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如何從海洋中運用生物技術方法尋找新的酶劉明明(編輯修改稿)

2024-11-22 17:42 本頁面
 

【文章內容簡介】 學的研究過程 ? 基因提取 ? 純化特定 DNA進行克隆 ? 插入載體 ? 導入宿主細胞 ? 序列和功能篩選 宏基因組學的技術方法 DNA的提取及基因或基因組 DNA 的富集 原位裂解法 原位裂解法主要是通過去污劑處理、酶解法、機械破碎法、以及高溫或凍融法等直接破碎樣品中的微生物細胞而使 DNA得以釋放 。此法操作簡單,成本低, DNA提取率高。 異位裂解法 先從樣品中分離出細胞,再對細胞進行裂解,此法處理條件溫和,所得 DNA純度較高,但操作繁瑣,成本高, DNA提取率低。 2. 載體 ? 宏基因組文庫的構建需要適宜的克隆載體 ? 通常用于 DNA克隆的載體主要包括質粒 (Dlasmid)、粘粒 ? (cosmid)和細菌人工染色體 (BAC)等。 ? 質粒一般用于克隆小于 10 kh的 DNA片段,適用于單基因的克隆與表達。 ? 粘粒 (大部分是用
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