bd流式基礎(chǔ)知識-qj(編輯修改稿)
2025-05-23 08:52 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 Laser beam 1. 散射光信號 自發(fā)熒光信號 特異性熒光信號 熒光信號 （ Fluoresent light ） 雙色熒光散點(diǎn)圖 熒光強(qiáng)度 （ Fluoresence intensity） ? 熒光信號的強(qiáng)度代表被測細(xì)胞膜表面抗原強(qiáng)度或細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)濃度 。 熒光信號 （ Fluoresent light ） 熒光信號收集方向與激光束相垂直（ 90176。 ） FreqFluorescence FALS Sensor Fluorescence detector ( FL1,FL2,FL3,FL4) 接收光學(xué)系統(tǒng) 接收光學(xué)系統(tǒng)： 接收光信號 ,并將光信號引導(dǎo)到對應(yīng)的接收器中 光學(xué)濾片 460 500 540 460 500 540 460 500 540 SP 500 LP 500 BP500/50 Longpass Shortpass Bandpass ( 500+/ 25 ) FACSCalibur光路圖 每個(gè)探測器前往往為 BP，所以每個(gè)探測器只能接收特定波長范圍的光信號 FL1: 515nm 545nm 光學(xué)探測器 光電二極管 FSC Photodiodes 光電倍增管 SSC amp。 Fluoresence Photomultiplier tubes (PMTs) 光電轉(zhuǎn)換器： 將光信號轉(zhuǎn)換為電信號 流式細(xì)胞儀的構(gòu)造 3. 光信號轉(zhuǎn)換成電信號，數(shù)字化處理 1. 細(xì)胞樣本成單列依次通過光檢測區(qū) 2. 激發(fā)并收集各種光信號 液流系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng) 電子系統(tǒng) 電子系統(tǒng) ? 將光信號轉(zhuǎn)化為電信號（模擬信號） ? 將模擬信號轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號 ? 計(jì)算每個(gè)脈沖峰 ? 和計(jì)算機(jī)連接以傳出數(shù)據(jù) 將光信號成比例的轉(zhuǎn)換成電信號，并進(jìn)行數(shù)字化處理后傳入計(jì)算機(jī) 光信號轉(zhuǎn)換為電信號 Linear Amplification Log Amplification or Voltage Time PMT電壓 電信號 電壓脈沖的產(chǎn)生 — 模擬信號 Laser Laser Laser Time Voltage Time Voltage Time Voltage 1 當(dāng)微粒通過激光束時(shí)，脈沖開始。此時(shí)，激光強(qiáng)度和信號強(qiáng)度都很低。 2 當(dāng)微粒達(dá)到激光束中間時(shí)，脈沖達(dá)到最大強(qiáng)度或者高度，此時(shí)激光束和信號強(qiáng)度都最高。此時(shí)測定峰值強(qiáng)度或者脈沖高度。 3 當(dāng)微粒離開激光束時(shí)，脈沖減弱。 計(jì)算一個(gè)電壓脈沖峰 Time Volts Pulse Area Pulse Height Pulse Width 0 — 面積是對熒光光通量進(jìn)行積分測量的結(jié)果 — 寬度 =面積
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