體內(nèi)藥物分析ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-15 09:01 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 （使用尖錐形試管） 殘渣復(fù)溶于小體積 通入氮?dú)猓ǖ祪x）；減壓揮干溶劑 液萃取法 （ LLE） 對有機(jī)溶劑的要求 :① 對藥物分子 未電離的可溶、電離的不溶 ②沸點(diǎn)低易揮發(fā)③與水不相溶④無毒、不乳化。⑤較高穩(wěn)定性、惰性⑥不影響紫外檢測 常用：乙醚、三氯甲烷、 異丙醇 多數(shù)藥物：弱極性、親脂性強(qiáng)。多為堿性 內(nèi)源性雜質(zhì)：強(qiáng)極性、水溶性強(qiáng)。酸性 根據(jù)溶劑、藥物、內(nèi)源性雜質(zhì)的極性、酸堿性，選擇合適的溶劑 分離雜質(zhì)、純化樣品。 注意的問題 ① pH值影響：多數(shù)藥物是親脂性的堿性物質(zhì)。內(nèi)源性雜質(zhì)多為酸性，故在堿性條件（ pH高于 pKa1～ 2 pH單位 )下乙醚提取 ；酸性藥物 則在 酸性條件 （ pH低于pKa1～ 2 pH單位 )下提取，可使 90%的藥物以非電離形式存在。但一般多在堿性條件下提取，減少內(nèi)源性物質(zhì)干擾。 ②有機(jī)相與水相樣品溶劑比（ 1:1~2） ③一般只提一次。若雜質(zhì)不易除去，可將有機(jī)相再用堿水（酸性藥物）或酸水（堿性藥物）反提。再用有機(jī)溶劑提取。 對堿性中不穩(wěn)定的藥物或中性藥物，在中性 pH處用三氯甲烷和異丙醇提取。 ①選擇性和低廉的運(yùn)行成本（有機(jī)溶劑選擇性高，本法的選擇性亦高） ②可對樣品凈化和濃集（能與多數(shù) 內(nèi)源性雜質(zhì)分離） ③易乳化 LLE法的特點(diǎn)： 2. 固相萃取 （ SPE） —— 規(guī)?？s小的柱色譜 將具有吸附、分配、交換性質(zhì)的擔(dān)體作為萃取劑填入小柱制成 ,體內(nèi)樣品處理。 微型柱的使用：溶劑淋洗 生物樣品上柱 （藥物及內(nèi)源性物質(zhì)同時被保留到固定相上） 洗脫雜質(zhì) 洗脫藥物 （ 1）固相萃取法的原理 常用于 SPE填充柱填料大致分為兩類 ： 第一類 為親脂型：大型吸附樹脂、親脂性鍵合硅膠 第二類 為親水性型：硅膠、 硅藻土、棉纖維 。 第三類 為離子交換型 例如： Bond Elut微型柱 —— 極性、非極性硅膠 Seppak系列 微型柱 —— C18等填料 微型柱使用的一般步驟： 步驟１： 用有機(jī)溶劑如甲醇，預(yù)先濕潤微型柱，使增加填料與待測物相互作用的表面積，并可除去可能干擾分析的填料殘留物。 步驟２： 用色譜純的水或合適的溶劑沖洗，除去過多的甲醇，并為樣品提供表面積。 步驟３： 進(jìn)樣，通過微型柱廢液棄去。 步驟４： 用水或合適溶劑洗柱，選擇性地除去將會干擾后面色譜分析的內(nèi)源性雜質(zhì) 步驟 5:用合適的溶劑洗脫樣品，收集，洗脫液用于后面的分析測定或進(jìn)一步研究。 SPE優(yōu)點(diǎn)： （與 LLE相比） 引入雜質(zhì)少；消除乳化現(xiàn)象；提取效率高；樣品用量小 (50 ～ 100 μl)；處理樣品快速；適宜處理揮發(fā)性及不穩(wěn)定性的藥品；溶劑安全。 —— 以多孔半透膜（超濾膜）為分離介質(zhì)的一種膜分離技術(shù)。 血清中的游離藥物測定可采用分子量截留值在 5萬左右的超濾膜，以加壓過濾或高速離心法將游離藥物和血漿蛋白分離。 簡便快捷，結(jié)果穩(wěn)定可靠，已成為首選方法。 優(yōu)點(diǎn)：不引入化學(xué)試劑、無相態(tài)變化、對待測藥物破壞小。
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