【文章內(nèi)容簡介】 應(yīng)：僅在組成藥物較少的中藥制劑中使用。 TLC 吸附劑：硅膠，氧化鋁、硅藻土等。 展開劑：氯仿 甲醇 水（ 13： 7： 2）（ 10℃ 以下放置，下層） 氯仿 醋酸乙酯 甲醇 水（ 15： 40： 22： 10）（同上） 顯色劑：不同濃度的 硫酸乙醇 液最常用。 藥物分析學(xué)科 第三節(jié) 三萜皂苷類成分分析 四、定量分析 （一）總成分分析 重量法 ①該法主要用于含皂苷的原料藥質(zhì)量控制。 ②在中藥制劑中，當(dāng)處方中藥味含皂苷類成分較多時(shí)，常用正 丁醇作溶劑，測定 正丁醇浸出物 。 比色法： ①常用顯色劑有：香草醛 硫酸、 香草醛 高氯酸 、醋酐 硫酸、 高氯酸、濃硫酸以及亞甲藍(lán)等。 ②注意測定單體皂苷（或皂苷元）與總皂苷的關(guān)系 藥物分析學(xué)科 第三節(jié) 三萜皂苷類成分分析 四、定量分析 （二）單體成分分析 TLC 薄層洗脫 比色法 薄層掃描法 HPLC HPLCUV：人參皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外區(qū)的末端； 有紫外吸收的甘草酸、遠(yuǎn)志皂苷，靈敏度高。 HPLCELSD：檢測三萜皂苷類成分的應(yīng)用日漸廣泛 五、常見三萜皂苷類成分 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 一、概述 概念：中藥中醌類化合物主要有苯醌 、萘醌、菲醌和 蒽醌 四種類 型 可游離存在，也可與糖結(jié)合成苷，稱為蒽苷。 含醌類成分的常用中藥 丹參酮 Ⅰ 、丹參酮 Ⅱ A 、 Ⅱ B 、隱丹參酮、羥基丹參酮 Ⅱ A等丹參大黃素、大黃酚、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素甲醚、決明素、黃決明素等決明子番瀉葉苷 A 、 B 、 C ， 大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素番瀉葉大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚及其葡萄糖苷等何首烏大黃素、大黃素甲醚首烏藤大黃素、大黃素甲醚、大黃酚、大黃酸及其葡萄糖苷等虎杖蘆薈大黃素苷、異蘆薈大黃素苷蘆薈大黃素、大黃酸、大黃酚、蘆薈大黃素、及其葡萄糖苷、大黃素甲醚、番瀉苷 A 、 B 、C 、 D 、 E 等大黃主要醌類成分中藥名稱主要醌類成分中藥名稱丹參酮 Ⅰ 、丹參酮 Ⅱ 、 Ⅱ 、隱丹參酮、羥基丹參酮 Ⅱ等丹參大黃素、大黃酚、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素甲醚、決明素、黃決明素等決明子番瀉葉苷 、 、 ， 大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素番瀉葉大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚及其葡萄糖苷等何首烏大黃素、大黃素甲醚首烏藤大黃素、大黃素甲醚、大黃酚、大黃酸及其葡萄糖苷等虎杖蘆薈大黃素苷、異蘆薈大黃素苷蘆薈大黃素、大黃酸、大黃酚、蘆薈大黃素、及其葡萄糖苷、 、 、 等大黃主要醌類成分中藥名稱主要醌類成分中藥名稱藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì) 丹參醌 IIA 大黃素 OOC H 3O HO HO H91 0OOO物理性質(zhì)： 存在的形態(tài)，升華性，光不穩(wěn)定性 溶解性： ? 游離醌類多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑，微溶于或不溶于水。 ? 結(jié)合成苷后極性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在熱水中也可溶解，幾乎不溶于苯、乙醚、氯仿等非極性溶劑中。 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 二、結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì) 酸性： 酚羥基的酸性 → 堿提酸沉法 顯色反應(yīng) 羥基蒽醌 +堿 → 橙，紅，紫紅，藍(lán) +Pb2+/Mg2+ → 配合物 10位未取代的 羥基蒽酮化合物 +對亞硝基二甲基苯胺 → 紫，綠，藍(lán)，灰 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 三、定性鑒別 顯色反應(yīng) 升華法 TLC 吸附劑：硅膠 展開劑： 乙酸乙酯 甲醇 水（ 100︰ ︰ ）適于分離蒽醌苷 元和蒽醌苷，不含水或甲醇的混合溶媒適合于分離蒽醌類的苷元。 顯色方法： 噴 堿性試劑 ，噴 醋酸鎂甲醇 液、氨 氣熏 及在 紫外燈 下觀 察熒光，可見光下直接觀察色斑。 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 四、含量測定 游離蒽醌的測定：弱極性溶劑提取后，加堿比色 結(jié)合蒽醌的測定： 極性溶劑提取，水解測苷元 先酸水解后，非 極性溶劑提取苷元后測定 單體成分的含量測定 TLCS HPLCUV 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 四、含量測定 例 牛黃解毒片中游離蒽醌和總蒽醌的測定 — 混合堿液比色法 對照品溶液測定 ：以 1， 8二羥基蒽醌 為對照品 ， 精密稱取 10mg于 100mL量 瓶中 ， 加甲醇溶解并稀釋至刻度 （ 100181。g/mL） 。 取 1mL對照品液于 10mL量 瓶中 ， 在水浴上蒸干 ， 加 5%氫氧化鈉 2%氫氧化銨混合堿 溶解并稀釋至刻 度 ， 放置 1小時(shí) ， 以 5%氫氧化鈉 2%氫氧化銨混合堿液為空白 ， 在 510nm波 長處測定 。 樣品測定： ⑴ 游離蒽醌的測定：取牛黃解毒片 10片 ， 刮去糖衣 ， 精密稱定 重量 ， 研細(xì) 。 稱取一片重 ， 置于具塞三角瓶中 ， 精密加入 氯仿 100mL， 稱 重 ， 水浴上 回流 4小時(shí) ， 取下 ， 加塞 ， 放冷 ， 稱重 ， 用氯仿補(bǔ)充至原重量 ， 濾過 ， 吸取濾液 50mL于分液漏斗中 ， 用 蒸餾水 20mL洗滌 數(shù)次 ， 至水層無 色 ， 棄去水液 。 氯仿層用 5%氫氧化鈉 2%氫氧化銨混合堿液振搖萃取 數(shù) 次 ， 直至混合堿液無色 ， 合并堿液 ， 用 20mL氯仿洗滌 數(shù)次 ， 至氯仿層無 色 ， 棄去氯仿層 。 將混合堿液在水浴上 加熱數(shù)分鐘至氯仿?lián)]盡 ， 冷卻 ， 移 入 100mL量瓶中 ， 并稀釋至刻度 ， 放置 1小時(shí) ， 以 5%氫氧化鈉 2%氫氧化銨 混合堿液為空白 ， 在 510nm處測定 ， 計(jì)算游離蒽醌的含量 （ 相當(dāng)于 1， 8二 羥基蒽醌含量 ） 。 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 四、含量測定 例 牛黃解毒片中游離蒽醌和總蒽醌的測定 — 混合堿液比色法 ⑵ 總蒽醌的測定 ：精密稱取游離蒽醌項(xiàng)下的牛黃解毒片粉一片置于 150mL燒瓶中 ， 加 ， 放冷 ， 加入 氯仿 20mL， 水浴 回流 ， 放冷 ， 吸出氯仿液 ， 再加氯仿 ， 反 復(fù)操作至氯仿無色為止 。 合并氯仿層液 ， 用 蒸餾水洗滌 數(shù)次 ， 至水 層無色 ， 棄去水液 。 氯仿液用 5%氫氧化鈉 2%氫氧化銨 混合堿液振 搖萃取數(shù)次 ， 至堿液無色 ， 合并 ， 用 20mL氯仿洗滌數(shù)次 ， 至氯仿層 無色 ， 棄去氯仿液 。 將堿液置水浴上加熱至氯仿?lián)]盡 ， 冷卻 ， 移入 50mL量瓶中 ， 用混合堿液稀釋至刻度 ， 放置 1小時(shí) ， 以 5%氫氧化 鈉 2%氫氧化銨液為空白 ， 在 510nm處測定 ， 計(jì)算游離蒽醌的含量 （ 相當(dāng)于 1， 8二羥基蒽醌含量 ） 。 ⑶ 結(jié)合蒽醌的計(jì)算： 每片含結(jié)合蒽醌量 =每片含總蒽醌量 — 每片含游離蒽醌量 。 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 四、含量測定 例 復(fù)方丹參片中丹參酮 Ⅱ A含量測定 — 高效液相色譜法 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) ：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇 水 （ 73： 27） 為流動(dòng)相；檢測波長為 270nm。 對照品溶液的制備 ：精密稱取丹參酮 Ⅱ A對照品 10mg， 置 50mL棕色量瓶 中 用甲醇溶解并稀釋至刻度 ， 搖勻 ， 精密量取 5mL， 置 25mL棕色量瓶中 ， 加 甲醇至刻度 ， 搖勻 ， 即得 （ 每 1mL中含丹參酮 Ⅱ A40181。g ） 供試品溶液的制備 ：取本品 10片 ， 糖衣片除去糖衣 ， 精密稱定 ， 研細(xì) ， 取 1g， 精密稱定 ， 精密加入甲醇 25mL， 稱定重量 ， 超聲處理 15分鐘 ， 放冷 ， 再稱定重量 ， 用甲醇補(bǔ)足減失的重量 ， 搖勻 ， 濾過 ， 取續(xù)濾液 ， 即得 。 測定法： 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 10181。L， 注入液相色譜 儀 ， 測定 ， 即得 。 藥物分析學(xué)科 第四節(jié) 醌類成分分析 五、常見醌類成分 化合物名稱 結(jié)構(gòu)式 理化