【文章內(nèi)容簡介】 1. 多克隆抗體（ polyclonal antibody） :天然抗原往往具有多種表位，刺激機體產(chǎn)生的抗體中包含針對多種不同抗原表 位的 Ig，系由多個 B 細胞克隆產(chǎn)生的抗體混合物，故稱為多克隆抗體。多克隆抗體來源廣泛但特異性不高。 2. 單克隆抗體（ monoclonal antibodies, mAb） :由一個 B 細胞克隆產(chǎn)生的識別單一抗原表位的同源抗體，稱為單克隆抗體。 mAb 一般通過雜交瘤技術(shù)制備，具有結(jié)構(gòu)高度均一、抗原結(jié)合部位和同種型相同、純度高、特異性強和效價高等特點。 第五章 補體系統(tǒng) 第一節(jié) 補體概述 補體系統(tǒng)包括 30 余種成分，廣泛存在于血清、組織液、細胞膜表面，是一個具有精密調(diào)控機制的蛋白質(zhì)反應(yīng)系統(tǒng)。血漿中補體成分在被激活前無生物學活性 ㈠補體系統(tǒng)的組成 ⒈補體固有成分 ⒉補體調(diào)節(jié)蛋白 ⒊補體受體 ㈡補體的命名 經(jīng)典、終末途徑按其發(fā)現(xiàn)順序命名；旁路途經(jīng)成分分別稱為 BPHID因子 有酶活性的補體分子，均在其上以橫線表示；裂解片段后綴以英文小寫字母 ㈢補體的生物合成 90%血漿補體成分由肝臟組成 第二節(jié) 補體激活 一、經(jīng)典途徑 1. 參與成分：包括 C1（ C1q、 C1r、 C1s）、 C C C3。 2. 激活物 激活物為 AgAb 免疫復合物（ IC）， Ab 為 IgM 、 IgG IgG2 或 IgG3。每個 C1須同時與兩個以上 Ig 分子的 Fc 段結(jié)合。 3. 活化過程 （ 1）抗原抗體結(jié)合后，抗體構(gòu)型改變，暴露 Fc 段中補體結(jié)合部位， C1q 可主動識別其補體結(jié)合位點，啟動經(jīng)典途徑。當一分子 C1q 中兩個以上的球形頭部與免疫復合物（ IC）中 IgM 或 IgG Fc 段結(jié)合后， C1q 的構(gòu)象發(fā)生改變， C1r 活化，并激活 C1s 的絲氨酸蛋白酶活性； （ 2） C1s 依次裂解 C C2，產(chǎn)生 C4b+C4a 和 C2a +C2b， C2a 與 C4b 結(jié)合成 C4b2a 復合物（ C3轉(zhuǎn)化酶）； （ 3） C3轉(zhuǎn)化酶將 C3 裂解成 C3b+C3a ， C3b 與 C4b2a 結(jié)合形成 C4b2a3b 復合物（ C5轉(zhuǎn)化酶）。 二、旁路途徑 1. 參與成分： C B 因子、 D 因子和 P 因子。 2. 激活物：某些細菌、內(nèi)毒素、酵母多糖等以及凝集的 IgA 和 IgG4等，上述物質(zhì)實際上是為補體激活提供保護性環(huán)境和接觸表面。 3. 活化過程：各種因素產(chǎn)生的 C3b 結(jié)合于激活物表面，再與 B 因子結(jié)合產(chǎn)生 C3bB，在 D 因子作用下產(chǎn)生 C3bBb（旁路 C3 轉(zhuǎn)化酶）。 C3bBb與多份 C3b 結(jié)合形成 C3bBb3b（旁路 C5 轉(zhuǎn)化酶），后者裂解 C5，引起共同的末端效應(yīng)。旁路途徑可以識別自己與非己，具有放大效應(yīng)。 三、 MBL途徑（甘露糖結(jié)合凝集素）激活途徑 1. 參與成分：包括 MBL、 MASP MASP C C C3。 2. 激活物：含 N 氨基半乳糖或甘露糖基的病原體。 3. 活化過 程： MBL 識別和結(jié)合細菌 N 氨基半乳糖或甘露糖基等糖結(jié)構(gòu)后，通過構(gòu)象改變激活與之相連的 MASP。 MASP2 具有類似活化的 C1s的活性，可水解 C4 和 C2，產(chǎn)生經(jīng)典途徑 C3 轉(zhuǎn)化酶 C4b2a，其后反應(yīng)過程同經(jīng)典途徑。 MASP1 直接裂解 C3 生成 C3b，形成旁路途徑 C3 轉(zhuǎn)化酶 C3bBb。 四、補體活化的共同終末過程 三條途徑產(chǎn)生的 C5 轉(zhuǎn)化酶，均可裂解 C5，引發(fā)共同終末效應(yīng)。 C5 轉(zhuǎn)化酶作用于 C5，產(chǎn)生 C5b 和 C5a， C5b 結(jié)合在細胞表面，依次與 C C7 結(jié)合形成 C5b67 復合物，插入細胞膜中 ，再與 C8 結(jié)合形成 C5b678，后者可牢固附著于細胞表面。 C5b678 再與多分子 C9 結(jié)合 C5b6789n，即 MAC（攻膜復合物），導致細胞崩解。 經(jīng)典途徑 旁路途徑 MBL 途徑 激活物 IgG13 或 IgM 與抗原 細菌內(nèi)毒素、酵母多糖、形成的免疫復合物 凝聚的 IgA、 IgG4 MBL 與病原體結(jié)合 起始分子 C1q C3 C C4 C3 轉(zhuǎn)化酶 C4b2b C3bBb C4b2bC C5 轉(zhuǎn)化酶 C4b2b3b C3bnBb、 C3bBb3b C4b2b3b 作用 參與特異性體液免疫，在感染晚期發(fā)揮作用 參與非特異性免疫，在感染早期發(fā)揮作用 參與非特異性免疫，在感染早期發(fā)揮作用 第三節(jié) 補體系統(tǒng)的調(diào)節(jié) ①控制補體活化的啟動 ②補體活性片段發(fā)生自發(fā)性衰變 ③血漿和細胞膜表面存在多種補體調(diào)節(jié)蛋白，通過控制級聯(lián)酶促反應(yīng)過程中酶活性和 MAC 組裝等關(guān)鍵步驟而發(fā)揮調(diào)節(jié)作用 第四節(jié) 補體的生物學意義 一、補體的生物功能 ⒈溶菌、溶解病毒和細胞的細胞毒作用 MAC 溶解紅細胞、血小板和有核細胞；參與宿主抗細菌、抗病毒防御機制 ⒉調(diào)理作用 調(diào)節(jié)吞噬作用是機體抵御全身性細菌、真菌感染的主要機制之一 ⒊免疫黏附 是機體清除循環(huán)免疫復合物的重要機制 ⒋炎癥介質(zhì)作用 ① C3a、 C5a 為過敏毒素，介導局部炎癥反應(yīng) ② C5a 對中性粒細胞等有強趨化作用 二、補體的病理生理學意義 ⒈機體抗 感染防御的主要機制 ⒉參與適應(yīng)性免疫反應(yīng) ⒊補體系統(tǒng)與血液中其他級聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)的相互作用 第六章 細胞因子 細胞因子 :是有免疫原、絲裂原或其他因子刺激細胞所產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，為生物信息分子，具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，促進造血，以及刺激細胞活化、增殖和分化等功能 第一節(jié) 細胞因子的共同特點 ①多為小分子多肽 ②在較低濃度下既有生物學活性 ③通過結(jié)合細胞表面高親和力受體發(fā)揮生物學效應(yīng) ④以自分泌、旁分泌或內(nèi)分泌形式發(fā)揮作用 ⑤具有多效性、重疊性、拮抗性或協(xié)同性 第二節(jié) 細胞因子的分類 ： IL2 通過自分泌作用促進 TC； IL4 為 Th2 型細胞因子； IL6 促炎因子； IL12 促進體細胞增殖分化 ：最早發(fā)現(xiàn)，因具有干擾病毒的感染和復制的功能得名 ：能使腫瘤發(fā)生出血、壞死的細胞因子。分為 TNFα和淋巴毒素 指能刺激多能造血干細胞和不同發(fā)育分化階段的造血祖 細胞增殖、分化的細胞因子有： GMCSF， MCSF， GCSF， EPO， SCF， TPO 如 TGFβ， VEGF， EGF， FGF 第三節(jié) 細胞因子的生物學活性 一、調(diào)節(jié)固有免疫應(yīng)答 二、調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答 ⒈ B 細胞： IL4,5,6,13,腫瘤壞死因子超家族的 BAFF 等可促進 B細胞的活化、增殖和分化為抗體產(chǎn)生細胞 ⒉ T 細胞： IL2,7,18 等活化 T 細胞促進其增殖 Th1→ IL12， IFNγ； Th2→ IL4 三、刺激造血 骨髓和胸腺造血微環(huán)境中產(chǎn)生的細胞因子尤其是集落刺激因子對調(diào)控血細胞增殖分化有重要作用 四、促進凋亡，直接殺傷靶細胞 TNFα， LTα可直接殺傷腫瘤細胞或病毒感染細胞；活化 T 細胞表達的 Fas配體結(jié)合靶細胞的 Fas，誘導其凋亡 五、促進創(chuàng)傷的修復 TGFβ， VEGF， FGF， EGF 第四節(jié) 細胞因子受體 一、細胞因子受體的分類 2.Ⅰ類細胞因子受體家族 3.Ⅱ類細胞因子受體家族 二、可溶型細胞因子受體和細胞因子受體拮抗劑 許多細胞因子的受體除跨膜蛋白形式外，還存在著分泌游離的形式，即可溶性細胞因子受體?？勺鳛榧毎蜃拥倪\載體，也可與相應(yīng)的膜受體競爭配體而起抑制作用?？扇苄约毎蜃邮荏w與某些疾病發(fā)生有關(guān)。 第七章 白細胞分化抗原和黏附分子 第一節(jié) 人白細胞分化抗原 一、人白細胞分化抗原的概念 白細胞分化抗原 :指造血干細胞在分化成熟為不同譜系、各個譜系分化不同階段，以及成熟細胞活化過程中，出現(xiàn)或消失的細胞表面分子。它們大多是穿膜的蛋白或糖蛋白，具有重要的生理功能。在免疫應(yīng)答過程中，它們參與抗原的識別，細胞間相互作用，細胞的活化、增殖、分化和效應(yīng)。 注意概念：雖然名字是白細胞分化抗原，但實際上包含所有血細胞的表面分子 CD 的概念：應(yīng)用以單克隆抗體鑒定為主的聚類分析法，可將分化抗原歸為分化群（ cluster of differentiation ），簡稱為 CD。分化抗原以 CD 加序號命名。 第二節(jié) 黏附分子 黏附分子：是眾多介導細胞間或細胞與細胞外基質(zhì)間互相接觸和結(jié)合的分子的統(tǒng)稱。 粘附分子以配體 受體配對的方式發(fā)揮作用，導致細胞與細胞間、細胞與基質(zhì)間或細胞 基質(zhì) 細胞之間的粘附，并參與細胞間的識別、細胞的活化和信號轉(zhuǎn)導、細胞的增殖與分化、細胞的伸展與移動，是免疫應(yīng)答、炎癥發(fā)生、凝血、腫瘤轉(zhuǎn)移、創(chuàng)傷愈合等一系列重要生理和病理過程的分子基礎(chǔ)。 一、分類 ：主要介導細胞與細胞外基質(zhì)的粘附，以及白細胞與血管內(nèi)皮細胞粘附。都是由αβ兩條鏈經(jīng)非共價鍵組成的異源二聚體 ：成員 L選擇素、 P選擇素、 E選擇素，選擇素識別的是一些寡糖集團，選擇素在白細胞與內(nèi)皮細胞黏附、炎癥發(fā)生、淋巴細胞歸巢中發(fā)揮重要作用。 二、黏附分子的功能 輔助受體和協(xié)同刺激信號 指免疫細胞在接受抗原刺激的同時，還必須有輔助受體提供輔助活化信號才能被激活 程中白細胞與血管內(nèi)皮細胞黏附 是淋巴細胞的定向遷移，包括淋巴細胞再循環(huán)和白細胞向炎癥部位遷移 分子基礎(chǔ)：淋巴細胞歸巢受體（表達在淋巴細胞上的黏附分子），血管地址素（表達在內(nèi)皮細胞上的黏附分子） 第八章 主要組織相容性復合體及其編碼分子 主要組織相容性復合體 (major histopatibility plex, MHC)是一組緊密連鎖的基因群，其編碼的產(chǎn)物稱 MHC 分子，生物學功能是提呈抗原肽，調(diào)控免疫應(yīng)答， 在特異性免疫應(yīng)答中起重要作用。人的 MHC稱為 HLA 基因（復合體），其產(chǎn)物稱為 HLA 分子或 HLA 抗原。 第一節(jié) MHC 結(jié)構(gòu)及其多基因特性 MHC 結(jié)構(gòu)復雜，顯示多基因性、多態(tài)性 多基因性：指復合體由多個緊密相鄰的基因座位所組成，編碼產(chǎn)物具有相同或相似的功能 多態(tài)性：指一個基因座位上存在多個等位基因 一、經(jīng)典的 MHCⅠⅡ類基因 經(jīng)典 HLAⅠ類基因集中在遠離著絲點的一端，按序包括 BCA 三個座位 經(jīng)典 HLAⅡ類基因在復合體中靠近著絲點，結(jié)構(gòu)復雜，順序由 DP、DQ、 DR 三個壓區(qū)組成 二、ⅠⅡ類基因的表達產(chǎn)物 —— HLA 分子 HLA 抗原類別 分子結(jié)構(gòu) 肽結(jié)合結(jié)構(gòu)域 表達特點 組織分布 功能 HLA I 類（ A,B,C） α鏈 45kD Α 1+α 2 共顯性 所有有核細胞表面 識別和提呈內(nèi)源性抗原肽