freepeople性欧美熟妇, 色戒完整版无删减158分钟hd, 无码精品国产vα在线观看DVD, 丰满少妇伦精品无码专区在线观看,艾栗栗与纹身男宾馆3p50分钟,国产AV片在线观看,黑人与美女高潮,18岁女RAPPERDISSSUBS,国产手机在机看影片

正文內(nèi)容

紅霉素產(chǎn)生菌的篩選與鑒定生物技術(shù)畢業(yè)論文(編輯修改稿)

2024-10-01 21:50 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 ZnSO4: 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑 有限公司 ,分析純; NaCl:北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,分析純; NaOH:北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,分析純; CuSO4: 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司 ,分析純; Cu2O:北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,分析純; KMnO4:北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,分析純; KI:北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司,分析純 。 試驗(yàn)儀器 試管,移液管,培養(yǎng)皿,玻璃棒,燒杯,錐形瓶,量筒,堿式滴定管,酸式滴定管,膠頭滴管,蒸發(fā)皿,石棉網(wǎng),小漏斗,試管架,試管夾 ,漏斗,漏斗架 ; 電子天平 (FA2104;上海恒平科學(xué)儀器有限公司 ); 分光光度計(jì) (VIS7220N;北京瑞利分析儀器公司 ); 電熱恒溫水浴鍋 (GSY10;北京市醫(yī)療設(shè)備廠 ); 臺(tái)式高速離心機(jī) (TGL20;武漢中科儀器發(fā)展有限公司 ); 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 (RE5299;上海亞榮生化儀器廠 ); 索氏提取器 (SXT02;上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司 ); 6 凱式定氮裝置 (SBD100;北京市通潤源機(jī)電技術(shù) 有限公司 ); 調(diào)溫電爐 (SXL1200;上海大恒光學(xué)精密機(jī)械有限公司 ); 酸度計(jì) (MP9000;上海大恒光學(xué)精密機(jī)械有限公司 ); 水浴鍋 (DZKW), 100 mL 三角瓶 , 10 mL 刻度吸管, 25 mL 刻度吸管,酸式滴定管, 100 mL 容量瓶, 250 mL 錐形瓶, 大試管: 9 支,容量瓶: 50 mL2 ,刻度吸管: 1 mL3 , 2 mL1 ,5 mL1 。 試驗(yàn)方法 紅霉素發(fā)酵屬于好氧發(fā)酵過程,在發(fā)酵過程中,需不斷通入無菌空氣并攪拌,以維持一定的罐壓和溶氧。發(fā)酵過程中應(yīng)嚴(yán)格控制發(fā)酵溫度、發(fā)酵液還原糖量、 pH 值、溶氧量及發(fā)酵液粘度等,以便紅色糖多孢菌能夠大量合成紅霉素并排至胞外。生產(chǎn)中還要加入消泡劑以控制泡沫。在發(fā)酵期間每隔一定時(shí)間也要取樣進(jìn)行分析、鏡檢及無菌試驗(yàn),檢測生產(chǎn)狀況,分析或控制相關(guān)參數(shù)。 發(fā)酵液的預(yù)處理和過濾 發(fā)酵液中除含有約 %的紅霉素外,絕大部分是菌絲體、蛋白質(zhì)、色素、油等雜質(zhì),會(huì)給提取和精制帶來很大的困難。尤以蛋白質(zhì)和油等的存在,在溶媒萃取時(shí)將產(chǎn)生嚴(yán)重的乳化現(xiàn)象。一般采用硫酸鋅沉淀蛋白質(zhì),目的是使菌絲結(jié)成團(tuán)加快過濾速度。因?yàn)榱蛩徜\呈酸性,為了防止紅霉素局部酸解而被破壞,我們一般要 用 NaoH 來調(diào)節(jié) pH 值。在處理濾渣時(shí)也會(huì)遇到一些問題,因?yàn)殇\離子是有毒性的,所以我們改用堿式氯化鋁處理濾渣。經(jīng)過預(yù)處理的發(fā)酵液便可進(jìn)行過濾去除菌絲體及沉淀的蛋白質(zhì)。紅霉素發(fā)酵液過濾采用板框過濾機(jī)。 紅霉素的提取 紅霉素分子結(jié)構(gòu)中有一個(gè)二甲基氨基官能團(tuán),是一個(gè)弱堿,在酸性條件下與某些酸會(huì)形成鹽,如紅霉素乳酸鹽。如果是純紅霉素堿那么在水中溶解度較小,并且會(huì)隨溫度升高而減小,在 55℃時(shí)溶解度最小,當(dāng) pH> 時(shí)紅霉素基本以游離堿的形式存在,能溶于乙酸丁酯中,當(dāng) pH< 時(shí),紅霉素以鹽的形式存在,其 在水中的溶解度隨 pH 降低而迅速增大。提取方法是在乙酸丁酯及水溶液(乙酸緩沖液)中反復(fù)萃取。 發(fā)酵方法 A.搖瓶培養(yǎng) 用種子培養(yǎng)冷凍管取紅霉素菌種接種于 30 度母斜面上,養(yǎng) 7d 接種于 30 度子斜面繼續(xù)培養(yǎng), 7d 后接種于一級(jí)種子瓶。 30000r/min 培養(yǎng) 4856h 轉(zhuǎn)入二級(jí)種子瓶 30000r/min 繼 7 續(xù)培養(yǎng) 2630h,發(fā)酵培養(yǎng)將上培養(yǎng)好的二級(jí)種子接種于發(fā)酵瓶, 30000r/min 培養(yǎng) 16h。搖瓶裝液量為 50ml/250ml,每組結(jié)果均為 5只搖瓶的平均效價(jià)。 B.發(fā)酵罐培養(yǎng) 種子培養(yǎng)的步驟與搖瓶培養(yǎng)相同,發(fā)酵培養(yǎng)就是將上面培養(yǎng)好的二級(jí)種子接種于 3L發(fā)酵罐自動(dòng)發(fā)酵,同時(shí)控制發(fā)酵罐的發(fā)酵溫度、 PH、 接種量、攪拌速度和溶解氧等條件,培養(yǎng) 16h。 8 第三章 試驗(yàn)結(jié)果 選因素、定水平 ( 1)僅超聲波誘變法定水平 分別取 10ml 出發(fā)菌株的菌懸液于 30 支 25ml 的試管中,放入超聲波清洗器中,水淹沒至試管 2/3 左右,進(jìn)行超聲波處理。超聲波功率分別為 200W、 300W、400W,誘變時(shí)間分別為 0min、 3min、 6min、 9min、 12min、 15min、 18min、 2min、24min、 27min、 30min。 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn):隨著超聲波誘變時(shí)間的增長,紅色糖多胞菌的致死率都在不斷的增加;在 3 個(gè)不同功率的超聲波誘變中,超聲波功率為 200w 時(shí),隨著誘變時(shí)間的增長,致死率上升得不明顯,誘變效果不顯著;超聲波功率為400w時(shí),紅色糖多胞菌很快就全部致死,反而沒有達(dá)到誘變效果;超聲波功率為 300w時(shí),誘變時(shí)間 20min,致死率接近 83%,且平板上的紅色糖多胞菌菌落大小不均一,誘變效果較好。 ( 2)僅 LiCl 誘變法定水平 Licl 誘變法定水平的實(shí)驗(yàn)采用兩種方法:一是在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鋰;二是用不同濃度的氯化鋰處理孢子后在培養(yǎng)。根據(jù)菌株致死率來判斷誘變效果。 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:第一種方法能取得比較好的致死效果,可能是因?yàn)樵谂囵B(yǎng)的過程中,培養(yǎng)基中始終有氯化鋰存在,對(duì)紅色糖多胞菌起著長期誘變的作用,因此誘變效果更好。隨著氯化鋰濃度的提高,致死率也隨著提高,當(dāng)氯化鋰濃度超過 %時(shí),紅色糖多胞菌的致死率增加幅度不在顯著,因此在誘變 中氯化鋰濃度確定為 %。在正交實(shí)驗(yàn)中,氯化鋰濃度分別選 %、 %、 %三個(gè)水平,并分別采用兩種方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體情況選定的因素及其水平: 因素 A:超聲波功率( W) 水平: 200W 300W 400W 因素 B:誘變時(shí)間( min) 9 水平: 10min 20min 30min 因素 C:LiCl 濃度( %) 水平: 因素 D: LiCl 使用方法 水平: 培養(yǎng)基中加入 LiCl 孢子懸浮液里 4h 同時(shí)處理 可以確定此實(shí)驗(yàn)為四因素、三水平實(shí)驗(yàn),可以選擇正交表 L9(34) 項(xiàng)目 1 2 3 4 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 表頭設(shè)計(jì) 水平 A、 超聲波功率 ( W) B、誘變時(shí)間 ( min) C、 Licl 濃度 ( %) D、 Licl 使用方法 1 200 10 培養(yǎng)基中加 Licl 2 300 20 孢子懸浮液處理 3 400 30 同時(shí)處理 頂行:實(shí)驗(yàn)考慮的因素 最左列:實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的次數(shù),每一列代表試驗(yàn)中安排的各個(gè)因素的水平 實(shí)驗(yàn)方案及其實(shí)驗(yàn)結(jié)果 水平 A、超聲波功率 ( W) B、誘變時(shí)間 ( min) C、 Licl 濃度 ( %) D、 Licl 使用方法 1 200 10 培養(yǎng)基中加 Licl 2 300 20 孢子懸浮液處理 3 400 30 同時(shí)處理 10 試驗(yàn)號(hào) A B C D 生物效價(jià)( ug) 1 1 1 1 1 4410 2 1 2 2 2 4464 3 1 3 3 3 3221 4 2 1 2 3 3100 5 2 2 3 1 4702 6 2 3 1 2 4649 7 3 1 3 2 3321 8 3 2 1 3 3617 9 3 3 2 1 3867 試驗(yàn)號(hào) A B C D 生物效價(jià)( ug) 1 1 1 1 1 4410 2 1 2 2 2 4464 3 1 3 3 3 3221 4 2 1 2 3 3100 5 2 2 3 1 4702 6 2 3 1 2 4649 7 3 1 3 2 3321 8 3 2 1 3 3617 9 3 3 2 1 3867 K1 4032 3610 4225 4326 35351 K2 4150 4261 3810 4145 K3 3602 3912 3748 3313 R 548 651 477 1013 11 ( 1)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中重要數(shù)據(jù)的計(jì)算方法: K1即第 j列上水平號(hào)為 1的各實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和的平均值 K2 即第 j列上水平號(hào)為 2 的各實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和的平均值 K3 即第 j列上水平號(hào)為 3 的各實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和的平均值 R 即第 j列的極差或其所在因素的極差 ( 2)計(jì)算公式: Rj=MAX{Kj}MIN{kj} R 值(極差)的作用,一般來說,各列的 R 值(極差)是不相等的,這說明各因素改變時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響是不相同的。極差越大,說明這個(gè)因素的水平的改變對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響越大。極差最大的那一列的因素,就是因素的水平改變對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的因素,也就是最主要的因素。本題中: DBAC,即因素的影響程度為:氯化鋰使用方法>超聲波誘變時(shí)間 >超聲波功率>氯化鋰濃度。 (3)
點(diǎn)擊復(fù)制文檔內(nèi)容
法律信息相關(guān)推薦
文庫吧 www.dybbs8.com
備案圖片鄂ICP備17016276號(hào)-1