微生物實(shí)驗(yàn)思考題(南京工業(yè)大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院)(編輯修改稿)
2025-05-01 23:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 培養(yǎng) 制片 觀察 假菌絲形態(tài)接種與培養(yǎng) 制片 酵母細(xì)胞的死活染色鑒別涂片、染色 觀察三、思考題 顯微鏡下觀察的酵母菌的個(gè)體形態(tài)特征與細(xì)菌個(gè)體形態(tài)特征有何不同?答：（1）細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)短的原核生物，一般直徑約為：，長(zhǎng)度約為：~5μm。顯微鏡下觀察的細(xì)菌個(gè)體形態(tài)基本上是球狀、桿狀、螺旋狀三大類，僅少數(shù)為其他形狀，如絲狀、三角形、方形和圓盤形等；（2）酵母菌的細(xì)胞直徑約為細(xì)菌的10倍，是典型的真核生物，在顯微鏡下觀察的酵母菌個(gè)體形態(tài)通常是有球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀和香腸狀等。 美藍(lán)色染色液染色時(shí)間對(duì)酵母菌死活細(xì)胞數(shù)量有何影響？試對(duì)所得的結(jié)果進(jìn)行分析和討論。答：美藍(lán)染色液染色時(shí)間越長(zhǎng)，酵母菌死細(xì)胞數(shù)量越多，而活細(xì)胞數(shù)量越少。實(shí)驗(yàn)六 霉菌形態(tài)的觀察 試分析Subouraud 瓊脂培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)？答：①pH偏酸性，適合霉菌生長(zhǎng)； ②氯霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)； 載片培養(yǎng)法中“U”形玻璃棒和培養(yǎng)皿底部的濾紙上加入適量滅菌水的目的是什么？除了加滅菌水之外，還可以加入什么溶液？答：①目的是保證培養(yǎng)皿內(nèi)適宜溫濕度； ②還可通過無菌操作在培養(yǎng)小室中園濾紙片上加3至5ml滅菌的20%的甘油。 載片培養(yǎng)還適宜哪些微生物進(jìn)行形態(tài)觀察？答：載片培養(yǎng)還適宜培養(yǎng)放線菌、假絲酵母等分枝絲狀體進(jìn)行形態(tài)觀察。 為什么載片培養(yǎng)所用的材料均要滅菌？答：載片培養(yǎng)所用的材料如不滅菌，則極易引入殺菌，當(dāng)接種到培養(yǎng)基上時(shí)，很有可能會(huì)影響霉菌的生長(zhǎng)，而且也會(huì)影響到后期的顯微觀察。實(shí)驗(yàn)七 微生物測(cè)微技術(shù)一、實(shí)驗(yàn)原理顯微測(cè)微尺，包括目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺兩個(gè)相互配合使用的部件。 鏡臺(tái)測(cè)微尺總長(zhǎng)1mm，精確分為10個(gè)大格，每個(gè)大格又分為10個(gè)小格，共100 個(gè)小格。 目鏡測(cè)微尺分50小格和100小格兩種。二、實(shí)驗(yàn)方法和步驟目鏡測(cè)微尺放置 目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定 酵母菌大小的測(cè)定 將鏡臺(tái)測(cè)微尺用擦鏡紙擦拭干凈，放進(jìn)盒子里保存，同時(shí)正確清理和維護(hù)顯微鏡。注：放置鏡臺(tái)測(cè)微尺時(shí)有刻度的一面朝上；目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行；使兩尺左邊某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合后找出右邊另外相重合的線，分別數(shù)出兩重和線。目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度（um）=重合線間鏡臺(tái)測(cè)微尺格數(shù)*10/重合線間目鏡測(cè)微尺格數(shù)三、思考題為什么使用不同放大倍數(shù)的目鏡或者物鏡時(shí)，必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺重新對(duì)目鏡測(cè)微尺進(jìn)行校正？答：因?yàn)槟跨R測(cè)微尺在不同放大倍數(shù)的目鏡和物鏡下的大小是不一樣的，也就是比例不同，所以要重新校正。在不改變目鏡和目鏡測(cè)微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測(cè)定同一菌體大小時(shí)，其測(cè)定結(jié)果是否相同？為什么？答：相同。因?yàn)橥痪w的大小是一定的，不同放大倍數(shù)的物鏡不會(huì)改變菌體的實(shí)際大小，但物鏡的放大倍數(shù)越高，目鏡測(cè)微尺的精確度越高，測(cè)量月準(zhǔn)確。測(cè)量菌體大小時(shí)對(duì)菌齡有無要求？為什么？答：有要求。因?yàn)榫诓煌L(zhǎng)時(shí)期細(xì)胞大小有時(shí)會(huì)有較大變化，若需自己制樣進(jìn)行細(xì)菌大小測(cè)定時(shí)，應(yīng)注意選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體細(xì)胞材料。實(shí)驗(yàn)八 微生物技術(shù)技術(shù)血球計(jì)數(shù)板法一、實(shí)驗(yàn)原理 測(cè)定細(xì)胞數(shù)目的方法有直接計(jì)數(shù)法（如血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)）和間接計(jì)數(shù)法（如平板菌落計(jì)數(shù)法） 顯微鏡計(jì)數(shù)的優(yōu)點(diǎn)是直觀、快速、操作簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是所測(cè)得的結(jié)果通常是死菌體和活菌體的總和，且難以對(duì)活動(dòng)性強(qiáng)的活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。 其中血細(xì)胞計(jì)數(shù)板較厚，不能使用油鏡，常用于個(gè)體相對(duì)較大的酵母細(xì)胞，霉菌孢子等計(jì)數(shù)。二、實(shí)驗(yàn)方法和步驟 鏡檢計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室（在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢，若有污物則需清洗） 加樣品(菌懸液需搖勻）
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