【文章內(nèi)容簡介】 界點）。如：初始滅菌時間為8hr第1次滅菌循環(huán)：滅菌時間8hr，如無菌；第2次滅菌循環(huán)：滅菌時間4hr，如無菌；第3次滅菌循環(huán)：滅菌時間2hr，如有菌；第4次滅菌循環(huán)：滅菌時間3hr，如無菌，則3hr為時間臨界點；如有菌，則確定4 hr為時間臨界點。第三章 環(huán)氧乙烷滅菌驗證的內(nèi)容、方法、步驟一次性無菌醫(yī)療產(chǎn)品的環(huán)氧乙烷滅菌驗證的主要內(nèi)容應(yīng)根據(jù)國家標準：GB182792000 《醫(yī)療器械 環(huán)氧乙烷滅菌確認和常規(guī)控制》中的規(guī)定；但是，環(huán)氧乙烷是有毒的易燃易爆氣體，應(yīng)特別注意有關(guān)的安全性和有效性，因此，本指南在常規(guī)的驗證內(nèi)容基礎(chǔ)上增加保障安全要求的有關(guān)驗證。一、驗證前準備驗證方案環(huán)氧乙烷滅菌驗證一般應(yīng)包含編制驗證計劃、選用驗證方法、確認檢驗或試驗方法、評價驗證結(jié)果等方面內(nèi)容。其中編制驗證計劃時確定驗證的步驟是非常重要的。通常的驗證步驟是：運行驗證安裝驗證驗證前準備微生物性能驗證物理性能驗證人員應(yīng)當由有資格的人員來從事環(huán)氧乙烷滅菌驗證過程中的操作工作、微生物檢驗工作、設(shè)備管理工作及計量器具的管理工作。負責上述工作的人員應(yīng)根據(jù)工作需要分別接受過相應(yīng)內(nèi)容的培訓：設(shè)備的安裝、操作、維護；計量器具校準；物理性能及微生物性能鑒定。人員的資格培訓應(yīng)建立相應(yīng)的培訓情況記錄，每套環(huán)氧乙烷滅菌設(shè)備的操作人員應(yīng)至少兩人，并取得設(shè)備操作上崗證。產(chǎn)品滅菌的適用性滅菌前應(yīng)根據(jù)環(huán)氧乙烷滅菌的特性分析產(chǎn)品對環(huán)氧乙烷滅菌的適用性。產(chǎn)品的滅菌適用性包括：產(chǎn)品：由產(chǎn)品的用途決定產(chǎn)品是否需要滅菌；產(chǎn)品材料的物理、化學性能：環(huán)氧乙烷氣體必須對產(chǎn)品材料具有穿透性。環(huán)氧乙烷滅菌的環(huán)境不應(yīng)改變材料的物理化學性能。產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：環(huán)氧乙烷滅菌氣體的穿透性不受產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的影響。環(huán)氧乙烷滅菌的條件不應(yīng)改變產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)。產(chǎn)品殘留量：產(chǎn)品經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后的EO殘留水平將會影響產(chǎn)品對滅菌的適用性。產(chǎn)品經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后的EO殘留量應(yīng)符合相應(yīng)標準。產(chǎn)品再滅菌性：當產(chǎn)品需要再次滅菌時產(chǎn)品的物理化學性能不受影響，產(chǎn)品的EO殘留量仍符合相關(guān)要求。產(chǎn)品最難滅菌部位：根據(jù)產(chǎn)品的設(shè)計確定滅菌劑最難達到的部位。包裝1）包裝說明：應(yīng)包含包裝名稱、包裝材料、包裝結(jié)構(gòu)說明及包裝的印刷。應(yīng)證明包裝上的印刷不會因滅菌而產(chǎn)生不良影響。2）包裝的物理化學性能：證明包裝經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后其物理、化學性能能夠達到包裝設(shè)計的預期要求。3）包裝的封口強度：應(yīng)證明產(chǎn)品包裝在滅菌環(huán)境下封口強度能保證包裝的正常功用。4）包裝的阻菌性：應(yīng)證明產(chǎn)品的包裝能確保滅菌后的產(chǎn)品不會受外界微生物污染源的影響。5）包裝的儲存驗證確認；6）包裝的機械振動試驗；7）包裝的滲漏、不透氣性、耐壓試驗；8）再次滅菌的影響：應(yīng)證明產(chǎn)品的包裝經(jīng)再次滅菌后其物理化學性能、封口強度、印刷等均保持其正常功用?；瘜W指示物，并驗證分承包方的生產(chǎn)資質(zhì)。生物指示物，并驗證分承包方的生產(chǎn)資質(zhì)。滅菌劑滅菌用環(huán)氧乙烷應(yīng)符合GB1309891標準要求；分承包方應(yīng)提供質(zhì)保單、滅菌劑配方、生產(chǎn)日期、有效期限等產(chǎn)品資料并核實驗證。產(chǎn)品的初始污染菌產(chǎn)品在滅菌前必須進行產(chǎn)品的初始污染菌測試，測試方法參見GB159801995標準，并確定產(chǎn)品從包裝完畢至滅菌循環(huán)開始前的最長滯留時間。加濕用蒸汽加濕用蒸汽須保證不能成為新的微生物污染源，建議用去離子水或蒸餾水。二、安裝驗證設(shè)備的相關(guān)技術(shù)資料需提供設(shè)備的使用說明書、產(chǎn)品合格證、安全規(guī)程、維護保養(yǎng)計劃、常見故障與排除一覽表、主要技術(shù)圖紙（安裝圖、管道圖、電氣圖）、備品備件表等主要技術(shù)資料。計量器具校驗滅菌設(shè)備上的主要計量器具，如：溫度表、壓力表、濕度表、計時器及相應(yīng)的傳感器，在滅菌驗證過程中要保證其相應(yīng)的準確性，其精度符合等級要求。計量器具必須在規(guī)定的鑒定周期內(nèi)使用。計量器具的使用必須具備計量器具生產(chǎn)許可證、計量器具產(chǎn)品合格證及相關(guān)的合格證明材料。滅菌器供應(yīng)商的資質(zhì)證明需提供滅菌器供應(yīng)商的工商營業(yè)執(zhí)照、醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證、醫(yī)療器械產(chǎn)品注冊證和醫(yī)療器械衛(wèi)生許可證。環(huán)境要求滅菌車間須達到防爆要求；應(yīng)安裝防爆排風扇；車間遠離明火至少30米以上；應(yīng)離開辦公區(qū)及其他生產(chǎn)區(qū)；環(huán)氧乙烷儲存鋼瓶應(yīng)固定支撐、專用房間并通風陰涼；車間空氣中環(huán)氧乙烷的濃度應(yīng)≤2mg/m3（GB1172189標準）。管道的安裝滅菌器各種管道應(yīng)根據(jù)其功能標色區(qū)分，并在顯著位置有相應(yīng)標志。滅菌器各管道的連接應(yīng)保證密封、無泄漏。各管道間應(yīng)保證相應(yīng)的平行、等距、垂直連接。滅菌器管道與相應(yīng)的控制系統(tǒng)、輔助系統(tǒng)間應(yīng)按安裝位置圖正確安裝。電器控制系統(tǒng)的安裝滅菌器中開關(guān)、按鍵、指示燈、控制儀表、指示儀表、傳感器等電器的安裝應(yīng)正確，電器控制系統(tǒng)應(yīng)可靠接地?？赏ㄟ^啟閉開關(guān)、按鈕，檢查儀表顯示的正確性加以驗證。計算機系統(tǒng)的安裝（若有）檢查主機、顯示器、打印機、UPS、控制機箱的可靠安裝、正確連接和正常運行。三、運行驗證輔助設(shè)備的運行驗證輔助設(shè)備包括真空泵、氣泵、循環(huán)泵、氣化泵（若有）、加熱系統(tǒng)（水箱、電熱管）、蒸汽發(fā)生器（若有）等，根據(jù)各輔助設(shè)備應(yīng)有的工作特性，分別接通電源試運轉(zhuǎn)，驗證各輔助設(shè)備運轉(zhuǎn)的有效性。電器控制系統(tǒng)的運行驗證電器控制系統(tǒng)包括加熱系統(tǒng)、壓力系統(tǒng)、氣化系統(tǒng)，需驗證加熱（水箱）溫度、滅菌溫度、滅菌壓力、氣化器溫度（若有）的上下限控制，要求各儀表控制正確、可靠。報警系統(tǒng)的運行驗證應(yīng)驗證滅菌室超高溫報警，滅菌室超高壓報警，氣化器（若有）超高溫報警，滅菌劑（若有）超低溫報警，計時器超時報警及開關(guān)門報警（若有）。要求報警裝置正確、有效。計算機系統(tǒng)的運行驗證應(yīng)驗證計算機系統(tǒng)各部件，包括主機、顯示器、打印機、UPS、控制機箱等運行的正確性，要求能正常運性，達到預期功能。四、物理性能驗證真空速率試驗驗證真空度達到15Kpa、50Kpa所需的時間，要求抽15Kpa時≤6min，抽50Kpa時≤30min。注：本指南中所指的壓力均指相對壓力。正壓泄漏試驗驗證滅菌器柜體在正壓狀態(tài)下的密封性。在空載、溫度恒定的條件下，加正壓至+50Kpa，保壓60min，觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤。負壓泄漏試驗驗證滅菌器柜體在負壓狀態(tài)下的密封性。在空載、溫度恒定的條件下，預真空至50Kpa，保壓60min，觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤。加濕試驗驗證加濕系統(tǒng)的有效性。在空載條件下，保持滅菌室溫度恒定，預真空至25～50Kpa，,開始向滅菌室加濕。要求濕度明顯變化在30%～85%的范圍內(nèi)。滅菌室箱壁溫度均勻性試驗驗證滅菌室箱壁溫度均勻性是否符合要求。1）應(yīng)使用貼觸式溫度探頭直接貼觸柜壁來測得空柜室內(nèi)表面的溫度分布；溫度探頭應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位，如靠近柜室不受熱的位置或柜門，和靠近蒸汽或氣體入口的位置。其余的溫度探頭應(yīng)均勻分布于整個滅菌器中。2）溫度傳感器的數(shù)量應(yīng)能提供空柜室內(nèi)表面和空間的整個溫度分布，探頭數(shù)量要根據(jù)滅菌器的設(shè)計和滅菌過程技術(shù)規(guī)范確定。根據(jù)經(jīng)驗，通常進行這類溫度測量宜采用以下傳感器數(shù)量：a)滅菌器柜室可用體積≤5 m3時，至少10個，均勻分布；b)滅菌器柜室可用體積5 m3時，體積每增加1 m3時，增加1個測點；c)滅菌器柜室可用體積10 m3時，至少20個。3）啟動加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達滅菌工藝所需溫度（如50℃）時，記錄所有傳感器的溫度值。4）標準要求所有溫度傳感器間溫度的最大偏差≤177。3℃。5）空載滅菌室箱壁溫度均勻性驗證的溫度傳感器分布須有示意圖表示。滅菌室空間溫度均勻性試驗驗證滅菌室空間溫度均勻性是否符合要求。1）在空滅菌室內(nèi)放置規(guī)定數(shù)量的溫度傳感器，溫度探頭應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位，如靠近柜室不受熱的位置或柜門，和靠近蒸汽或氣體入口的位置。其余的溫度探頭應(yīng)均勻分布于整個滅菌器中。2）溫度傳感器的數(shù)量應(yīng)能提供空柜室內(nèi)表面和空間的整個溫度分布，探頭數(shù)量要根據(jù)滅菌器的設(shè)計和滅菌過程技術(shù)規(guī)范確定。根據(jù)經(jīng)驗，通常進行這類溫度測量宜采用以下傳感器數(shù)量：a)滅菌器柜室可用體積≤5 m3時，至少10個，均勻分布；b)滅菌器柜室可用體積5 m3時，體積每增加1 m3時，增加1個測點；c)滅菌器柜室可用體積10 m3時，至少20個。3）啟動加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達滅菌工藝所需溫度（如50℃）時，記錄所有傳感器的溫度值。4）標準要求所有溫度傳感器間溫度的最大偏差≤177。3℃。5）空載滅菌室空間溫度均勻性驗證的溫度傳感器分布須有示意圖表示。滅菌室滿載溫度均勻性試驗驗證滅菌室滿載時溫度均勻性是否符合要求。1）在滅菌室滿載的條件下，將規(guī)定數(shù)量的溫度傳感器（計算方法同上）均勻地分布在滅菌負載包裝箱內(nèi)，啟動加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達滅菌工藝所需溫度（如50℃）時，記錄所有傳感器的溫度值。2）標準要求所有溫度傳感器間溫度的最大偏差≤177。5℃。3）滅菌室負載要有裝載模式圖。五、微生物性能驗證微生物性能驗證在滅菌器物理性能驗證合格后進行。它驗證現(xiàn)用環(huán)氧乙烷滅菌工藝是否符合GB182792000 《醫(yī)療器械 環(huán)氧乙烷滅菌確認和常規(guī)控制》標準。對新產(chǎn)品、新材料、新包裝、新工藝的使用，通過滅菌驗證為滅菌工藝的制定提供依據(jù)。在進行微生物性能驗證前，需進行負載試驗；以及試驗用生物指示物的檢測（若需要）。 微生物性能驗證方框圖說明：圖中虛線箭頭表示此過程可選擇做。影響環(huán)氧乙烷滅菌的因素很多，主要有溫度、壓力、環(huán)氧乙烷濃度、相對濕度等。溫度環(huán)氧乙烷的殺菌作用、滅菌時間、對物品的穿透能力與溫度密切相關(guān)。在一定的范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，環(huán)氧乙烷的殺菌作用加強，同時也能增強其穿透力和縮短滅菌作用的時間。溫度的常規(guī)極限通常在27℃63℃，一般常用的合適溫度為50177。5℃。但是當溫度高到足以使藥物發(fā)揮最大作用時，再升高溫度，則殺菌作用亦不再加強。在較高的溫度下（例如40℃57℃）環(huán)氧乙烷的用量為440mg/L、880mg/L和1500mg/L，其消毒作用是一樣的。用環(huán)氧乙烷消毒時通過適當?shù)奶岣邷囟?，可以?jié)省環(huán)氧乙烷用量與縮短消毒時間。1）加溫系統(tǒng)溫度與均勻性環(huán)氧乙烷滅菌柜以熱水循環(huán)方式加熱，根據(jù)滅菌柜體積不同，熱水循環(huán)系統(tǒng)數(shù)量也不同，安裝試運行或經(jīng)長期使用后，要檢測循環(huán)系統(tǒng)的溫度與流量是否一致。2）處理（負載試驗）應(yīng)在受控條件下進行一段時間的予處理和（或）處理，使被滅菌物品內(nèi)達到規(guī)定溫度和相對濕度。它同以下因素有關(guān)：產(chǎn)品；規(guī)格（長*寬*高）；數(shù)量（箱）；總載量（80%）；堆放：裝載物品不能接觸柜壁，有一定距離間隔,作圖示。小包裝材料：大小、厚度；中包裝材料：大小、厚度、含小包裝數(shù)；大包裝材料：尺寸、含中包裝數(shù)；水箱溫度（℃）；被滅菌物品的溫度（℃）；3）根據(jù)鑒定的實踐經(jīng)驗,通常進行這類測量的溫度傳感器數(shù)量與空載時相同。4）溫度和濕度傳感器應(yīng)裝入單個包裝箱內(nèi)和其他擬放入滅菌器中任何形式的包裝內(nèi)。5）溫度傳感器應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位,如靠近柜室不受熱的位置或柜門和靠近蒸汽或氣體入口位置。其余的溫度探頭均勻分布于整個滅菌器中，并作圖示。6）全部滅菌時間內(nèi)，被滅菌物品應(yīng)達到規(guī)定的最低溫度，在氣體作用期間的任何指定時間，產(chǎn)品上的溫度波動范圍應(yīng)小于或等于10℃，濕度應(yīng)不超過177。15%。7）溫度的設(shè)定要考慮對滅菌物品、包裝及印刷的影響。8）通過試驗要得到不同位置升溫速率，要表明溫度最低點與最高點的位置，同時要探求溫度與滅菌效果的關(guān)系。9）環(huán)境溫度的影響，我國的環(huán)境溫度變化很大，不同地區(qū)、不同季節(jié)環(huán)境溫度影響預處理所需時間。10）規(guī)定經(jīng)最長允許時間予處理后被滅菌物品的溫、濕度。11）滅菌溫度參數(shù)確定,應(yīng)根據(jù)環(huán)境溫度,被滅菌物品的溫度、升溫速率、時間等確定。12）從予處理區(qū)內(nèi)移出被滅菌物品到滅菌周期開始經(jīng)過的最長時間。（通常認為移出時間60min或更少為可行。）預真空（若采用）預真空度的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接阻止環(huán)氧乙烷氣體、熱、濕氣到達被滅菌物品的深層、長管內(nèi)部。所以滅菌過程尤其是予濕前真空度對滅菌效果影響巨大，為使EO在滅菌器柜室和被滅菌物品內(nèi)均勻分布達到可以重現(xiàn)，加入滅菌劑之前必須控制柜內(nèi)殘留空氣的含量，因為在靜態(tài)條件下EO不能很好與空氣混合。通常在使用純EO或與易燃氣體混合時，要采用高度真空排出空氣。而對于那些不能承受高度真空排出空氣的產(chǎn)品，則通常采用非易燃的EO與稀釋滅菌劑混合氣體。一般的做法是靠抽真空將空氣排出，但也有用氣體置換的方法將空氣排出，這要求有特殊的安全預防措施，同時需對確定所需氣體濃度的排氣件進行確認。一般予真空到440mmHG（85Kpa）。預真空要考慮以下因素的影響： 1）對被滅菌物品，包裝的影響； 2）環(huán)氧乙烷的均勻性；與被滅菌物品堆放，滅菌柜設(shè)計可能有關(guān)。 3）等壓滅菌與正壓滅菌； 4）對濕度的影響；5）設(shè)定真空度與達到該真空度所需時間；6）真空持續(xù)時間（保壓）。環(huán)氧乙烷濃度工業(yè)上不常采用低于300mg/L和高于1200mg/L的環(huán)氧乙烷氣體濃度。低于300mg/L濃度的環(huán)氧乙烷氣體在實際的工藝時間內(nèi)簡直不會產(chǎn)生確實有效的、足夠的環(huán)氧乙烷分子。高于1200mg/L的濃度不會縮短工藝的時間但為了增加工藝所需氣體量加以采用。滅菌的效果是環(huán)氧乙烷分子的分子碰撞及受滅菌的生物體決定的。因此，分子越多工藝越有效。用600mg/L環(huán)氧乙烷的滅菌工藝比用300mg/L的工藝大約快一倍，用1200mg/L的工藝比用600mg/L工藝又快一倍。然而，考慮到環(huán)氧乙烷的費用及殘留量等因素，工藝常設(shè)計成較低的環(huán)氧乙烷濃度。400600mg/L是當今常用的條件。1）環(huán)氧乙烷加入量、加入時所需的時間、達到最高壓力時間與換氣前的最終壓力。2）滅菌柜內(nèi)的環(huán)氧乙烷濃度環(huán)氧乙烷的濃度可以用間接法或直接