如何從動物肝臟中提取一種酶(編輯修改稿)
2025-06-22 06:32 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 分離的目的。利用離心的方法將沉淀和上清液分離。 實驗原理 四，等電點沉淀 (Isoelectric point precipitation ) 利用 兩性電解質在等電點時溶解度最低 ， 及 不同兩性電解質的等電點不同 這一特性，通過調(diào)節(jié)溶液的 pH值或鹽濃度，使酶或雜質沉淀析出，從而使酶與雜質分離的方法。 實驗原理 五，離子交換柱層析 (Ion exchange column chromatography )， 按照可交換離子的類型分為 陽離子交換柱色譜法 和 陰離子交換柱色譜法 。根據(jù)物質酸堿性、極性等差異，通過離子間的吸附和解吸而將電解質各組分分開。 在離子交換過程中，可以將雜蛋白選擇性地結合到離子交換劑上，其余蛋白存在于過柱液中 ?；驅⒂蛛x蛋白選擇性地結合到離子交換劑上，雜蛋白存在于過柱液中 ?；驇追N帶同性電荷的蛋白均結合到交換劑上，利用其結合的 牢固程度不同 (即帶電荷的數(shù)目不同 )，靜電引力不同 ，分步洗脫下來，達到分離的目的。 實驗原理 六，脫鹽 經(jīng)過各種純化手段提取的蛋白質溶液經(jīng)常含有較高的鹽離子濃度，需要將多余的鹽離子去除，稱為 蛋白質的脫鹽 ，脫鹽的主要方法有 透析法，超濾法，凝膠過濾法等 。 實驗原理 七， SDS電泳 (SDS electrophoresis ) 該方法中，由于該蛋白質有三個大小不同的亞基，所以將會形成三條不同的區(qū)帶。達到了實驗鑒定的目的。 SDSPAGE：使用陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉，先將蛋白質大分子變性，并與其蛋白質分子結合形成 帶負電荷蛋白質 SDS復合體 沿著以聚丙烯酰胺凝膠形成的分子篩
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