【正文】 1）對(duì)被滅菌物品，包裝的影響； 2）環(huán)氧乙烷的均勻性；與被滅菌物品堆放，滅菌柜設(shè)計(jì)可能有關(guān)。一般的做法是靠抽真空將空氣排出，但也有用氣體置換的方法將空氣排出，這要求有特殊的安全預(yù)防措施，同時(shí)需對(duì)確定所需氣體濃度的排氣件進(jìn)行確認(rèn)。通常在使用純EO或與易燃?xì)怏w混合時(shí)，要采用高度真空排出空氣。）預(yù)真空（若采用）預(yù)真空度的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接阻止環(huán)氧乙烷氣體、熱、濕氣到達(dá)被滅菌物品的深層、長管內(nèi)部。12）從予處理區(qū)內(nèi)移出被滅菌物品到滅菌周期開始經(jīng)過的最長時(shí)間。10）規(guī)定經(jīng)最長允許時(shí)間予處理后被滅菌物品的溫、濕度。8）通過試驗(yàn)要得到不同位置升溫速率，要表明溫度最低點(diǎn)與最高點(diǎn)的位置，同時(shí)要探求溫度與滅菌效果的關(guān)系。15%。其余的溫度探頭均勻分布于整個(gè)滅菌器中，并作圖示。4）溫度和濕度傳感器應(yīng)裝入單個(gè)包裝箱內(nèi)和其他擬放入滅菌器中任何形式的包裝內(nèi)。它同以下因素有關(guān)：產(chǎn)品；規(guī)格（長*寬*高）；數(shù)量（箱）；總載量（80%）；堆放：裝載物品不能接觸柜壁，有一定距離間隔,作圖示。1）加溫系統(tǒng)溫度與均勻性環(huán)氧乙烷滅菌柜以熱水循環(huán)方式加熱，根據(jù)滅菌柜體積不同，熱水循環(huán)系統(tǒng)數(shù)量也不同，安裝試運(yùn)行或經(jīng)長期使用后，要檢測循環(huán)系統(tǒng)的溫度與流量是否一致。在較高的溫度下（例如40℃57℃）環(huán)氧乙烷的用量為440mg/L、880mg/L和1500mg/L，其消毒作用是一樣的。5℃。在一定的范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，環(huán)氧乙烷的殺菌作用加強(qiáng)，同時(shí)也能增強(qiáng)其穿透力和縮短滅菌作用的時(shí)間。影響環(huán)氧乙烷滅菌的因素很多，主要有溫度、壓力、環(huán)氧乙烷濃度、相對(duì)濕度等。在進(jìn)行微生物性能驗(yàn)證前，需進(jìn)行負(fù)載試驗(yàn)；以及試驗(yàn)用生物指示物的檢測（若需要）。它驗(yàn)證現(xiàn)用環(huán)氧乙烷滅菌工藝是否符合GB182792000 《醫(yī)療器械 環(huán)氧乙烷滅菌確認(rèn)和常規(guī)控制》標(biāo)準(zhǔn)。3）滅菌室負(fù)載要有裝載模式圖。2）標(biāo)準(zhǔn)要求所有溫度傳感器間溫度的最大偏差≤177。滅菌室滿載溫度均勻性試驗(yàn)驗(yàn)證滅菌室滿載時(shí)溫度均勻性是否符合要求。3℃。3）啟動(dòng)加熱/循環(huán)系統(tǒng)，在到達(dá)滅菌工藝所需溫度（如50℃）時(shí)，記錄所有傳感器的溫度值。2）溫度傳感器的數(shù)量應(yīng)能提供空柜室內(nèi)表面和空間的整個(gè)溫度分布，探頭數(shù)量要根據(jù)滅菌器的設(shè)計(jì)和滅菌過程技術(shù)規(guī)范確定。1）在空滅菌室內(nèi)放置規(guī)定數(shù)量的溫度傳感器，溫度探頭應(yīng)放置于能代表溫度變化最大的部位，如靠近柜室不受熱的位置或柜門，和靠近蒸汽或氣體入口的位置。5）空載滅菌室箱壁溫度均勻性驗(yàn)證的溫度傳感器分布須有示意圖表示。4）標(biāo)準(zhǔn)要求所有溫度傳感器間溫度的最大偏差≤177。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，通常進(jìn)行這類溫度測量宜采用以下傳感器數(shù)量：a)滅菌器柜室可用體積≤5 m3時(shí)，至少10個(gè)，均勻分布；b)滅菌器柜室可用體積5 m3時(shí)，體積每增加1 m3時(shí)，增加1個(gè)測點(diǎn)；c)滅菌器柜室可用體積10 m3時(shí)，至少20個(gè)。其余的溫度探頭應(yīng)均勻分布于整個(gè)滅菌器中。滅菌室箱壁溫度均勻性試驗(yàn)驗(yàn)證滅菌室箱壁溫度均勻性是否符合要求。在空載條件下，保持滅菌室溫度恒定，預(yù)真空至25～50Kpa，,開始向滅菌室加濕。在空載、溫度恒定的條件下，預(yù)真空至50Kpa，保壓60min，觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤。在空載、溫度恒定的條件下，加正壓至+50Kpa，保壓60min，觀察柜體壓力變化，要求泄漏率≤。注：本指南中所指的壓力均指相對(duì)壓力。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的運(yùn)行驗(yàn)證應(yīng)驗(yàn)證計(jì)算機(jī)系統(tǒng)各部件，包括主機(jī)、顯示器、打印機(jī)、UPS、控制機(jī)箱等運(yùn)行的正確性，要求能正常運(yùn)性，達(dá)到預(yù)期功能。報(bào)警系統(tǒng)的運(yùn)行驗(yàn)證應(yīng)驗(yàn)證滅菌室超高溫報(bào)警，滅菌室超高壓報(bào)警，氣化器（若有）超高溫報(bào)警，滅菌劑（若有）超低溫報(bào)警，計(jì)時(shí)器超時(shí)報(bào)警及開關(guān)門報(bào)警（若有）。三、運(yùn)行驗(yàn)證輔助設(shè)備的運(yùn)行驗(yàn)證輔助設(shè)備包括真空泵、氣泵、循環(huán)泵、氣化泵（若有）、加熱系統(tǒng)（水箱、電熱管）、蒸汽發(fā)生器（若有）等，根據(jù)各輔助設(shè)備應(yīng)有的工作特性，分別接通電源試運(yùn)轉(zhuǎn)，驗(yàn)證各輔助設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)的有效性?？赏ㄟ^啟閉開關(guān)、按鈕，檢查儀表顯示的正確性加以驗(yàn)證。滅菌器管道與相應(yīng)的控制系統(tǒng)、輔助系統(tǒng)間應(yīng)按安裝位置圖正確安裝。滅菌器各管道的連接應(yīng)保證密封、無泄漏。環(huán)境要求滅菌車間須達(dá)到防爆要求；應(yīng)安裝防爆排風(fēng)扇；車間遠(yuǎn)離明火至少30米以上；應(yīng)離開辦公區(qū)及其他生產(chǎn)區(qū)；環(huán)氧乙烷儲(chǔ)存鋼瓶應(yīng)固定支撐、專用房間并通風(fēng)陰涼；車間空氣中環(huán)氧乙烷的濃度應(yīng)≤2mg/m3（GB1172189標(biāo)準(zhǔn)）。計(jì)量器具的使用必須具備計(jì)量器具生產(chǎn)許可證、計(jì)量器具產(chǎn)品合格證及相關(guān)的合格證明材料。計(jì)量器具校驗(yàn)滅菌設(shè)備上的主要計(jì)量器具，如：溫度表、壓力表、濕度表、計(jì)時(shí)器及相應(yīng)的傳感器，在滅菌驗(yàn)證過程中要保證其相應(yīng)的準(zhǔn)確性，其精度符合等級(jí)要求。加濕用蒸汽加濕用蒸汽須保證不能成為新的微生物污染源，建議用去離子水或蒸餾水。滅菌劑滅菌用環(huán)氧乙烷應(yīng)符合GB1309891標(biāo)準(zhǔn)要求；分承包方應(yīng)提供質(zhì)保單、滅菌劑配方、生產(chǎn)日期、有效期限等產(chǎn)品資料并核實(shí)驗(yàn)證?；瘜W(xué)指示物，并驗(yàn)證分承包方的生產(chǎn)資質(zhì)。4）包裝的阻菌性：應(yīng)證明產(chǎn)品的包裝能確保滅菌后的產(chǎn)品不會(huì)受外界微生物污染源的影響。2）包裝的物理化學(xué)性能：證明包裝經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后其物理、化學(xué)性能能夠達(dá)到包裝設(shè)計(jì)的預(yù)期要求。包裝1）包裝說明：應(yīng)包含包裝名稱、包裝材料、包裝結(jié)構(gòu)說明及包裝的印刷。產(chǎn)品再滅菌性：當(dāng)產(chǎn)品需要再次滅菌時(shí)產(chǎn)品的物理化學(xué)性能不受影響，產(chǎn)品的EO殘留量仍符合相關(guān)要求。產(chǎn)品殘留量：產(chǎn)品經(jīng)環(huán)氧乙烷滅菌后的EO殘留水平將會(huì)影響產(chǎn)品對(duì)滅菌的適用性。產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：環(huán)氧乙烷滅菌氣體的穿透性不受產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的影響。產(chǎn)品的滅菌適用性包括：產(chǎn)品：由產(chǎn)品的用途決定產(chǎn)品是否需要滅菌；產(chǎn)品材料的物理、化學(xué)性能：環(huán)氧乙烷氣體必須對(duì)產(chǎn)品材料具有穿透性。人員的資格培訓(xùn)應(yīng)建立相應(yīng)的培訓(xùn)情況記錄，每套環(huán)氧乙烷滅菌設(shè)備的操作人員應(yīng)至少兩人，并取得設(shè)備操作上崗證。通常的驗(yàn)證步驟是：運(yùn)行驗(yàn)證安裝驗(yàn)證驗(yàn)證前準(zhǔn)備微生物性能驗(yàn)證物理性能驗(yàn)證人員應(yīng)當(dāng)由有資格的人員來從事環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證過程中的操作工作、微生物檢驗(yàn)工作、設(shè)備管理工作及計(jì)量器具的管理工作。一、驗(yàn)證前準(zhǔn)備驗(yàn)證方案環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證一般應(yīng)包含編制驗(yàn)證計(jì)劃、選用驗(yàn)證方法、確認(rèn)檢驗(yàn)或試驗(yàn)方法、評(píng)價(jià)驗(yàn)證結(jié)果等方面內(nèi)容。如：初始滅菌時(shí)間為8hr第1次滅菌循環(huán)：滅菌時(shí)間8hr，如無菌；第2次滅菌循環(huán)：滅菌時(shí)間4hr，如無菌；第3次滅菌循環(huán)：滅菌時(shí)間2hr，如有菌；第4次滅菌循環(huán)：滅菌時(shí)間3hr，如無菌，則3hr為時(shí)間臨界點(diǎn)；如有菌，則確定4 hr為時(shí)間臨界點(diǎn)。規(guī)定的作用時(shí)間應(yīng)至少為最短滅菌時(shí)間的2倍。十六、半周期法除時(shí)間外所有其他過程參數(shù)不變情況下，確定無存活菌的EO最短作用時(shí)間。不管生物指示物獲得的結(jié)果如何，若滅菌工藝的某物理/化學(xué)變量超了規(guī)定范圍，滅菌周期均應(yīng)視作未達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。十五、產(chǎn)品放行根據(jù)滅菌過程物理參數(shù)和生物指示物培養(yǎng)結(jié)果來評(píng)價(jià)滅菌過程，決定產(chǎn)品的放行。十四、參數(shù)放行根據(jù)物理和（或）化學(xué)處理的數(shù)據(jù)，而不是根據(jù)樣品檢驗(yàn)或生物指示物的反應(yīng)結(jié)果，決定產(chǎn)品無菌。十二、環(huán)氧乙烷驗(yàn)證按照規(guī)定的程序，評(píng)價(jià)滅菌周期所采用的工藝技術(shù)參數(shù)是否達(dá)到滅菌要求的方法。十一、滅菌周期實(shí)施環(huán)氧乙烷滅菌的全過程。不同的物品環(huán)氧乙烷殘留量要求不同，目前對(duì)一次性醫(yī)療用品出廠時(shí)環(huán)氧乙烷殘留量的要求為不大于10μg/g（GB159801995 《一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》）；滅菌環(huán)境中環(huán)氧乙烷的濃度應(yīng)低于2mg/m3（GB1172189 《車間空氣中環(huán)氧乙烷衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》）。當(dāng)相對(duì)濕度低于25%以下時(shí)，不可能達(dá)到滅菌，即使延長滅菌時(shí)間也無效。其殺菌機(jī)理主要是由于EO能與細(xì)菌蛋白質(zhì)上的羧基(COOH)、氨基(NH2 )、巰基(SH)和羥基(OH)發(fā)生烷基化反應(yīng)使蛋白質(zhì)失去在基本代謝中需要的反應(yīng)基，阻礙了細(xì)菌蛋白質(zhì)正常的化學(xué)反應(yīng)和新陳代謝而導(dǎo)致微生物死亡。一次性無菌醫(yī)療器械滅菌用環(huán)氧乙烷應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)GB1309891《工業(yè)環(huán)氧乙烷》。環(huán)氧乙烷對(duì)人的毒害作用主要表現(xiàn)在直接接觸和吸入?；旌蠚怏w安全性好，滅菌時(shí)穿透性更好，有益于滅菌效果。故環(huán)氧乙烷鋼瓶應(yīng)陰涼保存并規(guī)定其有效期。環(huán)氧乙烷化學(xué)性質(zhì)活潑，與催化劑接觸可引起聚合反應(yīng)，這種聚合反應(yīng)隨溫度、壓力和水量增加而加快。環(huán)氧乙烷的蒸氣壓較大，因此對(duì)滅菌物品的穿透力很強(qiáng)，可以穿透微孔而達(dá)到物品的深部，正是由于EO的這種深穿透性，使其具有很好的滅菌能力，在工業(yè)生產(chǎn)中廣泛采用先包裝后滅菌的方法。在4℃,℃,因此EO在常溫常壓下是氣態(tài)，比空氣重，,揮發(fā)時(shí)具有芳香的醚味，可聞出的氣味閾值為500～700ppm。目前環(huán)氧乙烷化學(xué)指示物變色原理有三大類：酸堿法偶氮染料反應(yīng)法特效反應(yīng)法根據(jù)變色原理，化學(xué)指示物在使用前或滅菌后應(yīng)避免化學(xué)物接觸，使指示物變色或產(chǎn)生可逆反應(yīng)?；瘜W(xué)指示物包括指示卡、片、條、帶、器等各種形式的指示器件。檢驗(yàn)方法： 附錄A七、化學(xué)指示物暴露于滅菌工藝后，以顯示物質(zhì)發(fā)生物理和（或）化學(xué)變化來指示滅菌過程的化學(xué)制品。通過活菌計(jì)數(shù)，進(jìn)行該數(shù)目的追溯性測定。進(jìn)行微生物性能鑒定時(shí)對(duì)生物指示物應(yīng)選用：有衛(wèi)生許可證與產(chǎn)品注冊(cè)證的產(chǎn)品；2；產(chǎn)品應(yīng)有合格證；應(yīng)使用同一生產(chǎn)廠家的同一批號(hào)產(chǎn)品，做滅菌驗(yàn)證。生物指示物國家標(biāo)準(zhǔn)： 《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 生物指示物 第2部分：環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物》生物指示物的性能會(huì)受到使用前的貯存環(huán)境、使用方法或暴露于滅菌工藝所用技術(shù)的影響，因此，應(yīng)遵守生產(chǎn)者的建議進(jìn)行貯存和使用，而且應(yīng)當(dāng)在暴露于滅菌工藝之后，盡快地把生物指示物轉(zhuǎn)至規(guī)定條件下復(fù)蘇。生物指示物分菌片式生物指示物和自含式生物指示物二種。對(duì)用于監(jiān)測環(huán)氧乙烷滅菌效果的菌片，試驗(yàn)微生物的額定總數(shù)必須不小于1*106 cfu。用于監(jiān)測消毒或滅菌效果。在殺菌試驗(yàn)中為便于給結(jié)果做出評(píng)價(jià)，除有特殊規(guī)定外，將試驗(yàn)菌芽孢（菌量≥106cfu）滅菌指數(shù)達(dá)到106 ，也就是說，滅菌后1000000（一百萬件）滅菌物中，只允許有一件以下有活的微生物存在，或自然微生物全部殺滅者為滅菌合格≥% 。五、滅菌：使產(chǎn)品無任何類型存活微生物的過程。計(jì)算公式為： 平均菌數(shù)*稀釋倍數(shù) 菌數(shù)/每件次（或g）= ————————— 件次或重量（g）四、消毒用物理或化學(xué)方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達(dá)到無害化。 采樣數(shù)量：各類產(chǎn)品每批隨機(jī)抽取10件樣品。C1．2 對(duì)不能用破壞性方法取樣的特殊醫(yī)療用品可用浸有生理鹽水的棉拭子涂抹采樣，被采表面100cm2取全部表面；被采表面≥100cm2取100cm2。對(duì)一次性使用醫(yī)療器具如輸液器、輸血器、注射器等，檢驗(yàn)管道內(nèi)初始污染菌尤為重要。初始污染菌的檢驗(yàn)是方法結(jié)果，沒有一個(gè)方法能檢出產(chǎn)品存活全部微生物。滅菌產(chǎn)品管道類內(nèi)腔≤10 cfu /件次，外部≤100 cfu /件次；非管道類≤100 cfu /件次；敷料類≤100 cfu /g；消毒產(chǎn)品≤1000 cfu /件次或重量（g）。細(xì)菌的外形有球形、桿形、螺形三種基本形態(tài)，分別稱為球菌、桿菌和螺旋菌。細(xì)菌個(gè)體很小須用顯微鏡放大數(shù)百倍才能看見。細(xì)菌在一定環(huán)境下有相對(duì)恒定的形態(tài)結(jié)構(gòu)。二、細(xì)菌細(xì)菌是一類具有細(xì)胞壁的單細(xì)胞微生物。由于病毒、細(xì)菌、真菌等形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理活動(dòng)、代謝產(chǎn)物等不盡相同，它們又可各自進(jìn)一步分類。真核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，胞漿內(nèi)有完整的細(xì)胞器。原核細(xì)胞型微生物：僅有原始核，無核仁和核膜，缺乏完整的細(xì)胞器。微生物的種類繁多，至少十萬種以上，:非細(xì)胞型微生物：體積微小,能通過濾菌器,只能在活細(xì)胞內(nèi)生長繁殖。第二章 環(huán)氧乙烷滅菌驗(yàn)證基本概念一．微生物微生物是存在于自然界中的一群形體微小、構(gòu)造簡單、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百倍、幾千倍、甚至幾萬倍才能觀察到的低等生物。驗(yàn)證結(jié)束后，有關(guān)的資料應(yīng)由職能部門負(fù)責(zé)整理歸檔，便于今后的驗(yàn)證工作或新的項(xiàng)目實(shí)施驗(yàn)證時(shí)參考。驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)包括或參照以下內(nèi)容：1) 滅菌產(chǎn)品的說明（包括、包裝、滅菌柜內(nèi)的裝載圖）；2) 滅菌器的技術(shù)條件；3) 設(shè)施驗(yàn)證數(shù)據(jù)；4) 所有性能的物理記錄和生物記錄；5) 所有儀表記錄儀等在進(jìn)行性能驗(yàn)證時(shí)的校準(zhǔn)說明；6) 復(fù)審和重新驗(yàn)證的方案（如需要）；7) 驗(yàn)證方案；8) 所用程序的文件資料；9) 所有人員的培訓(xùn)記錄與證書（復(fù)印件）；10) 文件化操作規(guī)程，包括過程界限；11) 程序維持與校核。九、驗(yàn)證結(jié)果的審批 驗(yàn)證工作結(jié)束以后，驗(yàn)證人員應(yīng)將驗(yàn)證結(jié)果整理匯總，形成一份驗(yàn)證試驗(yàn)報(bào)告。若可能會(huì)出現(xiàn)對(duì)驗(yàn)證方案進(jìn)行補(bǔ)充和修改的情況，可以另外起草一份補(bǔ)充方案，并說明修改或補(bǔ)充的內(nèi)容和理由，待整個(gè)驗(yàn)證工作結(jié)束后，再重新改寫。在驗(yàn)證實(shí)施過程中所有參加驗(yàn)證工作的人員，必須要對(duì)驗(yàn)證方案進(jìn)行認(rèn)真的學(xué)習(xí)，掌握了解所規(guī)定的驗(yàn)證方法和要求，及有關(guān)的參數(shù)引用文件的規(guī)定。另外，驗(yàn)證過程中所需要的各種記錄表格，也應(yīng)準(zhǔn)備完畢，不得隨意代用。八、驗(yàn)證的實(shí)施 在驗(yàn)證計(jì)劃經(jīng)過各方協(xié)商后，應(yīng)按照計(jì)劃的規(guī)定去做好準(zhǔn)備工作，首先，要檢查一下實(shí)施驗(yàn)證的一些必需條件，資源是否具備，例如各種標(biāo)準(zhǔn)器、檢驗(yàn)化驗(yàn)儀器、試劑、記錄儀器、測量儀器等等。當(dāng)驗(yàn)證方案確定后，就要編制一份驗(yàn)證計(jì)劃書。對(duì)于無菌醫(yī)療器械來說，涉及到多方面驗(yàn)證項(xiàng)目，其中各項(xiàng)目的驗(yàn)證目的、驗(yàn)證方法不同，因此，在編制驗(yàn)證方案時(shí)，要考慮到不同的驗(yàn)證方法和具體的操作步驟。好的驗(yàn)證是要有一個(gè)以上的試驗(yàn)方案，記錄的參數(shù)適合于進(jìn)行比較，適合于判斷，選定的方案重復(fù)性好。七、驗(yàn)證方案的制訂驗(yàn)證過程一般有方案的制訂，計(jì)劃書的編制，方案的實(shí)