過氧化物酶同工酶的提取、分離(編輯修改稿)
2025-06-22 18:44 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 膠的濃度為 10%。 (3)凝膠的質(zhì)量決定因素： 聚丙烯酰胺凝膠的強度、彈性、透明度、粘度和孔徑大小均取決于兩個重要參數(shù) T(總百分濃度 )和C(交聯(lián)百分濃度 )。 （％）＋ 100?? ba bC（％）100???mbaT 上式中： a為丙烯酰胺的克數(shù)， b為甲叉雙丙烯酰胺的克數(shù)， m為緩沖液體積（ ml）。 當(dāng) C保持恒定時，凝膠的有效孔徑隨著 T的增加而減小，當(dāng) T保持恒定， C為 4％時，有效孔徑最小， C大于或小于 4％時，有效孔徑均變大， C大于 5％時凝膠變脆，不宜使用， 實驗中最常用的 C是 ％和 3 。 a與 b的比例很重要。富有彈性，且完全透明的凝膠， a與 b的重量比應(yīng)在 30左右。 常用 29 ： 1 第一 、 三個不連續(xù)性： ① 凝膠孔徑的不連續(xù)； ② 緩沖液離子組成及各層凝膠 pH的不連續(xù)； ③ 在電場中形成的電位梯度的不連續(xù) 。 第二 、 不連續(xù)系統(tǒng)中的三種物理效應(yīng)： ① 電荷效應(yīng)： ② 分子篩效應(yīng) : ③ 濃縮效應(yīng) : (4)不連續(xù) PAGE的原理： 不連續(xù) PAGE電 泳 膠體 系 統(tǒng) 的 組 成： 1 電 泳系 統(tǒng) pH 膠體濃 度 緩沖 液 上 層 (負(fù)極 ) 緩沖 液 2 樣 本溶液 3 濃縮膠 4 分 離膠 膠 體 5 下 層 (正 極 )緩沖 液 TrisHCl TrisHCl Trisglycine Trisglycine Trisglycine 5% 7% ■ 在 濃縮膠 中的三 個 主要作用角色： 甘氨酸 : pH= 負(fù)電荷 pI= 不帶電荷 Cl1: 蛋白質(zhì) (酶 ): 小分子 大分子 ■ 濃縮效應(yīng) ： 分離膠 濃縮膠 樣本 離子缺乏空間 A B C + + ? 以鄰甲氧基苯酚（即愈創(chuàng)木酚）為過氧
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