多糖分子量測定ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-08 07:36 本頁面
【文章內容簡介】 ， 以 O． 02 mol幾的硫代硫酸鈉溶液稀釋 ， 經標定后使用 )。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 [操作 ] (1)精確稱取樣品 1～ 2 g， 用蒸餾水溶解后 ， 配制成 50 mL， 吸取兩份 5 mL分別置于兩只容量為 100 mL具磨砂口的三角燒瓶 。 (2)另取一只 100 mL具磨砂口的三角燒瓶 ， 盛放 5 mL蒸餾水 ， 作滴定對照用 。 (3)向三角燒瓶中分別加入堿性銅鹽試劑 5 mL， 然后接上具磨砂接頭的冷凝管 ， 放入正在沸騰的水浴中 ， 煮沸 30分鐘之后 ， 小心地把它們從水浴取出 ， 取時勿使瓶中溶液攪動 ， 待冷至室溫后 ， 于各瓶中精確量加 mol／ L的碘酸鉀溶液 15 mL， 再加 2． 5％ 的碘化鉀溶液 1 mL(須沿瓶壁加入 ， 使沾在瓶壁上的反應液淋洗入瓶中 ， 加液時勿使反應液攪動 ， 避免受空氣氧化 )， 再加 1 mol／ L的 H2S04 1． 5 mL， 加畢后立即攪拌混勻 ， 然后加 1％ 可溶性淀粉 l mL為指示劑 ， 用 O． 002 5mol/l的硫代硫酸鈉溶液滴定至藍色退去為止 。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 如果檢測的樣品是右旋糖酐 ， 參比物應以異麥芽糖為宜 ， 但是異麥芽糖的結晶純化比較困難 ， 可改用龍膽二糖 (gentiobiose)作參比物 .龍膽二糖是 β 結構 1— 6的葡萄糖雙糖 ， 實驗證明 ， 異麥芽糖的還原性質為龍膽二糖的 93． 9％ ， 因此用龍膽二糖作參比物去計算右旋糖酐的分子量需要經過校準 。 用硫代硫酸鈉溶液滴定測定龍膽二糖 ， 每毫升 5mol／ L的硫代硫酸鈉相當于 mg龍膽二糖 ， 因此樣品 (右旋糖酐 )的分子量 : M=() 式中 W樣品的取量 (mg)； V滴定時用去的 O． 002 5％ mol／ L的硫代硫酸鈉體積(mL)(空白對照滴定值減去樣品滴定值 )。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 第六章 多糖的分子量測定 把多糖轉化為氰醇 (cynohydrin)的測定法： 把多糖 (P)與氰化鉀反應 ， 成為多糖氰醇 (PCHOHCN)， 然后在堿性條件下使氰醇水解 ， 釋放出氨 PCHO—— ＞ PCHOHCN—— ＞ NH3 釋放的氨用標準濃度鹽酸吸收，再用氫氧化鈉滴定。釋放的氨的毫摩爾量，即為多糖還原基團的毫摩爾量，從而計算多糖的分子量。 本方法常用于纖維素等的分子量測定。 [試劑 ] O． 4 mol／ L醋酸 ， O． 8 mol／ L氰化鉀溶液 ， 20％ 氫氧化鈉溶液 ， O． 01 mol／ L的標準鹽酸 ， O． 01 mol／ L的標準氫氧化鈉 。 [操作 ] (1) 精確稱取樣品 100～ 200 mg， 放在 500 mL具磨砂口的圓底燒瓶中 ， 加蒸餾水 3 mL， 使樣品吸水潤濕 ， 再加濃度為 O． 4 mol／ L的醋酸 5 mL和濃度為 O． 8 mol／ L的 KCN的溶液 5 mL， 蓋上玻璃塞后于 39℃ 溫度保溫 48小時 。 然后用酸將反應液酸化至甲基紅呈酸性 。 (2)通以空氣 ， 驅逐反應液中剩留的氰化物 ， 然后加濃度為20％ 的氫氧化鈉溶液 10mL。 (3)以蒸汽蒸餾法將氨蒸出并吸收于一定體積 (VHCL,)的標準鹽酸中 。 蒸餾完畢 ， 以標準氫氧化鈉滴定鹽酸 (吸收溶液 )， 記錄所消耗的氫氧化鈉的體積 (VNAOH)。 (4)樣品的分子量 : M=樣品質量 /[(VHCL*)(VNAOH*) 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 五、分子篩法 [原理 ] 凝膠過濾測定中 ， 洗脫體積稱為 Ve， 當分子量足夠大 ，過凝膠柱時不進入凝膠的洗脫體積為死體積 V0， 小分子物質進入柱子后 ， 其洗脫體積較大 ， 極限值為 Vt， 即床體積 。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 Kav為分配系數 ， 表示物質在
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