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生物醫(yī)學(xué)研究的基本-文庫吧資料

2025-01-22 15:10本頁面
  

【正文】 血。用 7號(hào)或 8號(hào)注射針頭,刺入鼠尾靜脈,拔出針頭時(shí)即有血滴出。 (2)鼠尾刺血法 大鼠用血量不多時(shí)(僅做白細(xì)胞計(jì)數(shù)或血紅蛋白檢查),可采用本法。每鼠一般可采血 10余次以上。再將尾擦干,剪去尾尖 ,讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取,采血結(jié)束,傷口消毒并壓迫止血。 (1)割 (剪)尾采血: 固定動(dòng)物并露出鼠尾。 現(xiàn)將采用血方法按動(dòng)物和部位分別加以介紹。 采血時(shí)要注意: ⑴采血場(chǎng)所有充足的光線。 六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液的采集方法 (一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液采集方法 實(shí)驗(yàn)研究中,經(jīng)常要采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液進(jìn)行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析。 ⑷萬一麻醉過量,應(yīng)根據(jù)不同情況,積極采取措施,如施行人工呼吸、給予蘇醒劑、或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等,也可靜脈注射 5%溫?zé)崞咸烟侨芤骸? ⑶ 麻醉劑使用過量可引起中毒,應(yīng)特別注意麻醉劑的劑量和給藥途徑。保溫的方法有,實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈,電褥,臺(tái)燈照射等。麻醉期間,動(dòng)物的體溫調(diào)節(jié)機(jī)能往往受到抑制,出現(xiàn)體溫下降,可影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。配制的藥液濃度要適中,不可過高,以免麻醉過急;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。 粘膜表面麻醉宜用 2%鹽酸可卡因。使用最多的是浸潤麻醉,浸潤麻醉是將藥物注于皮下、皮內(nèi)或手術(shù)野深部組織,以阻斷局部的神經(jīng)傳導(dǎo),使痛覺消失。 大白鼠 腹腔 40 1 小白鼠 腹腔 1520 1 氯 醛 糖 兔 靜脈 80100 2 34小時(shí),誘導(dǎo)期不明顯 大白鼠 腹腔 50 2 烏 拉 坦 兔 靜脈 7501000 30 24小時(shí),毒性小,主要適用小動(dòng)物的麻醉。 常用麻醉劑的用法及劑量 麻醉劑 動(dòng)物 給藥方法 劑 量( mg/kg) 常用濃度% 維 持 時(shí) 間 戊巴比妥納 狗、兔 靜脈 30 3 24小時(shí)中途加上1/5量,可維持 1小時(shí)以上,麻醉力強(qiáng),易抑制呼吸。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別。 ( 2)腹腔和靜脈給藥麻醉法 非揮發(fā)性麻醉劑可用作腹腔和靜脈注射麻醉,操作簡(jiǎn)便,是常采用的方法。本法最適于大、小鼠的短期操作性實(shí)驗(yàn)的麻醉,當(dāng)然也可用于較大的動(dòng)物,只是要求有麻醉口罩或較大的玻璃箱罷了。麻醉時(shí)用幾個(gè)棉球,將乙醚倒在其中,迅速轉(zhuǎn)入鐘罩或箱內(nèi),讓其揮發(fā),然后把待麻醉動(dòng)物投入,約隔 46分鐘即可麻醉。 2.局部麻醉劑:常用的有普魯卡因(奴佛卡因)、的卡因、和利多卡因。一般作用時(shí)間可維持 2— 4 h。 ② 戊巴比妥鈉:為中效巴比妥類藥物。乙醚吸入麻醉適用于各種動(dòng)物,其麻醉量和致死量差距大,麻醉安全度亦大,動(dòng)物麻醉深度容易掌握,而且麻后蘇醒較快。 (一 )常用的麻醉劑 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為全身性麻醉劑和局部麻醉劑。適當(dāng)?shù)穆樽韺?duì)保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和獲得滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著十分重要的作用。 大、小鼠可采用浸尾方式經(jīng)尾皮給藥。 2.涂布法給藥: 為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)涂布皮膚給藥方法。 (三)其它途徑給藥 1.呼吸道給藥:呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態(tài)存在藥物或毒氣,均需要通過動(dòng)物呼吸道給藥。在導(dǎo)尿管頭上涂上凡士林,由助手使兔蹲臥于桌上,以左臂及左腋輕輕按住兔頭及前肢,以左手拉住兔尾,露出肛門,并用右手輕握后肢,實(shí)驗(yàn)者將橡皮管插入家兔肛門內(nèi),深度約 7~ 9cm,如為雌性動(dòng)物,注意勿誤插入陰道(肛門緊接尾根)。 動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積家兔為 80150ml,狗為 200500ml。 灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后,并用繩將它固定于嘴部,將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管(如導(dǎo)尿管),經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入,沿咽后壁而進(jìn)入食道,此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道,可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中,如不發(fā)生氣泡,此導(dǎo)管即是在食道中,未誤入氣管,即可將藥液灌入。常用的灌胃量小鼠為 1ml,大鼠 47ml,豚鼠為 58ml。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí),應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?,以免損傷或穿破食道以及誤入氣管。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定,右手持注射器,將灌胃針插入動(dòng)物口中,沿咽后壁徐徐插入食道。 ①小鼠、大鼠(或豚鼠)用輸血針頭或小號(hào)腰穿針頭,將其尖端斜面磨去,用焊錫在針尖周圍焊一圓頭,注意勿堵塞針孔,即成灌胃針;亦可用燒成圓頭的硬質(zhì)玻璃毛細(xì)管或特制的塑料毛細(xì)管,作為導(dǎo)管。一般適用于動(dòng)物疾病的防治、藥物的毒性觀察、某些與食物有關(guān)的人類疾病的復(fù)制等。此法簡(jiǎn)單方便,不會(huì)因操作失誤導(dǎo)致動(dòng)物死亡。 (二)攝入法給藥 攝入法給藥可分為自動(dòng)口服給藥、強(qiáng)制灌胃給藥和注入直腸給藥三種方式。針頭從上前方向下后方傾斜刺進(jìn),直至針頭遇阻力變小,然后針頭稍后退,以垂直方向推到關(guān)節(jié)腔中。 關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥 : 此種方法常用于關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型復(fù)制。給豚鼠、兔、狗等進(jìn)行腦內(nèi)注射時(shí),須先用穿顱鋼針穿透顱骨,再用注射器針頭刺入腦部,再徐徐注入被檢物。 狗小腦延髓池給藥 腦內(nèi)給藥: 此法常用于微生物學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),將病原體等接種于被檢動(dòng)物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。將狗麻醉后,使狗頭盡量向胸部屈曲,用左手摸到其第一頸椎上方的凹陷(枕骨大孔),固定位置,右手取 7號(hào)鈍針頭(將針頭尖端磨鈍),由此凹陷的正中線上,順平行狗的方向,小心地刺入小腦延髓池。 8.小腦延髓池給藥 此種給藥是在動(dòng)物麻醉情況下進(jìn)行的。這時(shí)不要再向下刺,以免損傷脊髓。將其尾端向腹側(cè)彎曲,使腰骶部凸出,在第七腰椎與第一骶椎之間摸到第七腰椎間隙,插入腰椎穿刺針頭。 蛙全身淋巴囊分布 椎管內(nèi)注射: 此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。方法是將針頭刺入口腔,使穿過下頜肌層入胸淋巴囊內(nèi)注入藥液,一次最大注射量為 1毫升。注射時(shí)將針頭從蛙大腿上端刺入,經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層,再進(jìn)入腹壁皮下,即進(jìn)入淋巴囊,然后注入藥液。腹部淋巴囊和頭背淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。 其它還有淺背側(cè)足中靜脈注射、股靜脈或頸外靜脈注射在不同動(dòng)物中也偶用。 注射前由助手將動(dòng)物側(cè)臥,剪去注射部位的被毛,消毒后,用膠皮帶扎緊(或用手捏緊)靜脈近端,使血管充盈,從靜脈的遠(yuǎn)端將注射針頭平行刺入血管,待有回血后,松開綁帶(或兩手),緩緩注入藥液。如需反復(fù)注射,應(yīng)盡可能從末端開始,以后向尾根部方向移動(dòng)注射。 ),從尾下 1/3處(約距尾尖 23厘米)處進(jìn)針,此處皮薄易于刺入,先緩注少量藥液,如無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,可繼續(xù)注入。操作時(shí)先將動(dòng)物固定在鼠盒內(nèi)或扣在燒杯中,使尾巴露出,尾部用 45~ 50℃ 的溫水浸潤 1分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)張,并可使表皮角質(zhì)軟化。 家兔耳緣靜脈注射方法 ② 尾靜脈注射主要用于大、小鼠。外緣靜脈表淺易固定,常用。耳中央為動(dòng)脈,耳外緣為靜脈。 ① 耳緣靜脈注射主要用于兔、豚鼠等。大、小鼠多選用尾靜脈注射,兔多選用耳緣靜脈注射,犬多選用后肢小隱靜脈或前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈注射,豚鼠多選用耳靜脈或后肢小隱靜脈注射。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔,進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開 1cm處。 腹腔注射 用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí),以左手抓住動(dòng)物,使腹部向上,右手將注射針頭于左(或右)下腹部刺入皮下,使針頭向前推 ~,再以 45176。 皮內(nèi)注射 皮內(nèi)注射是將藥液注入皮膚的表皮和真皮之間,操作時(shí)需將注射的局部脫去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊,在兩指之間,用結(jié)核菌素注射器連 4號(hào)細(xì)針頭,緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi),然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液,此時(shí)會(huì)感到有較大阻力,可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。 肌肉注射 肌肉注射應(yīng)選肌肉發(fā)達(dá),無大血管通過的部位,一般多選臀部。 (一)注射法: 皮下注射: 注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚,將連有注射器的 5( 1/2)號(hào)針頭刺入皮下。 給藥的方法可分為注射法、攝入法(用于消化道)、涂布法(用于皮膚)和吸入法(用于呼吸道)等。 使用以上各種脫毛劑,都應(yīng)事先剪短被毛,以節(jié)省脫毛劑,并減少對(duì)皮膚的刺激反應(yīng),應(yīng)用時(shí)用棉球蘸脫毛劑,在所需局部涂一薄層, 23分鐘后,用溫水洗去脫落的被毛,以紗布擦干局部,涂一層油脂即可。 以上脫毛劑配方適用于家兔、大白鼠、小白鼠等小動(dòng)物的脫毛。 ⑵硫化鈉 8g、淀粉 7g、糖 4g、甘油 5g、硼砂 1g, 加水 75ml。 脫毛法:脫毛系指用化學(xué)藥品脫去動(dòng)物的被毛,適用于無菌手術(shù)野的準(zhǔn)備以及觀察動(dòng)物局部皮膚血液循環(huán)和病理變化。固定動(dòng)物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。若采用電動(dòng)剃刀,則逆被毛方向剃毛。 剃毛法:在大動(dòng)物做慢性手術(shù)時(shí)常用。除毛的方法有 : 拔毛法、機(jī)械法(剪毛法或剃毛法)和化學(xué)法(脫毛法)三種。 :如采取仰臥位,四肢固定方法與家兔相同。 1.頭部固定:固定狗頭需用一特制的狗頭固定器。 狗嘴捆綁法 倘若此舉不成,應(yīng)用狗頭鉗夾住其頸部,將狗按倒在地,再綁其嘴。方法是用布帶迅速兜住狗的下頜,繞到上頜打一個(gè)結(jié),再繞回下頜下打第二結(jié),然后將布帶引至頭后頸項(xiàng)部打第三個(gè)結(jié),并多系一個(gè)活結(jié)(以備麻醉后解脫)。 家兔馬蹄形固定 (六)狗的抓取固定方法 未經(jīng)訓(xùn)練用于急性實(shí)驗(yàn)的狗性兇惡,能咬人,因此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)第一個(gè)步驟就是要綁住狗嘴。使其正好嵌在突起下方的凹處,然后在適當(dāng)?shù)母叨裙潭ń饘侔?。盒式固定,適用于兔耳采血、耳血管注射等情況;若做血壓測(cè)量、呼吸等實(shí)驗(yàn)和手術(shù)時(shí),則需將兔固定在兔
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