飼料及其原料中尿素檢測方法的研究進展(編輯修改稿)
2025-02-03 07:18 本頁面
【文章內容簡介】 ，因而可 以在樣品快速測定中予以推廣使用。孫新來和趙慧 (1990)報道，通過 30 多次實驗分析，表明將新鮮黃豆中提取的脲酶應用于其改進的甲酚紅顯色法中，反應在 30 s 開始顯色、尿素檢出率達 100%、靈敏度達 %，與購買商品化脲酶相比具有明顯的經(jīng)濟優(yōu)勢。在《飼料顯微鏡檢與質量控制手冊》一書中，作者推薦測定樣品時同時測定一系列尿素標準溶液 (0~5%)，在 10 12 min 觀察比較樣品與標準溶液的顯色，可以半定量樣品中的尿素濃度。孟丹勝 (1994)詳細介紹了應用甲酚紅檢測飼料中尿素含量的過程及可能遇到的問題和解決方 法，其中主要包括試劑純度和有效性的檢驗，測定結果假陽性和假陰性的排除。 從應用該方法檢測血清尿素的報道來看，臨床研究中已經(jīng)開始將甲酚紅法用于血清尿素的定量測定。鄧福貴和李斌 (1997)報道，以甲酚紅為指示劑酶法測定血清尿素，其反應溶液的吸收峰為 572 nm。反應在 5 min 即可達到平衡，且吸光值在 2h內基本保持穩(wěn)定；尿素濃度在 75 mmol/L 內線性良好；血清中的其他物質及 pH 的適度變化對反應結果不會產(chǎn)生影響，與酶偶聯(lián)速率法同時測定臨床樣品后所得實驗結果具有較高的相關性，作者認為，應用甲酚紅法測定血清尿素的靈敏度要明顯高于鄰甲酚酞絡合劑和甲基麝香草酚藍。根據(jù)上述試驗結果分析，在目前該方法已經(jīng)可以定性半定量測定飼料中尿素的情況下，下一步可以研究將該方法與 DMAB 法中的樣品前處理過程相結合，以定量樣品中的尿素。 3 二乙酰肟法 二乙酰反應又叫丁二酮反應，由 Fearon 于 1939 年首先報道，因此又稱為 Fearon反應。該反應初始為尿素與二乙酰反應，但由于二乙酰溶液不穩(wěn)定，所以目前多使用二 乙酰肟作為反應基礎試劑。其基本反應原理為，二乙酰肟首先在酸性條件下解離為二乙酰和羥胺，然后二乙酰與尿素在加熱的酸性條件下形成紅色二嗪衍生物。此反應產(chǎn)物顏色深淺程度與樣品溶液中尿素含量呈正比，因此可以通過測定特定波長下反應溶液吸光值來定量溶液中的尿素。目前研究已經(jīng)證實向試劑中添加一定濃度硫胺脲、安替比林和金屬離子等可以提高反應溶液和試劑穩(wěn)定性、增加反應靈敏度等。 目前應用該方法檢測飼料中尿素的報道較少，而且該方法在發(fā)展中出現(xiàn)了較多的改良法，各改良法之間在操作上并不完全統(tǒng)一，尤其是大部分方法的試劑組成不一致，造 成了反應產(chǎn)物的多樣性，主要表現(xiàn)在各方法的最適測定波長均不相同，而且目前也少見關于不同試劑組成方法間測定結果相關性的研究，所
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