過氧化物酶同工酶的提取、分離-wenkub
2023-06-10 18:44:35 本頁面
【正文】 大 ， 且不穩(wěn)定 ， 適于制備大孔徑的 濃縮膠 。 聚丙烯酰胺凝膠電泳（ PAGE） 聚丙烯胺凝膠 由 丙烯酰胺單體 （ Acr） 和 N， N’甲叉雙丙烯酰胺 （ Bis） 在催化劑作用下聚合而成 。 同工酶與生物的遺傳 ， 生長發(fā)育 ， 代謝調節(jié)及抗性等都有一定的關系 ， 如 POD在細胞代謝過程中與 呼吸作用 ， 光合作用 ， 及 生長素的氧化 等都有關系 ， 測定 POD活性或其同工酶 ， 可以反映某一時期植物體內代謝變化 。 一般老化組織中活性較高 ， 幼嫩組織中活性較弱 。 了解過氧化物酶 (POD)的生物學功能。 一、實驗目的： 過氧化物酶： 過氧化物酶廣泛存在于植物體中 ， 是活性較高的一種酶 。 這是因為過氧化物酶能使組織中所含的某些碳水化合物轉化成木質素 ， 增加木質化程度 ， 而且發(fā)現早衰減產的水稻根系中過氧化物酶的活性增加 ， 所以過氧化物酶可作為組織老化的一種生理指標 。 二、實驗原理 : (1)定義： 是指帶電粒子在電場中向與其自身所帶電荷相反的電極方向移動的現象。 在具有 自由基 時 ， Acr和 Bis就會聚合 。 ■ 聚合反 應 ： 架 橋 物造成分枝 端 點 自由基 可再延 續(xù) free radical Bis Bis 聚合反 應 交 錯連結 自由基形成 ① 聚丙烯酰胺的基本結構為丙烯酰胺單體構成的長鏈 ， 鏈與鏈之間通過甲叉橋聯結在一起； ② 鏈的縱橫交錯形成三維網狀結構 ， 使凝膠具有分子篩的性質； ③ 網狀結構還能限制蛋白質等樣品的擴散運動 ， 使凝膠具有抗對流的作用； ④ 長鏈富含酰胺基團 ， 使其成為穩(wěn)定的親水凝膠； ⑤ 該結構不帶電荷 ， 在電場中電滲現象極為微小 。 (3)凝膠的質量決定因素： 聚丙烯酰胺凝膠的強度、彈性、透明度、粘度和孔徑大小均取決于兩個重要參數 T(總百分濃度 )和C(交聯百分濃度 )。富有彈性，且完全透明的凝膠， a與 b的重量比應在 30左右。 聯苯胺是致癌物質 ，稱取時應戴手套； （ 14） ； （ 15）
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