【文章內(nèi)容簡介】 手拎著移動。（二）任何旋鈕轉(zhuǎn)動有困難時，絕不能用力過大，而應(yīng)查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時，要向?qū)I(yè)人員請求解決。所有的鏡頭均經(jīng)校驗，請勿自行拆開。（三）保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上，否則容易磨損鏡頭。同時要盡量避免試劑或溶液滴到顯微鏡上，特別是用高倍物鏡觀察時，鏡頭很容易被染料或試劑玷污，一旦被玷污，應(yīng)立即用擦鏡紙擦拭干凈，油鏡頭還應(yīng)使用清潔劑擦拭。由于光學(xué)玻璃比一般玻璃的硬度小，易于損傷。因此擦拭光學(xué)透鏡只能用專用的擦鏡紙，不能用棉花、棉布或其它物品擦拭。擦?xí)r要先將擦鏡紙折疊為幾折，從一個方向輕輕擦拭鏡頭，每擦一次，擦鏡紙就要折疊一次，以免沾在擦鏡紙上的灰塵損傷透鏡，使鏡面出現(xiàn)一條條的劃痕。（四）每次使用結(jié)束時，并光源調(diào)節(jié)器調(diào)至最小后關(guān)閉，并將物鏡轉(zhuǎn)成“八”字形垂于鏡筒下，然后降下鏡筒，避免物鏡鏡頭下落時與聚光器相碰撞。顯微鏡應(yīng)存放于陰涼干燥的地方，若放在潮濕處，一旦鏡片上著生霉菌，就會腐蝕鏡片，且很難除去。四、顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)（一） 防高熱：顯微鏡是由精密的機(jī)械和光學(xué)鏡頭組成的，由于各種材料熱膨脹系數(shù)不同，所以顯微鏡不能在陽光了曝曬，也不能放在靠近火爐和暖氣的地方。只能室內(nèi)存放，其工作的溫度范圍一般為5～40℃。（二） 防潮：如果長期受潮，透鏡很容易發(fā)霉，表面還會腐蝕，所以應(yīng)在干燥環(huán)境下保存。在31℃時濕度不得大于80％，溫度每升高3攝氏度，相對濕度要設(shè)法降低10％。（三） 防塵 ：灰塵不僅會影響成像質(zhì)量，而且灰塵中往往也帶有含酸、堿等腐蝕性的塵粒，容易腐蝕鏡面。而硬度大的塵粒還可能在擦拭鏡頭時在鏡面上劃出傷痕，損壞鏡頭。此外，灰塵掉進(jìn)機(jī)械活動部分時容易造成機(jī)械部分轉(zhuǎn)動不靈活，甚至損壞。（四）防腐蝕：顯微鏡不能接觸酸類和堿類物質(zhì)。也不要與揮發(fā)性很強(qiáng)的化學(xué)藥品及其它有害藥品放在一起，以免腐蝕鏡頭。（五）防震：顯微鏡是精密儀器，劇烈的震動會造成精密度的降低。要輕拿輕放，擱置要平穩(wěn)，使用時動作應(yīng)輕柔。（六）擦拭：.機(jī)械裝置的擦拭:機(jī)械裝置如有污漬，可用干凈的柔軟細(xì)布擦拭；如果擦不掉，可用擦鏡紙或細(xì)綢布蘸點(diǎn)二甲苯擦拭。應(yīng)注意不能用酒精、乙醚等化學(xué)品，以免腐蝕裝置表面的油漆。光學(xué)鏡頭的擦拭：一般采用先吹，后刷，再擦拭的方法。吹，就是用吹氣球(或用洗耳球)吹掉鏡頭表面的附著物。但不能用口直接吹氣。吹不掉時，可用干凈的專用清潔毛刷輕輕地刷。經(jīng)上述兩種方法處理后鏡頭表面仍有污物時，用擦鏡紙稍蘸一點(diǎn)二甲苯或是專用清潔劑輕輕擦拭。如果發(fā)現(xiàn)鏡頭發(fā)霉長霧時，可用擦鏡紙蘸少許無水酒精和乙醚的混合液擦拭，但液體不能太多，停留時間要短，以免滲入鏡頭內(nèi)部造成腐蝕。 油鏡頭每次用過后要及時擦拭，先用干擦鏡紙擦一兩次，把大部分介質(zhì)油去掉，再用二甲苯滴濕擦鏡紙擦兩次，最后再用干擦鏡紙擦一次。第四章 血片制作與染色一、血片制作（一）所需器材載玻片：玻片使用前應(yīng)清洗。新玻片應(yīng)先浸入有液態(tài)洗滌劑的清水中10~20分鐘，然后用干凈棉巾逐個擦拭，再用清水沖洗干凈，晾干，最后用干凈、柔軟的棉巾將玻片擦亮。用于特殊的目的時，最后可將玻片浸泡在95％酒精中5~10分鐘，再將玻片擦干擦亮。已用過的玻片應(yīng)先浸泡于洗滌劑溶液中1~2天，或浸泡于煮沸的5％肥皂水中1~2小時，再移到新配置的洗滌劑溶液中1~2小時，逐個擦去玻片上舊的血膜痕跡，用清水漂洗干凈，再將玻片擦干擦亮。洗凈的玻片每10~20張用白紙包好放入塑料袋內(nèi)，保存于干燥環(huán)境中備用。采血針：使用一次性釆血針。玻片盒：為防止污染和蒼蠅吸食血膜，新制作的血膜應(yīng)放在玻片盒中，厚血膜放置時要保持水平，直到充分干燥。75％酒精棉球：用于采血前后的消毒。記號筆或鉛筆：用于玻片上書寫號碼。（二）采血部位及取血方法采血部位以耳垂較為合適，也可在手指末端采血，嬰兒可從拇趾或足跟取血。先用75％酒精棉球消毒取血部位后，以一次性采血針迅速刺入取血部位1~2mm深，然后用左手大拇指、食指和右手中指協(xié)同擠出血滴。（三）涂制血膜取玻片2張，1張作載片，1張作推片（具有光滑邊緣）。用右手拇指和食指夾持推片側(cè)緣中部，用推片的左下角刮取血液4~5μl，再用該端中部刮取血液1~。將左下角的血滴涂于載片的中央偏右處，~1cm的圓形厚血膜（厚度以1個油鏡視野內(nèi)可見到5~10個白細(xì)胞為宜）。用干棉球抹凈玻片角上的血漬，然后將推片下緣平抵載玻片的中線，當(dāng)血液在載玻片與推片之間向兩側(cè)擴(kuò)展至約2cm寬時，使兩玻片保持25176?！?5176。角，從右向左迅速向前推成舌狀薄血膜，制成的薄血膜應(yīng)在玻片上形成平鋪的血細(xì)胞，細(xì)胞之間互相接觸而不相互重疊。每張載玻片上分別做1個薄血膜，1個厚血膜。標(biāo)準(zhǔn)血膜的位置如圖41所示。取干凈玻片及推片各一張，用右手大拇指和食指夾持推片側(cè)緣中部，用推片的左下角刮取血液4～5μl（約火柴頭大?。?，再用該端中部刮取血液1～。將左下角的血滴涂于載片的中央偏右，～1cm的圓形厚血膜（厚血膜的厚度以一個油鏡視野內(nèi)可見到5～10個白細(xì)胞為宜）。用干棉球抹凈角上的血漬，然后將推片下緣平抵載玻片的中線，當(dāng)血液在載玻片與推片之間向兩側(cè)擴(kuò)展至約2cm寬時，使兩玻片保持25176?！?5176。角，從右向左迅速向前推成舌狀薄血膜。薄血膜 厚血膜 標(biāo)記處圖41（四）血膜的保存血膜制成后，立即將受檢者號碼寫在玻片上，血膜朝下插入直豎的標(biāo)本盒內(nèi)，讓血膜自然干燥后才能染色。吉氏染色時薄血膜在染色前須經(jīng)甲醇固定，而厚血膜在染色前必須溶血，但新制作的厚血膜也可直接染色。血膜放置時間，夏天不宜超過48小時，冬天不宜超過72小時，否則厚血膜會自然固定而不能溶血，影響鏡檢。不能及時染色的血膜，可先用甲醇固定薄血膜，將厚血膜溶血，晾干后包好，放入干燥器中，置于冰箱內(nèi)保存。臨用時，將干燥器放置室溫中1~2小時后取出血片。二、血膜的染色（一） 染色液的制備 目前常用的血膜染劑有吉氏和瑞氏兩種。吉氏染劑不僅適用于厚血膜和批量血膜的染色，而且效果穩(wěn)定，染色時間和染液濃度對染色結(jié)果影響較小，染色后的血膜保存時間較長，同時吉氏染劑能長期保存而不變質(zhì)，染色技術(shù)也易掌握，被推薦使用。吉氏粉 5g，甲醇250ml，甘油250ml。將吉氏粉置于研缽中，加入少量甘油充分研磨，邊加邊磨，至甘油加完為止，倒入500ml有塞玻璃瓶中。在研缽中加入少量甲醇，洗掉剩余部分，倒入瓶內(nèi)，再次加甲醇，洗后再倒入瓶中，至甲醇洗凈研缽為止。塞緊瓶塞，充分搖勻，室溫內(nèi)放置，每天用力搖動溶液5分鐘，3天后即可使用。另一種方法是在帶有緊口瓶塞的硬質(zhì)玻璃瓶中放入約50個玻璃珠（直徑3~5mm）。用玻璃漏斗把甘油灌入瓶中，把吉氏粉放入漏斗中，用甲醇緩慢地把所有染料粉沖入瓶內(nèi)，將瓶塞塞緊，置于室溫內(nèi)，每天用力搖動5分鐘，3天后即可使用，保存時間長則更好。（二）染色用水常用的染液的稀釋用水和染色的沖洗用水，是中性的蒸餾水或經(jīng)煮沸過濾的冷開水，也可用井水、河水、泉水或雨水。為了使血膜著色較好，～。為此，可配制緩沖液用于染液的稀釋和染色后的沖洗。~，先制備好兩種貯備液。貯備液Ⅰ為每1 磷酸氫二鈉，貯備液Ⅱ為每1 磷酸二氫鉀。~，將兩種貯備液按一定比例混合后，用蒸餾水稀釋成各種濃度的溶液。兩種貯備液的用量見表41。表41 ~pH溶液Ⅰ溶液Ⅱml磷酸氫二鈉含量(g)ml磷酸二氫鉀含量(g)注：用于薄血膜的染色和一般漂洗時，用蒸餾水稀釋至1 000ml，用于厚血膜及同一張玻片上厚血膜與薄血膜的染色時，用蒸餾水稀釋至500ml。（三）吉氏染色方法染色前薄血膜要用甲醇或無水乙醇固定，厚血膜用蒸餾水或清水溶血。單張血膜染色可取蒸餾水或緩沖液1ml加入吉氏染液1滴，混合均勻后，滴在厚、薄血膜上，染色20~30分鐘，然后水洗、晾干。成批染色時，將血膜朝一個方向插入染色缸中，或每對玻片血膜朝外，背靠背插入染色缸中，倒入新配的2％