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正文內(nèi)容

瘧原蟲的鏡檢技術(shù)山東省寄生蟲病防治研究所(編輯修改稿)

2025-06-22 13:32 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 染液存放時(shí)間越久 , 染色力越強(qiáng) 。 新配制的染液因色素尚未充分溶解 , 染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性 。 通常在染液配制 12周后才使用 , 盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密 。 以防吸潮而影響染液質(zhì)量 。 ( 3) 染液稀釋后使用時(shí)間 必須現(xiàn)用現(xiàn)稀釋染液 ,當(dāng)時(shí)使用 , 一般在 。 姬氏和瑞氏染液的主要成份是美藍(lán) 、 伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青 , 三者能在酒精溶液中溶解 , 但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀 。 影響染色效果的因素 ( 4)染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深,從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著,但顏色常偏堿;染液濃度過(guò)低則染色時(shí)間久,顏色偏酸,薛氏點(diǎn)不明顯或消失。 ( 5)染色時(shí)間 染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。 染色時(shí)間長(zhǎng)染色效果好,反之較差。室溫高則著色快,染色時(shí)間可略縮短,氣溫低可適當(dāng)延長(zhǎng)。 ( 6)染色用水 染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇,通常使用的新鮮的蒸餾水或過(guò)濾的冷開水。 ( 7) 沖洗方法 應(yīng)沿玻片或染色缸邊緣加水使染液表面一層溢出 , 并輕輕沖洗 , 以免染液色素顆粒沾污血膜 。 影響染色效果的因素 :( 1) 染劑 、 溶劑的質(zhì)量 ( 2) 染液的新舊 ( 3) 染液稀釋后使用時(shí)間 ( 4) 染液的稀釋濃度 ( 5) 染色時(shí)間 ( 6) 染色用水 ( 7) 沖洗方法 血片制作與染色注意事項(xiàng) ● 使用前載玻片一定要清潔,不然會(huì)影響血片制作和鏡檢結(jié)果。 ● 厚血膜干燥時(shí)不要加熱,加熱會(huì)使原蟲變形,影響鏡檢結(jié)果。 ● 配置母液時(shí)過(guò)濾可除去雜質(zhì)顆粒,有助于提高鏡檢質(zhì)量。 ● 固定薄血膜時(shí)不要將甲醇觸碰到厚血膜 ● 沖洗染液時(shí),不要沖走厚血膜。 如何確定瘧原蟲血片為陰性 ● 檢查全部厚血膜未查見瘧原蟲。 ● 最少檢查 100個(gè)厚血膜油鏡視野未查見 瘧原蟲。 ● 鏡檢時(shí)間最少不低于 20分鐘。 瘧原蟲生活史簡(jiǎn)圖 (為更好的理解原蟲各期形態(tài),簡(jiǎn)要復(fù)習(xí)一下生活史) 生 活 史 含成熟瘧原蟲子孢子按蚊 叮咬人 子孢子隨唾液進(jìn)入人體血液 約 30分鐘 侵入肝細(xì)胞 裂體增殖 成熟裂殖體(含數(shù)以萬(wàn)計(jì)裂殖子) 肝細(xì)胞破裂 裂殖子侵入紅細(xì)胞(開始 紅細(xì)胞內(nèi)期 發(fā)育) 發(fā)育 小滋養(yǎng)體(環(huán)狀體) 攝食營(yíng)養(yǎng)、發(fā)育 大滋養(yǎng)體 核分裂、發(fā)育 未成熟裂殖體 核進(jìn)一步分裂 裂殖體(成熟) 被寄生紅細(xì)胞破裂 裂殖子釋放入血流 一部分被巨噬細(xì)胞吞噬。 一部分再侵入紅細(xì)胞,開始新的一輪發(fā)育。 一部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖,而發(fā)育成雌,雄配 子體。在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。 由生活史容易看出,瘧原蟲的主要致病時(shí)期是紅細(xì)胞內(nèi)期原蟲; 主要是指紅細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體 —— 小滋養(yǎng)體到成熟裂殖體,而不是紅 細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體 —— 配子體。 瘧疾全球流行,惡性瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 50%,間日瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 43%。在我國(guó)流行最廣的是間日瘧,其次是惡性瘧;惡性瘧主要分布在我國(guó)的云南、海南兩??;三日瘧患者極少見,卵形瘧僅發(fā)現(xiàn)幾例。我省主要是間日瘧,現(xiàn)常有輸入性惡性瘧。 人類四種瘧原蟲的基本特征 感染人的瘧原蟲有四種 : 惡性瘧原蟲 P. falciparum 間日瘧原蟲 P. vivax 三日瘧原蟲 P. malariae 卵形瘧原蟲 P. ovale 惡性瘧 ● 四種瘧原蟲中致病力最強(qiáng); ● 無(wú)免疫力者感染后出現(xiàn)急性癥狀, 不及時(shí)治療可危及生命; ● 在我國(guó)主要流行云南省和海南省 。 間日瘧 ● 間日瘧原蟲分布于我國(guó)大部分地區(qū), 主要是中部地區(qū)。 ● 引起間日瘧,病程呈良性, 但有復(fù)發(fā)。 三日瘧 ● 三日瘧在我國(guó)已基本消滅。 ● 主要發(fā)生在晚秋及初冬,無(wú)復(fù)發(fā)。 卵形瘧 ● 又稱蛋形瘧原蟲, 在我國(guó)已基本消滅。 ● 引起癥狀與間日瘧相似, 但很少?gòu)?fù)發(fā)。 謝謝諸位領(lǐng)導(dǎo)和同志們!不當(dāng)之處請(qǐng)多加批評(píng)指正! 下面由年輕有為的王用彬大夫?yàn)榇蠹以敿?xì)講解厚薄血膜上間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn),請(qǐng)大家多加鼓勵(lì)!謝謝! 咱們學(xué)習(xí)瘧原蟲的鏡檢技術(shù),關(guān)鍵是認(rèn)清鏡下的原蟲;下面結(jié)合模擬圖片及鏡下照片,簡(jiǎn)要復(fù)習(xí)一下間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲在厚、薄血膜上各期原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu),說(shuō)明一下瘧原蟲的計(jì)數(shù)方法,然后重點(diǎn)對(duì)鏡下瘧原蟲的許多照片進(jìn)行辨認(rèn),最后實(shí)地鏡下觀察瘧原蟲。 薄血膜中環(huán)狀體形態(tài)特征 間日瘧原蟲環(huán)狀體 約為紅細(xì)胞直徑的 1/ 3;環(huán)較粗大;核 1個(gè); 2個(gè)核和一個(gè)紅細(xì)胞寄生 2個(gè)環(huán)狀體很少見 惡性瘧原蟲環(huán)狀體 約為紅細(xì)胞的 1/6;環(huán)纖細(xì);核 1~2個(gè); 一個(gè)紅細(xì)胞寄生 2個(gè)環(huán)狀體的常見 薄血膜中大滋養(yǎng)體形態(tài)特征 間日瘧原蟲大滋養(yǎng)體 蟲體不規(guī)則,較大;阿米巴樣空泡明顯;瘧色素細(xì)小,黃褐色 惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體 體小,圓形;空泡小;早期瘧色素細(xì)小,金黃色,晚期結(jié)成塊狀,黑褐色 薄血膜中未成熟裂殖體(裂殖體前期)形態(tài)特征 間日瘧原蟲裂殖體前期 圓形或不規(guī)則;核分裂為 2個(gè)以上,空泡消失;瘧色素分布不勻 惡性瘧原蟲裂殖體前期 圓形,核分裂為 2個(gè)以上;瘧色素集成團(tuán)快 薄血膜中成熟裂殖體形態(tài)特征 間日瘧原蟲裂殖體 大于正常紅細(xì)胞;裂殖子12~24個(gè),通常 16個(gè),排列不規(guī)則;瘧色素常集于一側(cè),黃褐色 惡性瘧原蟲裂殖體 小于正常紅細(xì)胞;裂殖子較小, 8~36個(gè),排列不規(guī)則;瘧色素成團(tuán)快狀,黑褐色 薄血膜中大(雌)配子體形態(tài)特征 間日瘧原蟲雌配子體 大于正常紅細(xì)胞,圓形;核小,致密,深紅色,偏于一側(cè),胞漿深藍(lán)色;瘧色素散在。 惡性瘧原蟲雌配子體 新月型,兩端較尖;核小,致密,深紅色,位于
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