sdspage電泳測定ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-01 18:23 本頁面
【文章內容簡介】 配制）。用來溶解標準蛋白質及待測固體。 （ 10）染色液： G250，加入 454mL 50%甲醇溶液和 46mL冰乙酸即可。 （ 11）脫色液： 75mL冰乙酸， 875mL重蒸水與 50mL甲醇混勻。 實驗步驟 ? 1． 安裝夾心式垂直板電泳槽：目前，夾心式垂直板電泳槽有很多型號，雖然設置略有不同，但主要結構相同，且操作簡單，不易泄漏。同學們可根據具體不同型號要求進行操作。主要注意：安裝前，膠條、玻板、槽子都要潔凈干燥；勿用手接觸灌膠面的玻璃。 ? 2．配膠：根據所測蛋白質分子量范圍，選擇適宜的分離膠濃度。本實驗采用 SDSPAGE不連續(xù)系統(tǒng)，按下表的配制分離膠和濃縮膠。 試劑名稱 配制 20ml不同濃度分離膠所需各種試劑用量 /ml 配制 10ml濃縮膠所需試劑用量 5% % 10% 15% 3% 分離膠貯液 （ 30%%Bis) 分離膠緩沖液 （ ） 濃縮膠貯液 （ 10%%Bis） 濃縮膠緩沖液 （ TrisHCl） 10% SDS 1%TEMED 重蒸餾水 混勻后，置真空干燥器中，抽氣 10min 10%AP ? 3．制備凝膠板： （ 1）分離膠制備：按表配制 20ml 10%分離膠，混勻后用細長頭滴管將凝膠液加至長、短玻璃板間的縫隙內，約 8cm高，用 1ml注射器取少許蒸餾水，沿長玻璃板板壁
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