【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 剪接 翻譯 β 半乳糖苷酶 β 半乳糖苷酶 使菌落呈藍(lán)色 圖 1 3 2 7 內(nèi)含子活性的檢測(cè) ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 5 ) （一） I型內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 1. 其邊界序列為 5′UG 3′； 2. 具有中部核心結(jié)構(gòu) （ Central core strucature） （ internal guide seguence IGS） 外顯子 1 G O H 5 C U C U C U A 339。 第一次轉(zhuǎn)移 339。G G G A G G P G O H I G S P5 539。 U G CG G G 339。 339。 A CG CC C 5 39。 P1 P2 P 4 Q P3 P6 外顯子 1 P8 G 外顯子 2 P7 2 b p S P9 5 39。 U A G U C 339。 3 39。 A U CA G 5 39。 R 圖 1 3 2 6 1 類(lèi)內(nèi)含子中含有的共同的二級(jí)結(jié)構(gòu) ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 4 ) (二 ) I型 內(nèi)含子的剪切機(jī)制 ? 轉(zhuǎn)酯反應(yīng) (transesterification) 酯鍵從一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一個(gè)位置。 催化的 RN A 有一個(gè)鳥(niǎo)苷結(jié)合位點(diǎn)和一個(gè)底物結(jié)合位點(diǎn) 3 ’ G414 含 A16和 U20 鳥(niǎo)苷結(jié)合位點(diǎn) U U U A CC U 5 ’ CU CU CU 底物結(jié)合位點(diǎn) G G G A G G 第一次轉(zhuǎn)移： G － OH 進(jìn)入 G －結(jié)合位點(diǎn)， 5 ’ 外顯子進(jìn)入底物結(jié)合位點(diǎn) 3 ’ 3 ’ G4 14 G41 4 G O H 5 ’ CU CU C U 5 ’ CU CU CU G G G G A G G G G G A G G 第二次轉(zhuǎn)移： G4 1 4 位于 G －結(jié)合位點(diǎn)， 5 ’ 外顯子位于底物結(jié)合位點(diǎn) 5 ’ CU CU CU 3 ’ 3 ’ G G 5 ’ CU CU C U G G G G G A G G G G G A G G 第三次轉(zhuǎn)移： G4 1 4 位于 G －結(jié)合位點(diǎn)，內(nèi)含子的 5 ’ 端位于底物結(jié)合位點(diǎn) G GG U U U A CC U G G G A G G G G G A G G G U U U A C CU 圖 1 3 四膜蟲(chóng) I 類(lèi)內(nèi)含子剪接的機(jī)制 3 ’ G O H H O CC CCC Cp 3 ’ G CO H 5 ’ p CCC CC O H 3 ’ 5 ’ p CCC CC O H 3 ’ G G G A G G 5 ’ G G G A G G 5 ’ C 5 與 I G S 位點(diǎn)附近的 RN A 5 ’ 端配對(duì) 另一輪 C 5 轉(zhuǎn)移反應(yīng)開(kāi)始 , 釋放 C 6 3 ’ G O H 3 ’ G CO H 5 ’ p CCC CC O H 3 ’ G G G A G G 5 ’ G G G A G G 5 ’ H O CC CCp G O H 攻擊 Cp C 鍵 C 被轉(zhuǎn)移到 3 ’－ G 上； C4 被釋放 圖 1 3 L 1 9 RN A 具有催化 C 6 合成的能力（三） I型內(nèi)含子與 核酶 核酶 （ Ribozyme） 提出 1981年 在研究四膜蟲(chóng)rRNA時(shí)發(fā)現(xiàn)的； （ ribonucleic acid） 和酶（ enzyme） 這兩個(gè)詞 “ 重組 ” 成一個(gè)新的詞： 核酶 是指本質(zhì)為 RNA或以 RNA為主含有蛋白質(zhì)輔基的一類(lèi)具有催化功能的物質(zhì) 。 核酶和傳統(tǒng)酶的區(qū)別： ? (1)一般的酶是純的蛋白質(zhì)；而核酶是 RNA或帶有蛋白的 RNA； ? (2)核酶既是催化劑又是底物 ；而酶僅催化反應(yīng) 。 核酶發(fā)現(xiàn)的意義 ? （ 1）突破了酶的概念 . 是一種自體催化； ? （ 2）揭示了內(nèi)含子自我剪接的奧秘；促進(jìn)了 RNA的研究。 ? （ 3）為生命的起源和分子進(jìn)化提供了新的依據(jù)。 Ⅱ 型內(nèi)含子的剪接 (一 )結(jié)構(gòu)特點(diǎn) (1) 邊界序列為5′↓GUGCG……YnAG↓ ； (2) 有 6個(gè)莖環(huán)結(jié)構(gòu)； 有分支點(diǎn)順序。