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正文內(nèi)容

生物醫(yī)學(xué)研究的基本(編輯修改稿)

2025-02-12 15:10 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 、貓、猴灌胃時(shí),先將動(dòng)物固定,再將特制的擴(kuò)口器放入動(dòng)物口中,擴(kuò)口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定,如狗的擴(kuò)口器可用木料制成長(zhǎng)方形,長(zhǎng)約 1015cm,粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴,約 23cm,中間鉆一小孔,孔的直徑為 。 灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后,并用繩將它固定于嘴部,將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管(如導(dǎo)尿管),經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入,沿咽后壁而進(jìn)入食道,此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道,可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中,如不發(fā)生氣泡,此導(dǎo)管即是在食道中,未誤入氣管,即可將藥液灌入。 狗灌胃方法 兔灌胃時(shí),將兔固定在木制固定盒內(nèi)左手虎口卡住并固定好兔嘴,右手取 14號(hào)細(xì)導(dǎo)尿管,由右側(cè)唇裂避開(kāi)門齒,將導(dǎo)管慢慢插入,如插管順利,動(dòng)物不掙扎,插入約 15cm時(shí),即表示插入胃內(nèi),將藥液注入。 動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積家兔為 80150ml,狗為 200500ml。 注入直腸給藥:用導(dǎo)尿管由動(dòng)物肛門插入直腸給藥。在導(dǎo)尿管頭上涂上凡士林,由助手使兔蹲臥于桌上,以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢,以左手拉住兔尾,露出肛門,并用右手輕握后肢,實(shí)驗(yàn)者將橡皮管插入家兔肛門內(nèi),深度約 7~ 9cm,如為雌性動(dòng)物,注意勿誤插入陰道(肛門緊接尾根)。橡皮管插好后,將注射器與橡皮管套緊,即可灌注藥液。 (三)其它途徑給藥 1.呼吸道給藥:呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態(tài)存在藥物或毒氣,均需要通過(guò)動(dòng)物呼吸道給藥。如一般實(shí)驗(yàn)時(shí)給動(dòng)物作乙醚吸入麻醉;給動(dòng)物吸一定量的氨氣、二氧化碳等觀察呼吸、循環(huán)等變化;給動(dòng)物定期吸入一定量的 SO鋸末煙霧等可造成慢性氣管炎動(dòng)物模型等;特別在毒物學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用更為廣泛。 2.涂布法給藥: 為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)涂布皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用脊柱兩側(cè)的背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。 大、小鼠可采用浸尾方式經(jīng)尾皮給藥。 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最大給藥量和使用針頭規(guī)格 動(dòng)物名稱 項(xiàng)目 灌胃 皮下注射 肌肉注射 腹腔注射 靜脈注射 小白鼠 最大給藥量 使用針頭 1ml 9(鈍頭) 5(1/2) 5(1/2) 1ml 5(1/2) 4 大白鼠 最大給藥量 使用針頭 1ml 靜脈切開(kāi)針 1ml 6 6 2ml 6 4ml 5 豚鼠 最大給藥量 使用針頭 3ml 靜脈切開(kāi)針 1ml 6(1/2) 6(1/2) 4ml 7 5ml 5 兔 最大給藥量 使用針頭 20ml 10號(hào) 導(dǎo)尿管 2ml 6(1/2) 2ml 6(1/2) 5ml 7 10ml 6 貓 最大給藥量 使用針頭 20ml 10號(hào) 導(dǎo)尿管 20ml 7 2ml 7 5ml 7 10ml 6 蛙 淋巴囊注射 最大注射量 1ml/只 五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉 在一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn),特別是手術(shù)等實(shí)驗(yàn),為減少動(dòng)物的掙扎和保持其安靜,并便于操作,常對(duì)動(dòng)物采用必要的麻醉。適當(dāng)?shù)穆樽韺?duì)保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著十分重要的作用。 由于實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?dòng)物種屬間的差異、健康狀況不同等情況,所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。 (一 )常用的麻醉劑 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為全身性麻醉劑和局部麻醉劑。 1.全身性麻醉劑: ①揮發(fā)性麻醉劑,包括乙醚、氯仿等。乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物,其麻醉量和致死量差距大,麻醉安全度亦大,動(dòng)物麻醉深度容易掌握,而且麻后蘇醒較快。其缺點(diǎn)是對(duì)局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多,再通過(guò)神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動(dòng),并且容易引起窒息。 ② 戊巴比妥鈉:為中效巴比妥類藥物。是最常用的麻醉劑。一般作用時(shí)間可維持 2— 4 h。 ③其它的非揮發(fā)性麻醉劑,種類較多,包括苯巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物,氨基甲酸乙脂、氯胺酮和水合氯醛等。 2.局部麻醉劑:常用的有普魯卡因(奴佛卡因)、的卡因、和利多卡因。 (二)動(dòng)物的麻醉方法 1.全身麻醉 ( 1)吸入法:用一塊圓玻璃板和一個(gè)鐘罩或一個(gè)密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器,多選用乙醚作麻藥。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球,將乙醚倒在其中,迅速轉(zhuǎn)入鐘罩或箱內(nèi),讓其揮發(fā),然后把待麻醉動(dòng)物投入,約隔 46分鐘即可麻醉。 麻醉后應(yīng)立即取出,并準(zhǔn)備一個(gè)蘸有乙醚的棉球小燒杯,在動(dòng)物麻醉變淺時(shí)給套在鼻上使其補(bǔ)吸麻藥。本法最適于大、小鼠的短期操作性實(shí)驗(yàn)的麻醉,當(dāng)然也可用于較大的動(dòng)物,只是要求有麻醉口罩或較大的玻璃箱罷了。由于乙醚燃點(diǎn)很低,遇火極易燃燒,所以在使用時(shí),一定要遠(yuǎn)離火源。 ( 2)腹腔和靜脈給藥麻醉法 非揮發(fā)性麻醉劑可用作腹腔和靜脈注射麻醉,操作簡(jiǎn)便,是常采用的方法。腹腔給藥麻醉多用于大、小鼠和豚鼠,較大的動(dòng)物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長(zhǎng)短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時(shí),一定控制藥物的濃度和注射量。 常用麻醉劑的用法及劑量 麻醉劑 動(dòng)物 給藥方法 劑 量( mg/kg) 常用濃度% 維 持 時(shí) 間 戊巴比妥納 狗、兔 靜脈 30 3 24小時(shí)中途加上1/5量,可維持 1小時(shí)以上,麻醉力強(qiáng),易抑制呼吸。 腹腔 4050 3 大、小鼠、豚鼠 腹腔 4050 2 硫噴妥納 狗、兔 靜脈 1520 2 1530分鐘,麻醉力強(qiáng),宜緩慢注射。 大白鼠 腹腔 40 1 小白鼠 腹腔 1520 1 氯 醛 糖 兔 靜脈 80100 2 34小時(shí),誘導(dǎo)期不明顯 大白鼠 腹腔 50 2 烏 拉 坦 兔 靜脈 7501000 30 24小時(shí),毒性小,主要適用小動(dòng)物的麻醉。 大、小白鼠 皮下或肌肉 8001000 20 蛙 淋巴囊注射 蟾蜍 淋巴囊注射 1ml/100g 10 2.局部麻醉 局部麻醉方法很多,有表面麻醉、浸潤(rùn)麻醉和阻斷麻醉等。使用最多的是浸潤(rùn)麻醉,浸潤(rùn)麻醉是將藥物注于皮下、皮內(nèi)或手術(shù)野深部組織,以阻斷局部的神經(jīng)傳導(dǎo),使痛覺(jué)消失。常用的藥物是 %鹽酸普魯卡因。 粘膜表面麻醉宜用 2%鹽酸可卡因。 3.麻醉注意事項(xiàng) ⑴靜脈注射必須緩慢,同時(shí)觀察肌肉緊張性、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí),立即停止注射。配制的藥液濃度要適中,不可過(guò)高,以免麻醉過(guò)急;但也不能過(guò)低,以減少注入溶液的體積。 ⑵ 麻醉時(shí)需注意保溫。麻醉期間,動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制,出現(xiàn)體溫下降,可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。此時(shí)常需采取保溫措施。保溫的方法有,實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈,電褥,臺(tái)燈照射等。無(wú)論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的肛門體溫而定。 ⑶ 麻醉劑使用過(guò)量可引起中毒,應(yīng)特別注意麻醉劑的劑量和給藥途徑。應(yīng)準(zhǔn)確按體重計(jì)算麻醉劑量,由于動(dòng)物存在個(gè)體差異,文獻(xiàn)介紹的劑量?jī)H作參考。 ⑷萬(wàn)一麻醉過(guò)量,應(yīng)根據(jù)不同情況,積極采取措施,如施行人工呼吸、給予蘇醒劑、或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等,也可靜脈注射 5%溫?zé)崞咸烟侨芤骸? 習(xí) 題 敘述兔的幾種抓取固定方法; 敘述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛的去除方法; 敘述常用的幾種靜脈注射方法; 敘述全身麻醉的方法和注意事項(xiàng)。 六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液的采集方法 (一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液采集方法 實(shí)驗(yàn)研究中,經(jīng)常要采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液進(jìn)行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血方法較多,按采血部位不同常用的有尾尖采血、耳部采血、眼部采血、心臟采血、大血管采血等。 采血時(shí)要注意: ⑴采血場(chǎng)所有充足的光線。室溫夏季最好保持在 2528℃ ,冬季 1520℃ 為宜; ⑵采血用具和采血部位一般需要進(jìn)行消毒;⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥; ⑷若需抗凝全血,在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。 現(xiàn)將采用血方法按動(dòng)物和部位分別加以介紹。 : 主要用于小鼠、大鼠采血,需血量很少時(shí)。 (1)割 (剪)尾采血: 固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒,然后浸在 45℃ 左右的溫水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈。再將尾擦干,剪去尾尖 ,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結(jié)束,傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口,割破尾動(dòng)脈或靜脈,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血 10余次以上。小鼠每次可取血 ,大鼠 ~ 。 (2)鼠尾刺血法 大鼠用血量不多時(shí)(僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查),可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用 7號(hào)或 8號(hào)注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時(shí)即有血滴出。如果長(zhǎng)期反復(fù)取血,應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿
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