《多糖分子量測(cè)定》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 ， rs與分子量之間存在一種固定的相互關(guān)系 。 (2)通以空氣 ， 驅(qū)逐反應(yīng)液中剩留的氰化物 ， 然后加濃度為20％ 的氫氧化鈉溶液 10mL。 本方法常用于纖維素等的分子量測(cè)定。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 如果檢測(cè)的樣品是右旋糖酐 ， 參比物應(yīng)以異麥芽糖為宜 ， 但是異麥芽糖的結(jié)晶純化比較困難 ， 可改用龍膽二糖 (gentiobiose)作參比物 .龍膽二糖是 β 結(jié)構(gòu) 1— 6的葡萄糖雙糖 ， 實(shí)驗(yàn)證明 ， 異麥芽糖的還原性質(zhì)為龍膽二糖的 93． 9％ ， 因此用龍膽二糖作參比物去計(jì)算右旋糖酐的分子量需要經(jīng)過校準(zhǔn) 。 O． 01 mol／ L碘酸鉀溶液 2． 5％ 碘化鉀溶液 (用時(shí)新鮮配制 ) l mol／ L H2S04 0． 0025 mol／ L硫代硫酸鈉溶液 (臨用前 ， 以 O． 02 mol幾的硫代硫酸鈉溶液稀釋 ， 經(jīng)標(biāo)定后使用 )。 圖中的麥芽糖濃度，可以用麥芽糖的毫摩爾表示，讀取樣品的光密度之后，從該曲線查對(duì)其相應(yīng)的毫摩爾數(shù)，從而計(jì)算樣品的分子量 : M=樣品 (mg)/x. 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 堿性銅鹽試劑反應(yīng)滴定法 ： 以堿性銅鹽試劑氧化還原糖方法 ， 測(cè)定多糖端基的半縮醛基團(tuán)， 從而計(jì)算出它的分子量 。 比色時(shí)用500nm濾光板 。測(cè)定檢樣時(shí) ， 用一個(gè)已知分子量和已知濃度的溶液作參比 ， 經(jīng)過比色 ， 計(jì)算檢樣的分子量 。 T=24℃ M= ， D= : π D M≈ 168O00. CCO 樣品 1 2 3 濃度 C (g／ 100 mL) 滲壓” π /C 4 7 二 、 端基法 [原理 ]測(cè)定單位重量樣品中所含可測(cè)端基之?dāng)?shù) ， 計(jì)算檢樣的分子量 . 例如 ,對(duì)某一種多糖的分子結(jié)構(gòu) ， 業(yè)已明確知道它每一個(gè)分子鏈含有一個(gè)可測(cè)端基和每毫克中所含的可測(cè)端基為 A mmol，那么 ， 該多糖的分子量應(yīng)該是 1／ A。 (3)樣品測(cè)定：先用濃度為 C1的樣品由進(jìn)樣管注入上池，清洗3次，再注滿進(jìn)行測(cè)量，直到記錄儀達(dá)到平衡。 將上池壓緊 。操作時(shí)先將下池充滿純水，加上半膜后再將上池充滿測(cè)定的溶液。 本法不需用標(biāo)準(zhǔn)品 . [原理 ]:把多糖水溶液裝在半透膜制成的透析袋內(nèi) ，袋外為溶劑 (水 )， 水分子可以自由通過半透膜 ， 多糖分子則不能通過透析膜 ， 因此袋內(nèi)的多糖分子必將吸引更多的水分子滲入袋內(nèi) ， 形成一定的滲透壓 。 (2)把不同化學(xué)結(jié)構(gòu)的組分相互分開 ， 使它們?cè)跍y(cè)定分子量中不相互干擾 。 可見 ,不論在多糖性質(zhì)的研究 ，或是在它的用途等方面 ， 都涉及分子量方面的問題 ， 往往需要測(cè)定它的分子量 。 例如 ， 多糖溶液的粘度不但隨濃度的增大而升高 ， 而且與多糖分子量大小有關(guān) 。 多糖的性質(zhì)往往與它的分子量大小有關(guān) 。 第 5章 多糖的分子量測(cè)定 由于不同分子量大小的多糖具有不同的性質(zhì) ， 在多糖的應(yīng)用中 ， 如以其作為試劑使用于某些實(shí)驗(yàn)時(shí) ， 往往需要在它的分子量大小方面作選擇 。用于分子量測(cè)定的樣品，純度要求雖然不十分高，但至少要達(dá)到 : (1)去除雜質(zhì)和水分。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 一 、 滲透壓法： 利用膜滲透壓計(jì) (Membrane Osmometer， 簡(jiǎn)稱 MO儀 )可以測(cè)定范圍在 1萬～ 50萬之間的多糖分子量 。 膜滲透儀 的主要部件是滲透池 ,由半透膜分隔成上下兩池 ,下池底部中央有一壓敏換能元件。 浸泡好的半透膜覆蓋其上并注意勿使氣泡進(jìn)入 。本試驗(yàn)中用右旋糖酐配制成 g／ 100 mL(C1)， g／100 mL(C2)及 g／ lOO mL(C3)3種濃度的溶液 。 第 4章 多糖的干燥和純度鑒定 第六章 多糖的分子量測(cè)定 (4)分子量計(jì)算：
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