【文章內容簡介】 孢子分離法。是利用食用菌的有性孢子或無性孢子，萌發(fā)成菌絲，獲得細菌種的一種方法。按分離時挑取孢子的數(shù)目不同，又分為單孢子分離法和多孢子分離法兩種。蘑菇、草菇等由于孢子沒有性的區(qū)別，采用單孢子分離獲得純菌種，有結實能力，而其它食用菌如香菇、銀耳等由于孢子有性別之分，單孢子分離得到的菌絲不能結實，所以，只在育種上采用，生產(chǎn)上很少采用。多孢子分離法，是把許多孢子接種于同一培養(yǎng)基上，讓它們萌發(fā)，自然交配而獲得純種，操作簡單易學，生產(chǎn)上經(jīng)常采用。由于采集孢子的方法不同又分為如下幾種：（1）采集器孢子彈射法，（2）三角瓶約懸法。采用孢子分離，要注意控制培養(yǎng)的溫度。因為食用菌孢子的彈射與培養(yǎng)的溫度有密切關系，如雙孢蘑菇孢子彈射最適溫度是14～18℃，如培養(yǎng)在25℃條件下，孢子就很難彈出。一般食用菌孢子彈射的最適溫度比菌絲體生長的最適溫度為低，而與子實體發(fā)育的最適溫度大致相同。如香菇孢子彈射的最適溫度為12～18℃，銀耳為20～24℃，黑木耳為20～26℃，平菇為13～20℃。組織分離法。是用食用菌幼嫩的組織塊直接分離培養(yǎng)成純菌種的方法。％開汞水或70％酒精表面消毒后。用無菌水沖洗并用無菌紗布擦去表面水分。分離香菇時用無菌解剖刀自菌柄處切開少許，再用手將子實體掰開為二，在菌蓋與菌褶交界處，～，移放在斜面培養(yǎng)基中央。如已開傘的種菇、則選菌蓋與菌柄交界處的菌肉。分離草菇時，用無菌解剖刀把菌蕾縱切少許；再用手把菌蓋輕輕剝開，在菌柄上方和菌蓋交界處，切取1～5毫米的細塊，接在斜面培養(yǎng)基中。如種菇已受雨淋，吸水較多，應取菌褶作為接種材料。組織分離后將試管外面放在恒溫箱中培養(yǎng)。待組織塊周圍萌發(fā)出菌絲，并向 培養(yǎng)基蔓延生長后，再挑取生長健壯的菌絲進行轉管培養(yǎng)。組織分離法操作簡便，又不易帶入雜菌，容易獲得純菌種。但對銀耳、黑木耳等膠質菌；因其子實體中菌絲的含量極少，如用組織分離培養(yǎng)，則往往不易成功。基內菌絲分離法。是利用食用菌生長的基質——菇木和耳木作為分離材料，而培養(yǎng)成純菌種的方法。特別是銀耳、黑木耳采用這種方法，成功率高，性狀也較穩(wěn)定，為生產(chǎn)上經(jīng)常采用的方法。具體做法是從野生或人工栽培的場所，選擇子實體發(fā)生早，生長旺盛，朵大，無病蟲害的菇木或耳木，鋸取一小段，讓其充分風干后備用。分離時如為香菇的菇木，先鋸取1厘米的薄片，切去四周，％升汞水表面消毒1～2分鐘，用無菌刀將其劈成小木片，移入試管斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)25～27℃培養(yǎng)，菌絲生長后，再行轉管培養(yǎng)。512 母種的擴大培養(yǎng)從分離獲得或外地引入的優(yōu)良母種，由于數(shù)量有限不能滿足生產(chǎn)上的需要，應進行擴大繁殖培養(yǎng)。其方法是以無菌操作把斜面培養(yǎng)基連同菌絲體切成短米粒大的小塊，移接到新的斜面培養(yǎng)基上，在適溫條件下培養(yǎng)，待菌絲長滿斜面時即成。一般每支母種試管可擴大繁殖60～80支新管。擴大母種第一次應多些，以避免多次轉管，造成菌絲生活力降低，結菇少，影響產(chǎn)量和質量。一般要求轉管不要超過五次。513 原種繁殖培養(yǎng)將母種接在瓶或袋的木屑培養(yǎng)基上，通過培養(yǎng)，即成原種。其技術要求如下。原種木屑培養(yǎng)基配方：％，麥麩20％，蔗糖1％，％，％。pH值(滅菌前)，含水量調至60％。將上述原、輔料混合拌勻，裝入750毫升的玻璃菌種瓶內，裝料要求下松上緊。瓶口塞緊棉花，再用牛皮紙包住瓶頸與棉塞。然后置于高壓滅菌鍋內，在147千帕／平方厘米壓力下滅菌2—。也可進行常壓滅菌，在100℃下保持1011小時，達標后趁熱取出，讓其冷卻。接入菌種。待料溫降至25℃以下時，在滅菌條件下，將試管種分割成若干決，通過酒精燈火焰迅速接入原種培養(yǎng)基上，每支母種可按46瓶原種。發(fā)菌培養(yǎng)。接種后及時將玻璃菌種瓶移入25℃菌種培養(yǎng)室內進行培養(yǎng)?？臻g相對濕度控制在70℃以上，避免強光照射。原種培養(yǎng)時間一般菇類需要4050天。去雜選優(yōu)。原種培育過程中，要每天進行觀察，如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的，應立即淘汰。514 栽培種擴大培育將原種再次擴接在同樣的木屑培養(yǎng)基上，在適溫條件下培養(yǎng)3035天即為栽培種(又叫生產(chǎn)種)，可用于生產(chǎn)栽培。栽培種可用750毫升菌種專用瓶，由于使用量大，所以通常多采用聚丙烯菌種袋。袋的規(guī)格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等，可根據(jù)各種菇耳特性和當?shù)亓晳T選擇使用。培養(yǎng)基滅菌采用常壓滅菌灶滅菌，要求滅菌溫度達100℃，保持810小時，達標后趁熱卸袋冷卻。待料溫降至25℃以下時，在無菌條件下接入選定品種的原種。每瓶原種可擴接成5060瓶栽培種。菌種培育室要求干凈，防強光，室溫掌握在2325℃，并經(jīng)常檢查，發(fā)現(xiàn)雜菌污染應及時淘汰，不斷選優(yōu)去劣。當菌絲長滿袋，尖端菌絲反轉上爬13厘米時，為適齡的栽培種。52食用菌栽培生產(chǎn)技術521平菇與姬菇5211平菇與姬菇對生活環(huán)境的要求營養(yǎng)。平菇與姬菇均屬木腐生菌類。菌絲通過分泌多種酶，能將纖維素、半纖維素、 木質素及淀粉、果膠等成分分解成單糖或雙糖等營養(yǎng)物，作為碳源被吸收利用，還可直接吸收有機酸和醇類等，但不能直接利用無機碳。平菇以無機氮(銨鹽、硝酸鹽等)和有機氮化合物(尿素、氨基酸、蛋白質等)作為氮源。蛋白質要通過蛋白酶分解，變成氨基(不同性別)酸后才能被吸收利用。平菇生長發(fā)育鎖狀聯(lián)合中還需要一定的無機鹽類，其中以磷、鉀、鎂、鈣元素最為重要。適宜平菇的營養(yǎng)料范圍很廣。人工栽培時常用闊葉樹段木和鋸木屑作栽培料，近年來我國又用秸桿(大、小麥秸)，玉米芯、花生殼、棉籽殼等作為培養(yǎng)料，再適當搭配些餅肥、過磷酸鈣、石灰等補給氮素和其它元素，能促使平菇很好的發(fā)育生長。溫度。溫度是影響平菇生長發(fā)育的重要環(huán)境因子，對平菇孢子的萌發(fā)、菌絲的生長、子實體的形成以及平菇的質量都有很大影響。平菇孢子形成以12℃～20℃為好，孢子萌發(fā)以24℃～28℃為宜，高于30℃或低于20℃均影響發(fā)芽；菌絲在5℃～35℃均能生長，最適溫度為24℃～28℃；形成子實體的溫度范圍是7℃～28℃，以15℃～18℃最為適宜。平菇屬變溫結實性菇類，在一定溫度范圍內，晝夜溫度變化越大，子實體分化越快。所以，晝夜溫差大及人工變溫，可促使子實體分化。平菇屬的種類多，不同的種和品種對溫度的要求不同，人們通常以子實體的分化和發(fā)育期的溫度要求，把平菇屬的種類劃分為三型：低溫型：子實體分化最高溫度不超過22℃，最適宜溫度在13℃～17℃之間。中溫型：子實體分化最高溫度不超過28℃，最適宜的溫度范圍20℃～24℃如鳳尾菇、佛羅里達平菇、紫孢平菇。高溫型：子實體分化溫度高達30℃以上，最適宜溫度范圍是24℃～28℃。如鮑魚菇、紅平菇。水分與濕度。平菇耐濕力較強，野生平菇在多雨，陰涼或相當潮濕的環(huán)境下發(fā)生。在菌絲生長階段，要求培養(yǎng)料含水量在65%～70%，如果低于50%，菌絲生長緩慢，而含水量過高，料內空氣缺少，也會影響菌絲生長。當培養(yǎng)料過濕又遇高溫時，會變酸發(fā)臭，且易被雜菌污染。菌絲生長時期要求空氣相對濕度為70%～80%，在子實體發(fā)育時期，相對濕度要提高到85%～95%。在55%時生長緩慢，40%～45%時小菇干縮；高于95%，菌蓋易變色腐爛，也易感染雜菌，有時還會在菌蓋上發(fā)生大量的小菌蕾。若平菇采取覆土措施，還要注意調節(jié)覆土含水量。一般從地下30cm～60cm挖來的泥土，只要不是剛下過雨，土壤濕度是符合上述要求的。經(jīng)過曬干的泥土，分4～6次調足水分，要達到手捏扁時不碎，不粘手為宜?？諝?。平菇是好氣性真菌，菌絲和子實體生長都需要空氣。在正常情況下，空氣中氧的含量為21%(體積比)，%，當空氣中二氧化碳的濃度增高時，氧分壓就勢必降低，過高濃度的二氧化碳直接影響到平菇的呼吸活動，而有礙生長發(fā)育。平菇在菌絲生長階段，可耐較低的氧分壓，而在子實體發(fā)育階段，對氧氣的需要急劇增加，宜在通風良好的條件下培育，%，缺氧時不能形成子實體，即使形成，有時菌蓋上產(chǎn)生許多瘤狀突起。光照。平菇的菌絲體在黑暗中正常生長，不需要光線，有光線照射可使菌絲生長速度減慢，過早地形成原基，不利于提高產(chǎn)量。子實體分化發(fā)育需要一定的散射光，光線不足，原基數(shù)減少。已形成子實體的，其菌柄細長，菌蓋小而蒼白，畸形菇多，不會形成大菌蓋。但是直射光及光照過強也會妨礙子實體的生長發(fā)育。酸堿度。平菇對酸堿度的適應范圍較廣，pH值在3～10范圍內均能生長；但喜歡偏酸環(huán)境，～7時，菌絲體和子實體都能正常生長發(fā)育。～6，～7，～，而且粗壯。平菇生長發(fā)育過程中，由于代謝作用產(chǎn)生有機酸和醋酸、琥珀酸、草酸等，使培養(yǎng)料的pH值逐漸下降。此外，培養(yǎng)基在滅菌后pH值也會下降，所以在配制培養(yǎng)料時應調節(jié)pH值為7～8為好。為了使菌種穩(wěn)定生長在最適pH值內，在配制培養(yǎng)基時，%的磷酸氫二鉀(K2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)等緩沖物質，如果培養(yǎng)過程中產(chǎn)酸過多，可添加少許中和劑—碳酸鈣(CaCO3)，使培養(yǎng)基不致因pH值下降過多而影響平菇的生長，在大量生產(chǎn)中也常常用石膏或石灰水調節(jié)酸堿度。5212 栽培工藝與技術培養(yǎng)料。平菇是木腐菌，傳統(tǒng)栽培方法是用闊葉樹的段木作為培養(yǎng)料。由于木材資源越來越少，且段木栽培年產(chǎn)量不高，木材利用率低，所以，段木栽培法已逐漸被代料栽培所取代。目前，栽培平料制成培養(yǎng)料來代替段木。根據(jù)培養(yǎng)料預處理的方法不同，可分為以下三種：熟料栽培：培養(yǎng)料配菇可利用闊葉樹木屑、紙屑、棉籽殼、花生殼、落地廢棉、禾草秸桿、玉米芯、甘蔗渣等為主料，再添加適當?shù)妮o助材制后先經(jīng)過徹底滅菌，再按無菌操作法接種、培養(yǎng)，待菌絲長滿后進行栽培管理。此方法用量少，產(chǎn)量高，但投資大，生產(chǎn)成本較高。半熟料栽培：培養(yǎng)料接種之前，用巴斯德滅菌法低溫消毒，以殺死其中的大部分雜菌和害蟲，而后按一般方法接種，培養(yǎng)和栽培管理。此方法投資少，產(chǎn)量較穩(wěn)定，但用種量較大。生料栽培：培養(yǎng)料不經(jīng)過滅菌或消毒，%石灰水浸泡，甚至只用清水浸泡后，調節(jié)至所需要含水量，就進行栽培。此方法投資少，生產(chǎn)成本低，方法簡便，利于推廣，但用種量大，管理難度較大。 生產(chǎn)季節(jié)。平菇的制種和播種時間，因各地氣候不同、品種耐溫程度不同而有差異。以華北地區(qū)為例，利用自然氣溫生產(chǎn)平菇，一般中、低溫型品種在7月下旬至8月上、中旬制原種，8月中、下旬至9月上、中旬制生產(chǎn)種；中溫型品種在11～12月制原種，1～2月制生產(chǎn)種；高溫型品種在3～4月制原種，4～5月制生產(chǎn)種。播種可分為秋播、冬播和春播。秋播的播種期在8月中旬至10月上旬。8月上旬以前播種的，因日平均氣溫在25℃以上，雖然出菇較快，但在發(fā)菌期容易遭致雜菌污染。秋菇的最適播種期在8月下旬至9旬下旬，此時日平均氣溫已降至20℃以下，于雜菌生長不利，一般經(jīng)35～40天方可出菇，從事大批量商品菇生產(chǎn)最好在這段時間內播種。冬播在10月下旬至11月下旬播種。10月下旬播種的，約經(jīng)兩個月方可出菇，春節(jié)前后進入盛產(chǎn)期，有較好鮮菇市場；11月下旬播種的，需80～90天，至次年3月初氣溫回升時方可出菇。春播在2月以后播種，雖然氣溫較低，發(fā)菌慢，但很少有雜菌污染，至4月中、下旬出菇，遲至3月以后則不宜播種。栽培方法目前生產(chǎn)平菇的方式多種多樣。按培養(yǎng)料分，有段木栽培和代料栽培；按栽培方式分，有畦栽、床栽和箱栽；按培養(yǎng)場所分，有室內栽培、室外栽培等?，F(xiàn)主要介紹本項目中利用天然林地郁閉環(huán)境的栽培方法。本栽培投資少，方法簡單易行，管理方便，經(jīng)濟效益顯著。選擇林地內地勢平坦，排水良好的地塊作為栽培溝。畦子要求座北朝南，東西方向為好。畦長5cm～10cm，～1m。畦內挖的土打成墻，，兩頭做成斜坡并留好通風口。(包括排水溝)，便于管理和排水。畦子做好后，用濃石灰水粉刷畦子四壁和畦底，要粉刷嚴密，防止消毒不徹底，引起雜菌污染。亦可做成南北向的平畦，即畦子的墻同高。播種前一天，畦內適量灌水，不要讓水沖刷畦內的石灰層。播種的方式可采取層播或穴播。層播的方法是放料前在畦底先撒一層菌種，占整畦用種量的10%，將用料量的一半放入畦內，撒上一層菌種，占整畦用種量的40%，再把另50%的料放入畦內，撒上余下的50%菌種，四周多放些，中間少放點，然后用手搔動一下料面，讓菌種和料充分接觸，適當壓實，整個畦內培養(yǎng)料呈鏊面狀。然后覆蓋報紙、地膜，噴灑一遍500～800倍的多菌靈水溶液，支上支架，覆蓋薄膜和草苫子即可。每平方米用干料20公斤，菌種用量占10%～15%。穴播的方法是把料全部傾入畦內，打成鏊面狀，適當壓實，然后用直徑3cm～5cm的木棍，一頭削成圓錐體，在料面上打穴。穴距3cm～4cm，深10cm，呈梅花形。播種時菌種隨掰隨用，每穴放入一塊如拇指大小的菌種塊，壓入穴內。放完菌種后覆蓋報紙、地膜，噴灑一遍500～800倍白勺多菌靈水溶液，支好支架，覆蓋薄膜和草苫子即成。另外，還可以采取層播和穴播結合的混播方法。播種后如果溫度適宜，一般30天就能發(fā)滿菌絲。播種2～3天后，料溫會迅速上升，每天要定時測量溫度，超過24℃時，應打開通風窗或揭開薄膜降低畦內溫度。低于10℃時，可揭開草苫子讓陽光照射薄膜，提高畦內溫度。切忌料溫超過30℃，中午溫度高時可打開通風口以利通風換氣和散熱。晴天，畦上的草苫子一定要壓結實，防止刮翻，增高畦內溫度，蒸死菌絲；雨天要及時卷起草苫子，以防因苫子吸水過多壓折支架。播種7～10天后，可以揭去地膜，以利通風換氣。每天早晨和傍晚要揭開草苫子和薄膜，噴一遍1000倍的多菌靈水溶液，多往四周和報紙上噴灑。同時，檢查有無紅、綠、黃、黑等雜菌感染。發(fā)現(xiàn)感染應及時用生石灰粉蓋住或挖掉焚燒、深埋，防止擴散。待料面有黃水吐出，說明已達到生理成熟，就應讓其出菇，此時應加大溫差，加強散光照，促使菌絲體轉化為子實體。料面上一旦發(fā)現(xiàn)有菇蕾形成，不需噴水。形成菌蓋后，每天結合降溫，噴水2～3次，噴水時要往墻四壁及空