碳酸飲料培訓(xùn)內(nèi)容(編輯修改稿)
2025-04-29 00:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 應(yīng)用2%鹽酸溶液或清潔液浸泡數(shù)小時，再用自來水沖洗干凈，晾干備用。 培養(yǎng)皿﹑吸管，用紙包好后干熱滅菌：160℃ 2～3小時?！。洎p培養(yǎng)基：培養(yǎng)基一般用市售現(xiàn)成培養(yǎng)基，在滅菌時應(yīng)注意滅菌時間不宜過長，因高壓加熱時間過長，能使培養(yǎng)基變質(zhì)，瓊脂高壓滅菌時間長會引起沉淀，含糖類的培養(yǎng)基高壓時間過長，可能被破壞。e、 實際操作中應(yīng)注意的問題ａ）﹑%生理鹽水而不是蒸餾水。ｂ）﹑菌落計數(shù)是計數(shù)培養(yǎng)皿中每一個肉眼可見的菌落，不論菌落大小，只要肉眼能夠看到就應(yīng)該計數(shù)。 菌落總數(shù)的測定(一) 定義：菌落總數(shù)主要作為判定食品污染程度的標志，是指食品經(jīng)過檢樣處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1ｍｌ檢樣中所含菌落的總數(shù)。按標準規(guī)定培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群在營養(yǎng)瓊脂上生長發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。(二) 設(shè)備和材料1. 冰箱：0～4℃2. 恒溫培養(yǎng)箱：36℃177。1℃3. 恒溫水浴鍋：46℃177。1℃4. 加架盤藥物天平：0g～500g，5. 滅菌吸管：1ml 10ml6. 滅菌錐瓶500ml7. 滅菌培養(yǎng)皿：直徑90mm8. 滅菌試管：16mm160mm9. 滅菌乳缽10. 滅菌刀、剪 子、鑷子等(三) 培養(yǎng)基和試劑 1. 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：市售2. %滅菌生理鹽水3. 75%乙醇(四) 檢驗程序菌落總數(shù)的檢驗程序見下圖： 檢樣 ↓做成幾個適當倍數(shù)的稀釋液 ↓選擇2個～3個適當稀釋度各取1ml分別加入滅菌生理鹽水 ↓每皿內(nèi)加入適量營養(yǎng)瓊脂36177。1℃ ↓ 48177。2h 菌落計數(shù) ↓ 報告(五) 操作步聚，充分混勻的水樣注入滅菌平皿中，另取1ml注入另一滅菌平皿中作平行接種。 另取1ml滅菌吸管，按上述操作方法，做10倍遞增稀釋，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml吸管。1. 4根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或?qū)吮疚廴厩闆r的估計，選擇2個～3個適宜稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌培養(yǎng)皿內(nèi)，每個稀釋度做兩個培養(yǎng)皿。1. 5稀釋液移入培養(yǎng)皿后，應(yīng)及時將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放 置于46℃177。1℃水浴保溫)注入培養(yǎng)皿約15ml，并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使混合均勻。同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液滅菌培養(yǎng)甲內(nèi)作空白試驗。1. 6待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置于36177。1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48177。2h。2. 菌落計數(shù)方法做平板菌落計數(shù)時，可用肉眼觀查，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。3. 菌落計數(shù)的報告 選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標準，一個稀釋度使用兩個平板，應(yīng)采用兩個平板平均數(shù)，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平板內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個菌落；如果有不同來源的幾條鏈，則 將每條鏈作為一個菌落計?！?00之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之。(見表1中例1) 若有兩個稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30～300之間，則視兩者之比如何來決定，若其比值小于或等于2，應(yīng)報告其平均數(shù)；若大于2則報告其中較小的數(shù)字(見表1中例2及例3) 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。(見表1中例4) 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)無小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例5) 若所有稀釋度無無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例6)～300之間，其中一部分大于300或小于30時，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例7)4. 菌落數(shù)的報告菌落數(shù)在100以內(nèi)時，按其實有數(shù)報告，大于100時，采用兩位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)字后在的數(shù)值，以四舍五入方法計算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來表示(見表1)例次稀釋液及菌落數(shù)兩稀釋液之比菌落總數(shù)cfu/g報告方式(cfu/g)1011021031多不可計16420________164001043多不可計29546377501044多不可計27160271001045多不可計多不可計31331300105627115_____2701027000_____110108多不可計30512______30500104 菌落總數(shù)簡便作法，充分混勻的水樣注入滅菌平皿中，另取1ml注入另一滅菌平皿中作平行接種。 將已滅菌并冷卻至46℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿，每皿約15mL，并立即旋搖平皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻，同時另將營養(yǎng)培養(yǎng)基傾入滅菌的空平皿內(nèi)作對照。 作平皿菌落計數(shù)時，可用肉眼直接觀察 ，必要時用放大鏡檢查以防遺漏。在記下各平皿菌落數(shù)后，求出同一水樣兩平皿的平均菌落數(shù)，在求平均數(shù)時，若其中一個平皿有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平皿作為該樣品的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，則可將此半個平皿計數(shù)后乘以2，以代表全皿菌落數(shù)，同一水樣兩平皿的平均菌落數(shù)，即為該水樣1ml中的細菌菌落總數(shù)。以cfu /ml報告之數(shù)。 注：cfu即菌落形成單位(colony Forming Units)，翻轉(zhuǎn)平皿，使皿底在上，置于36177。1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h取出，計數(shù)每個平皿內(nèi)的菌落數(shù)目。大腸菌群的檢測(一)定
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