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正文內(nèi)容

過氧化物酶同工酶的提取、分離(編輯修改稿)

2025-06-22 18:44 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 膠的濃度為 10%。 (3)凝膠的質(zhì)量決定因素: 聚丙烯酰胺凝膠的強度、彈性、透明度、粘度和孔徑大小均取決于兩個重要參數(shù) T(總百分濃度 )和C(交聯(lián)百分濃度 )。 (%)+ 100?? ba bC(%)100???mbaT 上式中: a為丙烯酰胺的克數(shù), b為甲叉雙丙烯酰胺的克數(shù), m為緩沖液體積( ml)。 當(dāng) C保持恒定時,凝膠的有效孔徑隨著 T的增加而減小,當(dāng) T保持恒定, C為 4%時,有效孔徑最小, C大于或小于 4%時,有效孔徑均變大, C大于 5%時凝膠變脆,不宜使用, 實驗中最常用的 C是 %和 3 。 a與 b的比例很重要。富有彈性,且完全透明的凝膠, a與 b的重量比應(yīng)在 30左右。 常用 29 : 1 第一 、 三個不連續(xù)性: ① 凝膠孔徑的不連續(xù); ② 緩沖液離子組成及各層凝膠 pH的不連續(xù); ③ 在電場中形成的電位梯度的不連續(xù) 。 第二 、 不連續(xù)系統(tǒng)中的三種物理效應(yīng): ① 電荷效應(yīng): ② 分子篩效應(yīng) : ③ 濃縮效應(yīng) : (4)不連續(xù) PAGE的原理: 不連續(xù) PAGE電 泳 膠體 系 統(tǒng) 的 組 成: 1 電 泳系 統(tǒng) pH 膠體濃 度 緩沖 液 上 層 (負(fù)極 ) 緩沖 液 2 樣 本溶液 3 濃縮膠 4 分 離膠 膠 體 5 下 層 (正 極 )緩沖 液 TrisHCl TrisHCl Trisglycine Trisglycine Trisglycine 5% 7% ■ 在 濃縮膠 中的三 個 主要作用角色: 甘氨酸 : pH= 負(fù)電荷 pI= 不帶電荷 Cl1: 蛋白質(zhì) (酶 ): 小分子 大分子 ■ 濃縮效應(yīng) : 分離膠 濃縮膠 樣本 離子缺乏空間 A B C + + ? 以鄰甲氧基苯酚(即愈創(chuàng)木酚)為過氧
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