【正文】 短，但染色效果不如吉氏穩(wěn)定，主要在門診量大的門診實(shí)驗(yàn)室使用。 姬氏染液的染色方法 ▲ 先用甲醇或無(wú)水酒精固定薄血膜 ,再用清水對(duì)厚血膜溶脫血紅蛋白，然后再進(jìn)行染色。 姬氏和瑞氏染液的主要成份是美藍(lán) 、 伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青 ， 三者能在酒精溶液中溶解 ， 但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀 。 一部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育成雌，雄配 子體。 惡性瘧原蟲雄配子體 臘腸形，兩端鈍圓；核大，疏松，淡紅色，位于中央；胞漿淺藍(lán)色或淺紅色；瘧色素圍于核周。 ● 白細(xì)胞瘧原蟲計(jì)算公式： 瘧原蟲數(shù) 患者每微升血的白細(xì)胞數(shù) 247。 2）同一血膜中發(fā)現(xiàn)大量纖細(xì)的惡性瘧環(huán)狀體，并混有少量間日 瘧原蟲。 ● 引起癥狀與間日瘧相似， 但很少?gòu)?fù)發(fā)。 ● 最少檢查 100個(gè)厚血膜油鏡視野未查見 瘧原蟲。 新配制的染液因色素尚未充分溶解 ， 染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性 。 姬氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑 ， 即使在炎熱天氣中 ， 亦可經(jīng)久不變 。若不能及時(shí)染色，薄血膜宜先用甲醇固定（ 13分鐘）然后用過濾清水對(duì)厚血膜溶血，晾干固定后裝入盒內(nèi)蓋嚴(yán)，待以后染色。 標(biāo)準(zhǔn)的瘧疾厚薄血膜位置 全國(guó)瘧疾鏡檢知識(shí)與技能競(jìng)賽 血片制作和染色質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 好血片制作質(zhì)量 : 厚血膜： 血量 ～ ,位置 玻片右 1／ 3稍偏右 ,直徑 ～ ， 外觀 圓形厚膜均勻。 取血部位和血量 采血部位和方法： 采血部位一般人為耳垂，指頭；一人一針，常規(guī)消毒、采血。 （五）早期診斷和全程、足量的規(guī)范用藥是治療瘧疾的關(guān)鍵。 世界瘧疾日由 世界衛(wèi)生大會(huì) 在 2022年 5月第六十屆會(huì)議上設(shè)立 ， 旨在推動(dòng)全球進(jìn)行瘧疾防治 。 血 檢 瘧 原 蟲 是確診瘧疾最可靠的方法 20世紀(jì)以來(lái) ， 隨著顯微鏡的不斷改進(jìn)和染色方法的的不斷完善 ， 使顯微鏡檢查瘧原蟲的方法成為瘧疾病原學(xué)診斷的重要手段 。 發(fā)熱病人血片 標(biāo)本片 薄血膜的制作 薄血膜 用推片一端邊緣的中點(diǎn)從取血部分 ①取約1～ （相當(dāng)于 1/4火柴頭大?。?使血滴與平置的載玻片接觸， 并形成 25～ 350夾角 ，待血液向兩側(cè)擴(kuò)展約 ② 2cm～ ，均勻而迅速地從右向左推成舌狀薄血膜（約 ）。包括：厚、薄血片的制作和染色；瘧原蟲的顯微鏡鏡檢，確定陰陽(yáng)性和蟲種，定量計(jì)數(shù)以及顯微鏡的使用與維護(hù)。 染液的染色原理 染色原理是染料于被染物的陰陽(yáng)離子互相吸附而結(jié)合的一種化學(xué)反應(yīng) 。 注意： 吸取母液時(shí)，不要晃動(dòng)瓶子 ,以免沉淀物泛起影響染色效果 . 成批血片染色 ： 將已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入 3%吉氏染液稀釋液（ 3毫升吉氏原液加緩沖液或凈水 97毫升，混勻）浸沒血片，同時(shí)對(duì)厚薄血膜染色 30min（根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況，酌情增減染色時(shí)間和濃度），然后用清水輕輕將染液漂洗干凈，將血片標(biāo)本（血膜面朝下）插于晾干板上晾干，包裝，鏡檢。 影響染色效果的因素 （ 4）染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深，從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著，但顏色常偏堿；染液濃度過低則染色時(shí)間久，顏色偏酸，薛氏點(diǎn)不明顯或消失。在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。 將（未）成熟大配子體 與 成熟大滋養(yǎng)體 (核分裂前，剛要進(jìn)入裂殖體前期 )的形態(tài)鑒別 蟲體大小 :幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞 核 :一個(gè)，較大且致密，周圍有一圈空白的不染色帶 胞漿 :邊緣清楚，不含空泡 瘧色素 :顆粒較多較粗，均勻散在 蟲體大小 :不超過被寄生紅細(xì)胞的3/4 核 :一個(gè)，延長(zhǎng)呈帶狀，周圍無(wú)明顯的不染色帶 漿 :邊緣不整齊，多有空泡 瘧色素 :顆粒較少較細(xì)，分布不均勻 厚血膜中瘧原蟲的形態(tài) 厚血膜由于用血量較多，涂制的血膜小，紅細(xì)胞重疊且干燥慢，致使蟲體皺縮，空泡消失，胞漿變形，其形態(tài)改變的程度與瘧原蟲運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)弱、空泡有無(wú)和大小有關(guān)。 計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù) = 瘧原蟲數(shù) /μl血。 容易鑒別的混合感染 1）同一血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧各期原蟲和惡性瘧雌雄配子體。 卵形瘧 ● 又稱蛋形瘧原蟲， 在我國(guó)已基本消滅。 如何確定瘧原蟲血片為陰性 ● 檢查全部厚血膜未查見瘧原蟲。 （ 2） 染液的新舊 染液存放時(shí)間越久 ， 染色力越強(qiáng) 。 在研缽中加少量甲醇 ， 洗去甘油濃液混入瓶?jī)?nèi) ， 至 25ml甲醇 洗凈缽中甘油染液為止 ， 塞緊瓶塞 ， 充分搖勻 ， 置于 55—60℃ 水浴中或溫箱內(nèi) 24h或室溫內(nèi) 3—5天 ， 多加搖動(dòng) ， 即成原液 。放置時(shí)間越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。 ●薄 血膜平整，無(wú)皺折和空泡，紅細(xì)胞單層排列。 血膜的制作 （取血操作） 在制作血片前，首先要核對(duì)患者的姓名、年齡和住址。 （四）預(yù)防瘧疾最有效的辦法是防止蚊蟲叮咬。 2022年 4月 25日為首個(gè)世界瘧疾日 。凡是瘧疾 ， 最終定能查到瘧原蟲 ， 不存在沒有瘧原蟲的瘧疾 。推制時(shí)速度要均勻，血滴大小、推片與載玻片之間夾角大小及展開血膜的速度快慢等常影響血膜的厚薄。 ：每位選手滿分 100分，其中理論競(jìng)賽 20分，技能競(jìng)賽 80分；技能競(jìng)賽中，制片染色 15分， 鏡檢讀片 60分， 顯微鏡使用與維護(hù) 5分。 組成紅 、 白細(xì)胞和瘧原蟲等蛋白質(zhì)的氨基酸電離出的帶正電荷的 NH3+和帶負(fù)電荷的 COO ， 與多色染劑有色基團(tuán)所帶的陰 、 陽(yáng)離子相結(jié)合 ， 從而使紅 、 白細(xì)胞和瘧原蟲被染上不同的顏色 。 單張血片染色 ：將處理好的血膜，加姬氏母液 12滴 ，加中性蒸餾水 1530滴 ，染色 30分鐘左右，然后用清水輕輕將片上的染液沖洗干凈，晾干鏡檢。 （ 5）染色時(shí)間 染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。 由生活史容易看出，瘧原蟲的主要致病時(shí)期是紅細(xì)胞內(nèi)期原蟲； 主要是指紅細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體 —— 小滋養(yǎng)體到成熟裂殖體，而不是紅 細(xì)胞內(nèi)期的無(wú)性體 —— 配子體。各期瘧原蟲在發(fā)育中，大小滋養(yǎng)體明顯的阿米巴樣運(yùn)動(dòng)