中藥制劑分析第十章、中藥制劑分析的新方法與新技術簡介(編輯修改稿)
2024-11-15 09:19 本頁面
【文章內容簡介】 分離度 分離度是指將淌度相鄰近的組分分開的能力 Rs=2(tm2_tm1)/W1+W2 式中的 RS為分離度， tm tm2分別為相鄰兩個組分的遷移時間， W W2分別為相鄰二組分的峰寬。 二、常見的毛細管電泳模式 （一）毛細管區(qū)帶電泳（ CZA） 毛細管區(qū)帶電泳的特點是操作簡單，快速，分離調率高，應用范圍廣，從理論上講可用于所有具有不同淌度的荷電粒子的分離，分子量從十幾的小子到十幾萬的生物大分子。 （二）膠束電動毛細管色譜 膠束電動毛細管色譜（ MEKC）是以膠束為假固定相的一種電動色譜，是電泳技術和色譜技術的巧妙結合。 （三）毛細管凝膠電泳 毛細管凝膠電泳（ CGE）是用凝膠物質作為支持物進行的區(qū)帶電泳。它將凝膠電泳對生物大分子的高分離能力和毛細管電泳的快速、微量和定量相結合，成為現(xiàn)代分離度極高的一種電泳分離技術。從理論講，凝膠是毛細管電泳的理想介質，其粘度大、抗對流、能減少溶質的擴散，從而可以限制譜帶的展寬，所得峰形尖銳，柱效高。 （四）毛細管等電聚焦電泳 毛細管等電聚焦電泳（ CIEF）是一項根據(jù)等電點差別進行對蛋白質或多肽分離電泳技術。 CIEF能分離等電點差異小于 。 （五）毛細管等速電泳 毛細管等速電泳（ CITP），是一種“移動界面”電泳技術，在 CITP中采用兩種不同的緩沖溶液系統(tǒng)，一種是前導電解質，充滿整個毛細管柱，另一種稱尾隨電解質，置于一端的電泳槽中，前者的淌度高于任何樣品組分，被分離的組分按其不同的淌度夾于其中，以一個速度移動，實現(xiàn)分離。 （六）毛細管電色譜 毛細管電色譜（ CEC）是將 HPLC中的各種型號的固定相微粒填充到毛細管中作為固定相，以電滲流為流動相的驅動力，由于樣品和固定相之間相互作用的差異而分離。 三、高效毛細管電泳儀 （一）高效毛細管電泳儀的基本結構 主要由毛細管柱、高壓電源、進行系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。 （二）檢測器 紫外－可見光檢測器 紫外檢測器是高效毛細管電泳嘴常見的一種檢測器，原理是根據(jù) LambertBeer定律，常見的有固定波長、可見波長和快速掃描檢測三種類型。固定波長檢測器一般用貢燈作光源，可變波長和快速掃描檢測器常用氘燈、鎢燈作光源，波長范圍 190～ 800nm。 熒光檢測器 熒光檢測器也在柱上進行，熒光檢測尤其激光誘導熒光是目前靈敏度最高的一種檢測方法，有的甚至可對單細胞中的核酸進行定量測定，對于熒光效率較高的物質可達到但分子檢測。 電化學檢測器 根據(jù)檢測器原理的不同又可分為電位檢測器、電導檢測器和安培（電流）檢測器三種。 質譜檢測方法 HPCE應用質譜檢測，靈敏度高，專屬性強，且可提供分子結構信息，對分析復雜大分子混和物樣品更為有用。 （三）進樣技術 常見的最簡單的進行方式主要有電動進樣和氣動進樣，這兩種方式試用于 CZE、 CGE和 MEKC 電動進樣 是利用電滲機制使樣品在外加進樣電壓的作用下，沿毛細管內壁進入毛細管。這兩種方式對粘度較大的樣品更為適用，但重現(xiàn)性較差。 氣動進樣又稱壓差進樣或動力進樣，是通過毛細管兩端差來實現(xiàn)，即利用毛細管虹吸原理進樣，只要將毛細管插入緩沖液，準確記時，即可控制進樣體積。 第四節(jié) 超臨界流體色譜 超臨界流體色譜 是以超臨界流體作為流動相的色譜方法，所謂超臨界流體，是指在高于臨界壓力和臨界溫度時的一種物質狀態(tài)。 一、基本原理 （一）超臨界流體的特征 對于某些純物質來說，具有三相點和臨界點，物質在三相點，氣、液、固三態(tài)處于平衡狀態(tài)，當處于臨界溫度和臨界壓力以上，則不倫施加多大壓力，氣體也不會液化，此時既非氣體，也非液體，而是以超臨界流體形式存在。 （二）、色譜分離原理與效能 SFC以超臨界流體為流動相，以固體吸附劑（如硅膠）或鍵合到載體（或毛細管壁）的高聚物為固定相，混和試樣在 SFC上基于各組分在兩
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1