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正文內(nèi)容

生物醫(yī)學研究的基本(參考版)

2025-01-19 15:10本頁面
  

【正文】 。 飼養(yǎng)動物區(qū)域光線宜暗淡些,切忌用強光照明。 動物的鋪墊物應經(jīng)常更換,鋪墊物應消毒滅菌、柔軟、吸水、無塵粒,便于更換。 因麻醉動物體溫降低,應及時調(diào)整好室內(nèi)溫度和濕度,防止動物感冒,室內(nèi)溫差應控制在 177。對麻醉后的大小便失禁,要注意搞好動物的清潔衛(wèi)生。 (二)細心護理,防止意外損傷: 要防止動物的過度興奮狀態(tài),發(fā)生挫傷和骨折。因此對受試動物在實驗后一定要加強護理。 有條件時,當動物呼吸停止,而心搏極弱或剛停止時,可用 5%CO2和 60%O2的混合氣體進行人工呼吸,效果更好。如有人工呼吸器,可行氣管插管后,連接人工呼吸器進行人工呼吸。如實驗前動物曾用肝素抗凝,由于微循環(huán)血管中始終保持通暢,不出現(xiàn)血管中血液凝固現(xiàn)象,因此就是動物出現(xiàn)臨床死亡后數(shù)分鐘,采用此種急救措施仍易救活??稍趧游锕蓜用}插管,連接加壓輸液裝置(血壓計連接輸液瓶上口,下口通過膠皮管連接塑料套管)。這樣可刺激動物血管內(nèi)感受器,反射性地引起血壓呼吸的改善。 (四)動脈快速注射高滲葡萄糖液 一般常采用經(jīng)動物動脈逆血流加壓、快速、沖擊式地注入 40%葡萄糖溶液。作為呼吸興奮藥,它比其他藥作用迅速而顯著。 山梗菜堿:每條動物一次可注入 1%。此藥可直接興奮延髓呼吸中樞,使呼吸加速加深;對血管運動中樞的興奮作用較弱。 (三)注射呼吸中樞興奮藥 可從靜脈注射山梗菜堿或尼可剎米。當動物注射腎上腺素后,如心臟已搏動但極為無力時,可從靜脈或心腔內(nèi)注射 1%氯化鈣 5ml。對狗用每分鐘幾百次頻率的脈沖電刺激膈神經(jīng)效果較好。對狗、兔、貓常用的急救措施有下面幾種。 十、實驗動物的急救措施 當實驗進行中因麻醉過量、大失血、過強的創(chuàng)傷、窒息等各種原因,而使動物血壓急劇下降,呼吸極慢甚至呼吸停止等臨床死亡癥狀時,應立即進行急救。 對猴、狗、貓等大動物有時可不做特別標記,只記錄它們的外表和毛色即可。此法多用于大、中型動物。若動物編號超過 10或更大數(shù)字時,可使用上述兩種不同顏色的溶液,即把一種顏色作為個倍數(shù),另一種顏色作為十位數(shù),這種交互使用可編到 99號,假使把紅的記為十位數(shù),黃色記為個位數(shù),那么右后腿黃斑,頭頂紅斑,則表示是 49號鼠,其余類推。編號的原則是:先左后右,從前到后。根據(jù)被毛顏色不同選擇使用。 (一)顏料涂染 這種標記方法在實驗室最常使用,也很方便。標記的方法很多,良好的標記方法應滿足標號清晰、耐久、簡便、適用的要求。每條成年兔由兔耳緣靜脈注入 10%氯化鉀溶液 5~ 10ml;每條成年狗由狗前肢或后肢下靜脈注入20~ 30ml,即可致死。這時胸膜腔的壓力與大氣壓力相等,肺臟因受大氣壓縮發(fā)生肺萎陷,縱膈擺動,動物窒息而死。對家兔也可用木錘用力錘擊其后腦部,損壞延腦,造成死亡。采用此種方法,動物十分安靜,對臟器無損傷,對活殺采集病理切片標本是一種較好的方法。 先使動物輕度麻醉,暴露股三角區(qū),用利刀在股三角區(qū)作一個約 10cm的橫切口,把股動、靜脈全切斷,立即噴出血液。一般兔、貓等靜脈內(nèi)注入 2040ml空氣即可致死。當空氣注入靜脈后,可與血液相混成泡沫狀,隨血液循環(huán)到全身。 吸入二氧化碳,大、小鼠在高二氧化碳濃度的環(huán)境中即可致死。用小木錘用力擊打鼠頭部也可致死。小鼠處死法相同。 (二)大鼠和小鼠 右手抓住鼠用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭,將脊髓與腦髓拉斷,鼠便立即死亡。將探針由凹陷處垂直刺入,刺破皮膚即入枕骨大孔。 八、實驗動物的處死方法 (一)蛙類 常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊椎的方法處死。但因靜脈于遠心端結扎后靜脈塌陷呈細線狀,較難插管,因此可試用靜脈充盈插管法。 ( 1)股動脈插管術:于股動脈近心端用動脈夾夾住,遠心端用細線結扎,牽引此線在貼近遠心端結扎處剪開血管向心插入動脈套管,結扎固定后備放血或注射用。狗的血管粗大,插管較易。動脈下方穿兩根細線備用。 ,然后分離股動、靜脈間的結締組織,清楚地暴露股靜脈,穿兩根細線備用。股動脈及神經(jīng)即由此三角區(qū)通過。 ,辨明動脈走向,在該處作局部麻醉并作方向一致長約 45cm的切口。 狗、兔等動物手術方法基本相同。在導管上作一長 58cm的記號,導管準備好后,先將靜脈遠心端結扎,靠近結扎點作一剪口,將導管插入剪口,輕柔地向心端緩慢插入,遇有阻抗即退回改變角度重插,切不可硬插(易插破靜脈進入胸腔)一般達導管上記號為止。 ⑶ 頸外靜脈插管術:頸外靜脈可用于注射、輸液和中心靜脈壓之測量。 右手持銳利的眼科剪,使與血管呈 45度角,在緊靠離心端結扎線處向心一剪,剪開動脈壁之周徑 1/3左右(若重復數(shù)剪易造成切緣不齊,當插管時易造成動脈內(nèi)膜內(nèi)卷或插入層間而失?。缓蟪謩用}套管,以其尖端斜面與動脈平行地向心方向插入動脈內(nèi),用細線扎緊并在套管分叉處打結固定。為此,在插管前需使動物肝素化,并將口徑適宜的充滿抗凝生理鹽水的動脈套管(也可用塑料管)準備好,將頸總動脈遠心端結扎,近心端用動脈夾夾閉。用鑷子夾住 T形切口的一角,將適當口徑的氣管套管由切口向心端插入氣管腔內(nèi),用粗線扎緊,再將結扎線固定于 “ Y”形氣管插管分叉處,以防氣管套管脫出。仔細分離長約 34cm的頸外靜脈,穿兩線備用。 ⑷ 頸外靜脈暴露術 :頸外靜脈淺,位于頸部皮下。 交感神經(jīng)比迷走神經(jīng)細,位于頸總動脈的內(nèi)側,呈淺灰色;減壓神經(jīng)細如頭發(fā),位于迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)之間,在家兔為一獨立的神經(jīng),沿交感神經(jīng)外側后行走,但在人、狗此神經(jīng)并不單獨行走,而是行走于迷走、交感干或迷走神經(jīng)中。用眼科鑷子細心剝開鞘膜,分離出長約 34cm的頸總動脈,在其下穿兩根線備用。 用止血鉗在兩層肌肉的交接處(即 V形溝內(nèi))將它分開。其上又有一層肌肉呈 V字形走行向左右兩側分開。 ⑵ 頸總動脈分離術:在頸中部位有兩層肌肉。 :作局部浸潤麻醉或作全身麻醉。頸部手術成敗的關鍵在于熟悉動物頸部及手術要領,防止損傷血管和神經(jīng)。需要暴露氣管、頸總動脈,頸外靜脈,股動脈,股靜脈,并做相應的插管,以及分離迷走神經(jīng),減壓神經(jīng)及股神經(jīng)等。注意不要穿刺太深;不要過快過量抽取腹水。穿刺肋間肌時有一定阻力,當阻力消失有針落空感時,表明刺入胸膜腔,即可抽取胸水。 輸尿管插管導尿。此法適合于中小型動物。 (三)尿液采集 : 將動物放在特制的代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)。 胰液 的采集: 將動物麻醉仰臥固定,上腹部手術打開腹腔,找出膽囊(大鼠無)并分離膽囊和膽總管,再用注射器抽取膽汁。反復采血時,兩后肢交替使用。拔針后立即出血,呈半球狀隆起。 (2)豚鼠背中足靜脈取血: 助手固定動物,將其右或左膝關節(jié)伸直提到術者面前。 (1)大、小鼠斷頭取血: 采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大(?。┦蟮念i部皮膚,并作動物頭朝下傾的姿勢。右手持注射器刺入靜脈取血。以食指和中指按住頭的一側,用酒精棉球消毒右側頸靜脈的部位。也常采用右側頸靜脈取血。右手取連有 5( 1/2)號針頭的注射器,針頭由翼根向翅膀方向沿靜脈平行刺入血管內(nèi),即可抽血。如需抽取血時,可將動脈翅膀展開,露出腋窩,將羽毛拔去,即可見到明顯的翼根靜脈,此靜脈是由翼根進入腋窩的一條較粗靜脈。其操作步驟與靜脈注射相似。 (2)中型動物的大血管采血: 如犬后肢小隱靜脈、前肢皮下頭靜脈、頸靜脈和股動脈;猴后肢皮下靜脈及外頸靜脈;羊的頸靜脈;貓后肢外側小隱靜脈和前肢內(nèi)側下頭靜脈;兔外頸靜脈和后肢脛部皮下靜脈采血。 先將動物麻醉仰位固定,手術切開皮膚,分離組織,暴露動、靜脈,用注射器逆血流方向刺入,吸出血液。一次可取血 2025ml。 (3)兔心臟取血: 將家兔仰臥固定,在第三肋間胸骨左緣 3毫米處注射針垂直刺入心臟,血液隨即進入針管。因豚鼠身體較小,一般可不必將動物固定在解剖臺上,而可由助手握住前后肢進行采血即可。 (2)豚鼠心臟采血: 將動物仰臥固定,穿刺部位剪毛消毒,通常在胸骨左緣,選心臟搏動最強部位作穿刺。 ③在胸腔內(nèi)針頭不應左右擺動以防止傷及心,肺。 (1)大、小鼠心臟采血: 將動物仰臥固定,穿刺部位剪毛消毒,在第 34肋間胸骨左緣 3毫米(博動最強)處,用帶有 5號針頭的注射器垂直刺入心臟,血液隨即進入針管。 : 心臟采血是用注射針頭刺入心腔的一種采血方法,多用于兔、犬等中型動物。不要在近耳根部取血,因耳根部軟組織厚,血管位置略深,易刺透血管造成皮下出血。取血用的針頭一般用 6號針頭,不要太細。此法一次抽血可達 15ml。用手指輕輕摩擦兔耳,使靜脈擴張,用連有5( 1/2)號針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或將針頭逆血流方向刺入耳緣靜脈取血,取血完畢用棉球壓迫止血,此種采血法一次最多可采血 510ml。 將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中,或由助手以手扶住。但可導致動物死亡,只能一次采血。操作時用左手抓住動物頸部皮膚,輕輕壓在實驗臺上使眼球突出充血,以彎頭眼科鑷迅速夾去眼球,并將鼠倒置,頭向下,眼眶內(nèi)很快流出血液。體重 2025g的小鼠每次可采血 ;體重 200300g大鼠每次可采血 ,可適用于某些生物化學項目的檢驗。 若技術熟練,用本法短期內(nèi)可重復采血均無多大困難。 當感到有阻力時即停止推進,同時,將針退出約 ,邊退邊抽。 的夾角,由眼內(nèi)角刺入,針頭斜面先向眼球,刺入后再轉 180度使斜面對著眼眶后界。當取血時左手拇指及食指輕輕壓迫動物的頸部兩側,使眶后靜脈叢充血。 : 用于小鼠、大鼠的采
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