【文章內(nèi)容簡介】 ：分離酸性強弱不同的黃酮苷元 混合苷元 ?CHCl3 5% NaHCO3 堿水層 CHCl3層 5% Na2CO3 堿水層 CHCl3層 % NaOH CHCl3層 堿水層 5% NaOH 堿水層 (7,4′二 OH) (7或 4′OH) (一般 phOH) (5OH黃酮 ) 流程圖如下： 鉛鹽法： 分離二類成分 具有鄰二酚 OH：與 PbAc2 沉淀 不具有鄰二酚 OH：與 Pb（ OH） Ac 沉淀 硼酸絡(luò)合法： O O B OH ? 鄰二酚 OH與 H3BO3絡(luò)合，生成酸性強的絡(luò)合物，易溶于水，與不具上述結(jié)構(gòu)的黃酮分開 （三） 根據(jù)分子中特殊官能團分離 第四 、 五 節(jié) 黃酮化合物的檢識與結(jié)構(gòu)鑒定 化學(xué)方法 色譜方法 譜學(xué)特征 —— 解析： UV 1H 譜 13C 譜 MS 輔助手段 方法 : 測定 mp：熔距 1—2℃ 測定混合 mp（與標(biāo)準(zhǔn)品）：純度不夠， mp? 一、純度檢查 ： TLC：三種以上展開劑，與標(biāo)準(zhǔn)品共層析 （ Rf、斑點顏色、形狀相同） 當(dāng)加入診斷試劑時，通過光譜的改變又可推測基本結(jié)構(gòu)中 OH取代情況，提供結(jié)構(gòu)信息 二、紫外光譜 ? 測甲醇光譜： ? 加診斷試劑： 黃酮化合物的 UV 光譜特征，對區(qū)分各種類型的黃酮具有意義 優(yōu)點 ： 1 、規(guī)律性強 2 、測試技術(shù)合理 3 、樣品用量少 特征 ： 母核具有兩個吸收帶 （一） 黃酮化合物在 MeOH 中的基本光譜 O O A B O A B O + BandⅠ 300~400nm O O A B + BandⅡ 220~280nm 母核 取代基的影響 一、 位置 二 、種類 三 、數(shù)量 A環(huán)取代：影響帶 Ⅱ 的峰形和峰位，對帶 Ⅰ 基本無影響 B環(huán)取代 : 影響帶 Ⅰ 的峰形和峰位，對帶 Ⅱ 影響很小， 只影響其峰形。 注意： 當(dāng) 5 位有取代基時即影響帶 Ⅰ 又影響帶 Ⅱ ，因為 5位取代基可與 4位羰基形成親電系統(tǒng)，而 4位羰基 又直接參與兩個共軛系統(tǒng)。 一、位置 二 、種類 OH ：使峰紅移； OCH3 ：或 OH 甲基化，或糖苷化， 則紅移減小 三 、數(shù)量 有加和性，取代基數(shù)目越多，影響越大 。 OH 數(shù)目增加，則紅移更多 黃酮、黃酮醇類： 黃酮： 304～ 350 nm 黃酮醇： 352～ 385 nm (C3OH游離） 同： UV光譜相似， 2個主峰，峰形及峰強度相似。 異： Band Ⅰ 峰位不同 黃酮醇： 328～ 357 nm (C3OH被取代） 二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類 同：苯甲酰系統(tǒng)相同，桂皮酰系統(tǒng)被破壞 Band Ⅱ 吸收強， Band Ⅰ 吸收弱，可作為 Band Ⅱ 的肩峰或低強度峰出現(xiàn)。 異： Band Ⅱ 的峰位不同 異黃酮： 245～ 270 nm （ 270－ 25） 二氫黃酮、 二氫黃酮醇： 270～ 295 nm （ 270＋ 25） 查爾酮、橙酮類 同： Band Ⅰ 為主峰，強度高， Band Ⅱ 弱或為肩峰 異： Band Ⅰ 峰位不同 查爾酮： 340～ 390 nm 橙酮： 370～ 430 nm Ⅱ Ⅰ 300 200 400 黃酮 (醇 ) Ⅱ Ⅰ 300 200 400 二氫黃酮、異黃酮 Ⅱ Ⅰ 300 200 400 查耳酮、橙酮 BandⅡ = BandⅠ 黃酮 BandⅡ ＜ BandⅠ 查耳酮、橙酮 BandⅡ ＞ BandⅠ 二氫黃酮、異黃酮 峰強： 判斷 C3— OH 的存在狀態(tài) 有 C3— OH BandⅠ λmax ＞ 350 nm C3— O糖苷 BandⅠ λmax ＜ 350 nm 判斷結(jié)構(gòu)類型 注意：黃酮及黃酮母核上的羥基甲基化 或苷化時，將引起相應(yīng)吸收帶向 紫移，帶 Ⅰ 紫移更明顯。 （二） 加入診斷試劑光譜 診斷試劑：通過加入某些試劑，使化合物中的－ OH 全 部或部分解離，或形成絡(luò)合物，使光譜發(fā)生 規(guī)律性變化，用以判斷化合物的結(jié)構(gòu)。因為 這些試劑對化合物結(jié)構(gòu)具有診斷意義，故稱 之為診斷試劑。 診斷試劑類型：一般為堿性物質(zhì)，如 NaOMe、 NaOAc、 NaOAc / H3BO AlCl3 / HCl等 MeOH + NaOMe ： BandⅡ 紅移 ： A環(huán)上有 OH 7OH游離，在 320330 nm有吸收，若成苷， 吸收消失。 BandⅠ 紅移 ： B環(huán)上有 OH 4065 nm強度不變或增強時，有 4′OH 5060 nm 強度減弱時，有 3OH無 4′OH 峰強度 ? ：對堿敏感的取代圖式， 在堿性下發(fā)生降解反應(yīng) 多用來判斷 7 OH 、 4′OH 、 3OH的存在。 主要用來判斷 4′OH 、 3OH的存在。 MeOH + NaOAc 鑒別酸性強的酚 OH， 4′OH MeOH + NaOAc / H3BO3 判斷有無鄰二酚 OH O O OH B OH BandⅠ 紅移 1230 nm ： B 環(huán)上有鄰二 酚 OH Band Ⅱ 紅移 510 nm ： A 環(huán)上有鄰二酚 OH BandⅡ 紅移 （ 520 nm）： 示有 7 OH BandⅠ 紅移： B環(huán)上有鄰二酚 OH 、 C3有 OH BandⅡ 紅移： A環(huán)上有鄰二酚 OH、 C5有 OH MeOH + AlCl3 ? Al 3+ 絡(luò)合物，引起相應(yīng)吸收帶紅移 ? 生成鋁絡(luò)合物的相對穩(wěn)定性： 3OH黃酮 ＞ 5OH黃酮 ＞ 鄰二酚 OH MeOH + AlCl3 / HCl： 加入 HCl，鋁絡(luò)合物分解，光譜發(fā)生紫移 AlCl3 / HCl譜 ≠ AlCl3 譜：示結(jié)構(gòu)中有鄰二酚羥基