【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ?是 100% ?Lecture對(duì)於實(shí)驗(yàn)的理解很有幫助，老師及助教 的講解相當(dāng)仔細(xì)。五天的課程收穫很多。 ?實(shí)驗(yàn)流程順暢，且在等實(shí)驗(yàn)的過程中還會(huì)上課， 不會(huì)讓時(shí)間浪費(fèi)掉。 ?可以感受到課程規(guī)劃的用心，這星期的課頗具收 獲，是很愉快的學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)。 ?感謝助教耐心的指導(dǎo)和幫忙。 2 . 教學(xué)方法滿意24%尚可2 %非常滿意7 4 %96年度開設(shè)課程 (實(shí)驗(yàn)課程 ) ? 課程 : 細(xì)胞訊息傳遞之分析 學(xué)分 :1學(xué)分 報(bào)名 /上課人數(shù) 22人 / 22人 組別數(shù) /每組人數(shù) 11組 / 2人 負(fù)責(zé)教師 馮濟(jì)敏 授課時(shí)數(shù) 40小時(shí) 上課學(xué)生來源 (人 ) 校內(nèi) 校外 產(chǎn)業(yè)界 教師 21 1 0 0 日期 講 題 講 員 7/16 講解：癌細(xì)胞因應(yīng)環(huán)境改變導(dǎo)致葡萄糖運(yùn)送增加之簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)： (I)製備含有 GLUT1 promoter之 Luciferase reporter載體 (pLuc GT1/E1/E2) (II)製備含有 EGFPconjugated GLUT1載體 (pGT1EGFP) 馮濟(jì)敏(校內(nèi) ) 7/17 講解：細(xì)胞培養(yǎng)之操作及轉(zhuǎn)染 實(shí)驗(yàn)： (I)培養(yǎng) MCF7 乳癌 (II )利用電穿孔共同轉(zhuǎn)染 pLucGT1/E1/E2 及 pCMV? 或 pGT1EGFP及 pCMV? 馮濟(jì)敏 7/18 講解： GLUT1 細(xì)胞內(nèi)移位作用之分析 實(shí)驗(yàn)： (I)使用 CoCl2 及 sodium azide處理轉(zhuǎn)染乳癌細(xì)胞 (II)製備樣本 以供螢光及共軛焦顯微鏡分析 馮濟(jì)敏 7/19 講解： GLUT1基因轉(zhuǎn)錄之分析 實(shí)驗(yàn)： (I)製備樣本 以供 luciferase分析 (II) Luciferase分析 (III) ?galactosidase分析 馮濟(jì)敏 7/20 講解：螢光顯微鏡與共軛焦顯微鏡之比較與數(shù)據(jù)分析 實(shí)驗(yàn)：螢光顯微鏡與共軛焦顯微鏡分析短期處理之樣本 馮濟(jì)敏 細(xì)胞訊息傳遞之分析 課程內(nèi)容及師資 學(xué)生實(shí)驗(yàn)成果 細(xì)胞訊息傳遞之分析 【 圖一 】 為帶有 insert的 DNA片段經(jīng)過 PCR反應(yīng)後，進(jìn)行膠體電泳測(cè)試之實(shí)驗(yàn)結(jié)果 。 【 圖二 】 電穿孔的cuvette 經(jīng) electroporation的溶液會(huì)有氣泡的產(chǎn)生，電穿孔法其原理係將細(xì)胞暴露於瞬間的高壓放電，造成細(xì)胞膜上出現(xiàn)一些暫時(shí)性開放的小孔洞，使得質(zhì)體DNA可以藉者這些小孔洞進(jìn)入細(xì)胞中，達(dá)到基因轉(zhuǎn)殖目的。 【 圖三 】 A :為 control，不加任何藥物； B :加入 CoCl2； C :加入 azide（ NaN3） 【 圖一 】 【 圖二 】 【 圖三 】 Analysis of EGFPGLUT1 localization under various treatment 細(xì)胞訊息傳遞之分析 實(shí)驗(yàn)課程 學(xué)生成績(jī)分佈圖 1 117305101520曠課 7080 8190 9199分?jǐn)?shù) 組距 曠課 7080 8190 9199 人數(shù) 1 1 17 3 人數(shù) 分?jǐn)?shù) 成績(jī)?cè)u(píng)定標(biāo)準(zhǔn) : 書面報(bào)告 65% 課堂表現(xiàn)及出席率 35% 細(xì)胞訊息傳遞之分析 學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)反應(yīng)調(diào)查表 1 . 教材內(nèi)容滿意71%非常滿意2 4 %2 . 教學(xué)方法非常滿意34%滿意66%3 . 老師指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)之熱誠(chéng)滿意34%尚可47%非常滿意1 9 % ?課程過於緊湊 5% ?課程內(nèi)容過淺 5% ?教師表達(dá)能力 10% ?親自操作實(shí)驗(yàn)或儀器 14% ?各組器材數(shù)量 19% ?各組器材品質(zhì) 14% ?實(shí)驗(yàn)流程安排規(guī)劃 10% ?是 72% ?否 14% ?不清楚 14% 4 . 助教指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)之熱誠(chéng)非常滿意6 7 %滿意33% ?學(xué)到很多東西，問助教們問題也都得到助教們清 楚又熱心的回答，真的辦得非常棒。 ?實(shí)驗(yàn)結(jié)果及流程一切都算順利，也知道很多操作的基本原理，對(duì)於之後碩士生涯有很大的助益。 尚可5%96年度開設(shè)課程 (實(shí)驗(yàn)課程 ) ? 課程 : 蛋白質(zhì)交互作用 學(xué)分 :1學(xué)分 報(bào)名 /上課人數(shù) 28人 / 28人 組別數(shù) /每組人數(shù) 14組 / 2人 負(fù)責(zé)教師 陳美瑜 、 陳芬芳 授課時(shí)數(shù) 40小時(shí) 上課學(xué)生來源 (人 ) 校內(nèi) 校外 產(chǎn)業(yè)界 教師 27 0 1 0 日期 講 題 講 員 8/06 講解：簡(jiǎn)介蛋白質(zhì)間交互作用研究方法、簡(jiǎn)介本實(shí)驗(yàn)課程、酵母菌模型生物介紹、酵母菌雙雜合系統(tǒng)之原理 實(shí)驗(yàn)：酵母菌雙雜合系統(tǒng) (1)：酵母菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)型 免疫共同定位分析 (1)：細(xì)胞轉(zhuǎn)染 免疫共沉澱 (1)：細(xì)胞轉(zhuǎn)染 陳美瑜 陳芬芳（校內(nèi)） 8/07 講解：共軛螢光顯微鏡技術(shù) 實(shí)驗(yàn)：酵母菌雙雜合系統(tǒng) (2)：酵母菌 DNA萃取、大腸桿菌電轉(zhuǎn)型 免疫共同定位分析 (2)：細(xì)胞培養(yǎng) 免疫共沉澱 (2)：細(xì)胞蛋白質(zhì)萃取物製備 陳美瑜 陳芬芳 8/08 講解：蛋白質(zhì)交互作用免疫分析方法 實(shí)驗(yàn)：酵母菌雙雜合系統(tǒng) (3)：大腸桿菌轉(zhuǎn)型菌落 PCR 免疫共同定位分析 (3)：免疫螢光染色、共軛螢光顯微鏡 觀察共同定位分析 p53及 MDM2的結(jié)合 陳美瑜 陳芬芳 8/09 講解： SDSPAGE電泳與 Western轉(zhuǎn)漬分析原理 實(shí)驗(yàn)：酵母菌雙雜合系統(tǒng) (4)： PCR產(chǎn)物凝膠電泳分析回收質(zhì)體結(jié)果 免疫共同定位分析 (4)：顯微呈像結(jié)果電腦共同定位分析 免疫共沉澱 (3)：免疫沉澱、製備 SDSPAGE凝膠分析 p53及 MDM2交互作用 陳美瑜 陳芬芳 8/10 講解：實(shí)驗(yàn)結(jié)果解說與討論 實(shí)驗(yàn)：酵母菌雙雜合系統(tǒng) (5)：以報(bào)告洋菜膠上之生長(zhǎng)情形與 β galactosidase 酵素 反應(yīng)呈色方法分析 p53及 MDM2蛋白質(zhì)交互作用啟動(dòng)報(bào)告基因表現(xiàn)之結(jié)果 免疫共沉澱 (4)： SDSPAGE蛋白質(zhì)電泳、 Western轉(zhuǎn)漬分析免疫共沉澱結(jié)果 陳美瑜 陳芬芳 蛋白質(zhì)交互作用 課程內(nèi)容及師資 學(xué)生實(shí)驗(yàn)成果 蛋白質(zhì)交互作用 圖二 : (利用共軛焦螢光顯微鏡觀察 ) 32℃ ( 操作組 )p53 大部分都在細(xì)胞質(zhì)然而部份進(jìn)入細(xì)胞核的可以成功的活化 MDM2 圖一 : 38℃ (negative control) p53(紅 )沒有入核，沒辦法 activate MDM2(綠 )。藍(lán)色為DAPI染的 DNA 代表核的位置 圖三 :可以看到綠色箭頭指的就是經(jīng)由 p53 Ab 免疫沉澱下來 ， 後來用 MDM2 Ab detect 的 MDM2。 圖一 圖二 圖三 蛋白質(zhì)交互作用 實(shí)驗(yàn)課程 學(xué)生成績(jī)分佈圖 32230510152025曠課 7080 8190分?jǐn)?shù) 組距 曠課 7080 8190 人數(shù) 3 2 23 人數(shù) 分?jǐn)?shù) 成績(jī)?cè)u(píng)定標(biāo)準(zhǔn)： 課堂表現(xiàn) 15% 實(shí)驗(yàn)課參與度及出席率 25% 書面報(bào)告 60% 蛋白質(zhì)交互作用 學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)反應(yīng)調(diào)查表 1 . 教材內(nèi)容2 . 教學(xué)方法非常滿意4 8 %滿意52%3 . 老師指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)之熱誠(chéng)滿意33%尚可17%非常滿意5 0 % ?課程過於緊湊 4% ?希望提供講義大綱及參考資料 16% ?課程內(nèi)容過淺 8% ?教師表達(dá)能力 4% ?各組器材 數(shù)量 4% ?各組器材品質(zhì) 8% ?實(shí)驗(yàn)桌操作寬擠 8% ?實(shí)驗(yàn)流程安排規(guī)劃 20% ?是 88% ?不清楚 12% 4 . 助教指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)之熱誠(chéng)非常滿意8 8 %滿意12% ?可增加實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 :例如 confocal ?助教們講解清楚，人都很 nice。實(shí)驗(yàn)上的討論很有幫助學(xué)到很多東西，是個(gè)感覺很棒的課程，在這一個(gè)禮拜內(nèi)受益良多。 滿意56%尚可4%非常滿意4 0 %96年度開設(shè)課程 (實(shí)驗(yàn)課程 ) ? 課程 : 特殊基因?qū)Π┘?xì)胞生長(zhǎng)影響 之分析 學(xué)分 :1學(xué)分 報(bào)名 /上課人數(shù) 30人 / 30人 組別數(shù) /每組人數(shù) 15組 / 2人 負(fù)責(zé)教師 簡(jiǎn)靜香 授課時(shí)數(shù) 40小時(shí) 上課學(xué)生來源 (人 ) 校內(nèi) 校外 產(chǎn)業(yè)界 教師 27 1 2 0 特殊基因?qū)Π┘?xì)胞生長(zhǎng)影響之分析 課程內(nèi)容及師資 日期 講 題 講 員 7/23 7/24 7/25 7/26 7/27 講解 :流式細(xì)胞儀之分析原理及應(yīng)用，細(xì)胞週期頻譜之圈選。 實(shí)驗(yàn)：培養(yǎng)肝癌細(xì)胞之前處理，進(jìn)行 PI staini