病原性真菌檢驗臨床微生物學(xué)第三軍醫(yī)大學(xué)(編輯修改稿)
2025-02-12 19:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 膜通道 A1肽鏈進入細胞 ATP → cAMP↑ 腸粘膜上皮細胞分泌亢進 腸液大量分泌 大量體液和電解質(zhì)進入腸腔而發(fā)生劇烈吐瀉 大量脫水和失鹽 發(fā)生代謝性酸中毒，血循環(huán)衰竭，甚至休克或死亡 激活腺苷酸環(huán)化酶系統(tǒng) 2．所致疾病 ? 引起烈性腸道傳染病的霍亂 ， 為我國的法定傳染病 （ 甲類 ） ， 表現(xiàn)為 劇烈的上吐下瀉 ， 導(dǎo)致嚴重的脫水 、 酸中毒 、 痙攣 、 尿閉 、休克和死亡 。 ? 人類在自然情況下是霍亂弧菌的唯一易感者，主要通過污染的水源或飲食物經(jīng)口傳染（ 糞口途徑 ）?；颊?出現(xiàn)上吐下瀉，瀉出物呈 “ 米泔水樣 ” ，并含大量弧菌，此為本病典型的特征 。 3．免疫性 ? 患過霍亂的人可 獲得 牢固的免疫力 ，再感染者少見。 ? 病后小腸內(nèi)可 出現(xiàn) 分泌型 lgA。 三、微生物學(xué)診斷 ? 由于霍亂流行迅速 ， 且在流行期間發(fā)病率及死亡率均高 ， 危害極大 ， 因此早期迅速和正確的診斷 ， 對治療和預(yù)防本病的蔓延有重大意義 。 （一）標本采集： 標本以糞便為主 ， ? 一般 米泔水樣便 采取 1－ 3ml，成形便采取蠶豆大小。 ? 在某些情況下，亦可采取 嘔吐物和尸體腸內(nèi)容物 作檢材。 檢驗程序 （三）檢驗方法及鑒定 1．直接鏡檢： 1） 動力觀察： 采取病人 “ 米泔水樣 ” 大便或嘔吐物制成懸滴片 ， 觀察細菌動力 ， 可見 流星或穿梭狀動力的細菌 。 2） 制動試驗： ? 標本 ， 霍亂多價診斷血清 （ 效價 1： 64） ， 用暗視野鏡觀察 ， 3分鐘內(nèi) 運動被抑制 的即為陽性 ， ? 此法優(yōu)點是 快速而特異操作簡便 ， 但必須有數(shù)量較多的弧菌才檢出 。 3） 涂片染色 ： 革蘭氏染色陰性 并成魚群狀排列的弧菌 。 2．快速診斷： 1） 免疫熒光菌球法： 將標本接種于含有霍亂弧菌 熒光抗體 的堿性蛋白胨水中 ， 經(jīng) 37℃ 4～ 6h， 如有霍亂弧菌 ， 在熒光顯微鏡下 可見發(fā)熒光的菌球 。 本法適用于做 大量標本的初篩 。 2） SPA協(xié)同凝集試驗： 以霍亂弧菌 IgG型抗體 與SPA陽性葡萄球菌結(jié)合作為試劑，與米泔水樣便或增菌液作玻片凝集， 立即出現(xiàn)明顯凝集者（＋＋＋）為陽性。 3．細菌分離培養(yǎng) 1） 直接分離培養(yǎng)： ? 分離用的培養(yǎng)基有強、弱 2種選擇培養(yǎng)基。 ? 弱選擇培養(yǎng)基 ：堿性瓊脂和堿性膽鹽瓊脂。 ? 強選擇培養(yǎng)基： 常用的有慶大霉素瓊脂、 4號瓊脂和TCBS瓊脂等。 ? 現(xiàn)多采用堿性蛋白胨水增菌，再用強選擇培養(yǎng)基進行分離。 4． 鑒定： 根據(jù)霍亂弧菌在各種選擇培養(yǎng)基上的特點 ， 挑選可疑菌落進行鑒定 。 鑒定以血清學(xué) （ 玻片凝集 ） 為主 ，結(jié)合形態(tài)學(xué) 、 生化反應(yīng)作出判斷 。 1） 玻片凝集試驗： 從分離培養(yǎng)基上挑取可疑菌落于霍亂弧菌 多價診斷血清 作玻片凝集試驗 。 診斷血清應(yīng)稀釋成 1:321:64的效價使用 ， 立即出現(xiàn)凝集者為陽性 ，同時設(shè)生理鹽水和陽性細菌株對照 。 2） 形態(tài)學(xué)檢查： 取純培養(yǎng)物涂片革蘭氏染色 ， 觀察菌體形態(tài)及染色性 。 用懸滴法或半固體穿刺法 檢測動力 。 3） 生化反應(yīng)： 霍亂弧菌氧化酶試驗 、 靛基質(zhì)試驗 、粘絲試驗和霍亂紅試驗均陽性
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