如何從動(dòng)物肝臟中提取一種酶-資料下載頁(yè)
2025-05-26 06:32本頁(yè)面
【正文】 的酶 一，初分，鹽析 使用飽和硫酸銨以一定的恰當(dāng)比例，使蛋白質(zhì)析出，視具體情況通過過濾和離心的方法沉淀分離出來，得到的沉淀即為蛋白質(zhì) 等電點(diǎn)沉淀法 將上一步得到的沉淀溶解在 ph為 沖液中，離心后得到上清液和沉淀， 棄去上清，沉淀即為所有 pI為 二，精分，離子交換柱層析法 利用 DEAE纖維素（ｐｈ為８．０）作為陰離子交換劑，帶有正電荷可以吸附帶有負(fù)電荷的蛋白質(zhì) DEAE預(yù)處理，裝柱，平衡樣品上樣與洗脫收集得到相對(duì)純凈的蛋白質(zhì) 利用 CM纖維素（ ph為 ）作為陽(yáng)離子交換劑，吸附帶正電荷的酶 DEAE的再生與保存 實(shí)驗(yàn)步驟 如何使線粒體和細(xì)胞核破碎？ 鑒定 純化 分離提取 細(xì)胞破碎 實(shí)驗(yàn)取材 脫鹽，使用透析袋脫鹽 SDS電泳， 1，制備待測(cè)蛋白質(zhì)樣品： 2，垂直板狀聚丙烯酰胺凝膠的灌制： 3，加樣： 4，電泳： 5，剝膠： 6，染色和褪色。 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ： 觀察脫色后凝膠中的蛋白質(zhì)區(qū)帶，若被測(cè)蛋白質(zhì)樣品分離純化的好，純度高，應(yīng)出現(xiàn)三條區(qū)帶，若在同一凝膠板不同泳道上加一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)該酶樣品同時(shí)進(jìn)行電泳，所觀察到的蛋白區(qū)帶的遷移率應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)品的電泳遷移率一樣。 注意事項(xiàng) 由于該酶未知，因此，在具體操作本實(shí)驗(yàn)過程時(shí)，應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)確定具體的實(shí)驗(yàn)試劑選擇和實(shí)驗(yàn)途徑。 Any question ? 謝 Thanks ありがとう ございます ????? . Merci Danke Gracias Спасибо ???? Grazie
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