【文章內(nèi)容簡介】 1. 酶活性的抑制： E＋ PX PXE PE P＋ E ? 第一步 形成可逆性復合體 （ PXE 存地時間短） ? 第二步 酶磷?；磻?， P原子（親電性）與酶絲氨酸－ OH反應，親電性愈強，對酶抑制能力愈強， X基團分離能力愈大。 K2磷?；磻俾食?shù) 很快 ? 第三步 酶去磷?；?， K3速率常數(shù)，幾乎不發(fā)生 K+1 K1 K2 X K3 2. 酶活性的恢復 酶經(jīng)磷酰化后 ， 雖然水解作用極為緩慢 ， 但仍然能自發(fā)地放出磷酸并使酶復活 ， 這一反應稱為 自發(fā)復活作用 或 脫磷?；饔?。 EP+H2O EH+P一 OH 自發(fā)復活速度與抑制劑的離去基團無關 ， 而取決于磷原子上殘留的取代基以及酶的來源 。 AChE復活劑 ：羥胺 (NH2OH)（ 弱 ） 、 肟 、 羥肟酸 （ 強 ） 引入陽離子活性更強 。 攻擊磷?；钢械?P原子而取代它們 。 （解磷定） 3. 磷?；傅睦匣? 老化： 指磷?；冈诨謴瓦^程中轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N結構 ，以至于羥胺類的藥物不能使酶恢復活性 。 老化現(xiàn)象是由于二烷基磷酰酶的脫烷基反應造成的 。 磷酰化酶的老化速率與 磷?；系耐榛?有關 。 二乙基磷酰化酶老化緩慢 ， 但甲基 、 仲烷基及芐基 （ 苯甲基 ）酯的老化速度要快得多 。 老化反應速度取決于非酶的化學力 ， 發(fā)生烷基磷酸酯基 C一 O鍵的斷裂 。 因此 ， 酶如果受烷基化能力高的磷酸酯的抑制 ， 老化現(xiàn)象易于發(fā)生 。 1. 抑制神經(jīng)細胞的生長發(fā)育： AChE的催化作用能增強神經(jīng)軸突的生長，因而，在 AChE活性被有機磷殺蟲劑抑制后，即使未致死亡，機體神經(jīng)細胞的生長發(fā)育也受到阻礙。毒死蜱可以抑制 PC12細胞的有絲分裂和軸突的長出，抑制神經(jīng)細胞 DNA的合成，在遠低于使 AChE活性抑制所需要的濃度時即可引起與腦發(fā)育有關的分子 磷酸化的Ca2+ ／ cAMP介導的反應元件結合蛋白 (CREB)的活性增加?？梢?，有機磷殺蟲劑不僅具有膽堿能毒性，還具有非膽堿能毒性作用。 有機磷殺蟲劑的其他作用機理： 有機磷殺蟲劑的其他作用機理： 2. 抑制乙酰膽堿受體： 樂果可以增強肌細胞膜上的 nAChR的表達。它可通過結合到非競爭性位點改變該受體的構型或是直接阻斷 nAChR通道而抑制其功能。 3. 影響神經(jīng)突觸的 ACh的釋放： 毒死蜱可以作用于突觸膜上的自主型 nAChR，抑制這些自主受體的功能，從而影響ACh的釋放。 此外，有機磷殺蟲劑還對大腦突觸體的鈣離子通道功能有抑制作用，例如：甲胺磷 (methamidophos)可以使腦突觸體鈣攝取減少，說明甲胺磷影響了膜上的電壓敏感型鈣離子通道。 與 OP差異： ① K3比乙?；杆饴?，但是比磷?；杆饪斓枚唷Ｒ阴；傅膹突畎胨テ谥挥?，氨基甲?；笧閹追昼姷綌?shù)小時，而磷?；笧閹仔r到幾十天，甚至永不復活。 ②無老化 ③治療，阿托品效好，酶復活劑（ 2PAM、 4PAM、雙復磷 ）無效 （ 三 ） 氨基甲酸酯類對乙酰膽堿酯酶的抑制作用 總之： 二者均是 AChE的不正常底物，為酯動部位抑制劑（有時也稱為酸轉(zhuǎn)移抑制劑）。有機磷或氨基甲酸酯 與AChE絲氨酸的羥基結合 ，使 AChE磷?；虬被柞；?，即被 抑制 ，去磷?；枰獛讉€月的時間，而去氨基甲?；残枰獛讉€小時左右，但是去乙?；灰獛追种缓撩搿＿@樣導致突觸部位 積累大量的乙酰膽堿 ，突觸后膜的乙酰膽堿受體不斷地被激活，突觸后神經(jīng)纖維長期處于興奮狀態(tài)，中毒試蟲就表現(xiàn)出興奮狀態(tài)。但是過量的乙酰膽堿又可 造成去極化阻斷 ，從而抑制了神經(jīng)傳導，使昆蟲在中毒后期逐漸地失去活動能力，昏迷死亡。另外，神經(jīng)傳導的阻斷必然會影響到整個生理生化過程的失調(diào)與破壞。 各種有機磷和氨基甲酸酯的抑制能力有很大的不同，這決定于有機磷及氨基甲酸酯的化學特性，如磷原子的親電子性等；還決定于酶的特性， AChE具有多種不同的結合部位，各種有機磷和氨基甲酸酯對他們的結合能力不同，也就影響其催化作用；與 AChE的異構部位的變化也有關，某些化合物的作用可整個改變酶的反應性。所以，各種有機磷酸酯及氨基甲酸的抑制能力不同，在很大程度上決定于它們與哪些部位起作用。 四 、 乙酰膽堿受體毒劑 受體： 細胞膜或細胞內(nèi)能與某些化學物質(zhì)（遞質(zhì)、調(diào)質(zhì)、激素等）特異性結合并誘發(fā)生物效應的特殊生物分子，其本質(zhì)為蛋白質(zhì)。每一種受體均有其相應的激動劑 （ agonist）和拮抗劑（ antagonist）。 神經(jīng)遞質(zhì)的受體： 在神經(jīng)生化領域內(nèi)把對神經(jīng)遞質(zhì)起應答作用的生物活性物質(zhì)稱為 神經(jīng)遞質(zhì)的受體 ，它們是存在于突觸膜上的蛋白質(zhì)分子，其分子鏈鑲嵌在膜內(nèi)，而與配體（遞質(zhì)）結合的位點露在膜外。 神經(jīng)遞質(zhì)必須通過與受體結合后才能發(fā)揮作用。 神經(jīng)遞質(zhì)的受體，兩類： 配體門控離子通道： N型乙酰膽堿受體（ nAChR）、 γ氨基丁酸受體（ GABAR） 甘氨酸受體（ GlyR）； 與信號轉(zhuǎn)導蛋白相偶聯(lián)的受體： 當遞質(zhì)與受體結合后，經(jīng) G蛋白將信號傳給腺苷酸環(huán)化酶，產(chǎn)生CAMP，調(diào)節(jié)細胞代謝，最后引起各種生理效應， 腎上腺素受體、 M型乙酰膽堿受體（ mAChR）、 單胺類受體和視紫紅質(zhì)（ Rh） 等。 將化學信號重新轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘? 四 、 乙酰膽堿受體毒劑 以昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的受體為作用靶標的一類藥劑稱為 受體毒劑 。昆蟲體內(nèi)作為殺蟲靶標的有乙酰膽堿受體、 GABA受體、章魚胺受體這三類主要的神經(jīng)受體，另外還有多巴胺受體、 5羥色胺受體、谷氨酸受體等。 1. 乙酰膽堿受體 （ AChR） 生理功能： 在膽堿能突觸的重要作用在于識別和轉(zhuǎn)導化學信號 ACh。 類別： 煙堿樣受體（ nAChR） 蕈毒堿樣受體 (mAChR) 蕈毒酮樣受體 (muscaronic receptor)。 煙堿樣受體 ： 一種能被煙堿激活的寡聚糖蛋白，位于細胞膜上， 由 4種不同的亞單位（ α 、 β 、 γ 、δ ）構成的五聚體糖蛋白，α 2β γ δ 。 該受體是突觸后膜的配體門控離子通道，當受體與 ACh結合后，其構相改變，直接影響膜電位改變，在突觸后產(chǎn)生一個 快興奮性突觸后電位 （ fast excitatory postsynaptic potential, fepsp）。 蕈毒堿樣受體 (mAChR) 膜受體家族的成員，通過與異三聚體鳥苷酸結合蛋白 (G蛋白 )偶聯(lián)介導信號轉(zhuǎn)導過程，因此又稱 G 蛋白偶聯(lián)受體 (GPCR)。mAChR蛋白分子量約 51 66kD，由 460～ 590個氨基酸殘基組成，N端在胞膜外， C端在胞質(zhì)內(nèi)，七次跨過細胞膜，七個跨膜區(qū)(TM IⅦ )由三個胞外環(huán) (013)和三個胞內(nèi)環(huán) (i13)連接而成。mAChR可以被蕈毒堿（ muscarine）激活，被阿托品阻斷，主要分布在哺乳動物的平滑肌和各種腺體內(nèi)。 mAChR與遞質(zhì)結合后激活腺苷酸環(huán)化酶（或鳥苷酸環(huán)化酶），使腺苷三磷酸（ ATP）（或鳥苷三磷酸 GTP）分解出一個焦磷酸鹽，并同時形成一個環(huán)腺苷酸（ CAMP或環(huán)鳥苷酸CGMP），從而使 CAMP（或 CGMP）的濃度升高， CAMP（或CGMP）又激活蛋白激酶，蛋白激酶使離子通道蛋白磷酸化，實際上是 激活了后突觸膜上的離子通道，在突觸后膜上產(chǎn)生一個 慢興奮性突觸后電位 （ slow excitatory postsynaptic potential, sepsp）。 蕈毒堿樣受體 (mAChR) 蕈毒酮樣受體 (muscaronic receptor) 第三類 AChR。蕈毒酮是一種特殊的激活劑，它對 M–型、 N型受體同樣有效，但對第三類受體有更大的親和力。研究證明，對于蕈毒酮樣受體，三類藥物的作用部位相同，他們之間有競爭性抑制作用。 昆蟲體內(nèi)這三種 AChR都存在，在中樞神經(jīng)中主要是nAChR。 四 、 乙酰膽堿受體毒劑 乙酰膽堿受體 作用靶標 煙堿 巴丹等沙蠶毒素類 氯化煙酰類殺蟲藥劑。 2. 煙堿及煙堿類殺蟲藥劑的作用機理 煙堿： 煙堿被公認是一種乙酰膽堿受體毒劑。 作為乙酰膽堿受體的激活劑，煙堿在低濃度時刺激煙堿樣乙酰膽堿受體，引起興奮，而在高濃度時，它占領受體，使神經(jīng)突觸傳