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)金針菇201原種菌絲體，此時(shí)其生長速度和富硒能力都達(dá)到較為不錯(cuò)的水平。表10 金針菇201誘變5min菌種()在液體富硒培養(yǎng)基中對(duì)硒的富集特性Table characteristics of Flammulina velutipes () in the seleniumenriched medium培養(yǎng)液硒濃度(μg/L)生物量干重(g/100mL)菌絲體的吸光值菌絲體含硒量(μg/g)硒含量提高倍數(shù)硒回收率（％）CK51015—————20253040注：每個(gè)硒濃度梯度下。圖7 金針菇201誘變5min菌種菌絲體含硒量和干重與硒濃度梯度的曲線圖 Curves of the selenium and dry