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正文內(nèi)容

雙向電泳的操作ppt課件(編輯修改稿)

2025-06-02 18:02 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 透析可以降低鹽濃度,但時間太長 采取凝膠過濾或沉淀 /重懸法脫鹽,但會造成蛋白質(zhì)的部分損失。 常用裂解液 ? Urea ? Thiourea ? CHAPS ? DTT ? Pharmalyte pH 310 ? TrisBase ? Pefabloc protease inhibitor ? 1% SDS 樣品制備程序 ? 培養(yǎng)細(xì)胞( culture cell)樣品處理方法 ( 1) 培養(yǎng)細(xì)胞的收集; ( 2) 用磷酸緩沖液( PBS)洗細(xì)胞 3 次(室溫, 1000g, 各2min); ( 3) 將細(xì)胞分裝到 Eppendof 管中,吸干殘留的 PBS; ( 4) 加入裂解緩沖液( 個細(xì)胞大約加入 100μL 裂解液),在室溫振蕩 1h,使其充分溶解; ( 5) 4℃ , 40,000g,離心 1h; ( 6) 吸取上清并用 Brandford 法定量蛋白,然后分裝至E
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