微生物實(shí)驗(yàn)思考題(南京工業(yè)大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院)-在線瀏覽
2025-05-22 23:24本頁(yè)面
【正文】 生變化甚至破裂。（2）當(dāng)細(xì)胞處于酸性條件下（如細(xì)菌分解糖類(lèi)產(chǎn)酸）所帶正電荷增加時(shí)，可采用酸性染料染色。通過(guò)革蘭氏染色法可將細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）和革蘭氏陰性菌(G)。 ①結(jié)晶紫初染和碘液媒染:在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的化合物。 肽聚網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類(lèi)脂 細(xì)胞壁較薄 結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出，細(xì) G 胞壁退成無(wú)色 肽聚網(wǎng)層薄和交聯(lián)差，外膜層類(lèi)脂含量高③番紅染色：G細(xì)菌呈現(xiàn)紅色，而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色。用滅菌的接種環(huán)挑取少許枯草芽孢桿菌與右邊的水滴充分混合，將左、右方的菌液延伸與玻片中央，使大腸桿菌和枯草芽孢桿菌在玻片中間區(qū)域相互混合成含有兩種菌的混合區(qū)。注意用手指觸摸載玻片反面為不燙為宜。 染色：滴加結(jié)晶紫染色液于菌膜部位，覆蓋菌膜，染色1~。注意勿使水流直接沖洗菌膜部位。 水洗：同上 脫色：斜置玻片，自標(biāo)本的上端緩慢滴加95%乙醇脫色，直到留下的酒精無(wú)明顯的紫色為止。 水洗：同上 復(fù)染：滴加番紅染色液，染色1min.1 水洗并用吸水紙自載玻片邊緣輕輕吸去多余水分。三、思考題 什么是鑒別染色？有何優(yōu)點(diǎn)？答：（1）鑒別染色是指至少使用兩種不同顏色的染色劑進(jìn)行染色。 媒染：利用碘液作為媒染劑，碘會(huì)與結(jié)晶紫形成碘結(jié)晶紫復(fù)合物，增強(qiáng)染料在菌體中 的滯留能力 脫色：用95%乙醇作為脫色劑，根據(jù)G+和G細(xì)胞壁機(jī)構(gòu)和化學(xué)組成的差異，G+的肽 聚網(wǎng)孔會(huì)收縮而使碘結(jié)晶紫復(fù)合物滯留在細(xì)胞壁，而G中原先滯留的碘結(jié)晶紫 復(fù)合物容易被洗脫下來(lái)，菌體變無(wú)色。 革蘭氏染色反應(yīng)的關(guān)鍵步驟是什么？為什么？答：革蘭氏染色反應(yīng)的關(guān)鍵步驟是脫色；①若脫色不夠的話，則大腸桿菌中的碘結(jié)晶紫復(fù)合物不能被洗脫下來(lái)，或無(wú)法完全被洗脫下來(lái)，那么之后用番紅復(fù)染時(shí)不會(huì)變成紅色，而是呈紫色，造成大腸桿菌的假陽(yáng)性。實(shí)驗(yàn)五 酵母菌形態(tài)的觀察 實(shí)驗(yàn)原理（略） 實(shí)驗(yàn)步驟 酵母?jìng)€(gè)體形態(tài)與出芽繁殖接種與培養(yǎng) 制片 觀察 假菌絲形態(tài)接種與培養(yǎng) 制片 酵母細(xì)胞的死活染色鑒別涂片、染色 觀察三、思考題 顯微鏡下觀察的酵母菌的個(gè)體形態(tài)特征與細(xì)菌個(gè)體形態(tài)特征有何不同?答：（1）細(xì)菌是一類(lèi)細(xì)胞細(xì)短的原核生物，一般直徑約為：，長(zhǎng)度約為：~5μm。 美藍(lán)色染色液染色時(shí)間對(duì)酵母菌死活細(xì)胞數(shù)量有何影響？試對(duì)所得的結(jié)果進(jìn)行分析和討論。實(shí)驗(yàn)六 霉菌形態(tài)的觀察 試分析Subouraud 瓊脂培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)？答：①pH偏酸性，適合霉菌生長(zhǎng)； ②氯霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)； 載片培養(yǎng)法中“U”形玻璃棒和培養(yǎng)皿底部的濾紙上加入適量滅菌水的目的是什么？除了加滅菌水之外，還可以加入什么溶液？答：①目的是保證培養(yǎng)皿內(nèi)適宜溫濕度； ②還可通過(guò)無(wú)菌操作在培養(yǎng)小室中園濾紙片上加3至5ml滅菌的20%的甘油。 為什么載片培養(yǎng)所用的材料均要滅菌？答：載片培養(yǎng)所用的材料如不滅菌，則極易引入殺菌，當(dāng)接種到培養(yǎng)基上時(shí)，很有可能會(huì)影響霉菌的生長(zhǎng)，而且也會(huì)影響到后期的顯微觀察。 鏡臺(tái)測(cè)微尺總長(zhǎng)1mm，精確分為10個(gè)大格，每個(gè)大格又分為10個(gè)小
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