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aa發(fā)酵工藝學(編輯修改稿)

2024-09-26 16:50 本頁面
 

【文章內容簡介】 稱為母體抗體( materal antibody)或母源抗體。 三、根據與抗原反應的性質分類 完全抗體( plete antibody):與抗原結合后可出現(xiàn)沉淀反應、凝集反應等可見反應。 不完全抗體( in plete antibody):又稱封閉抗體,能與抗原結合,不出現(xiàn)可見反應。 封閉抗體與抗原結合后,影響完全抗體對抗原的結合和破壞作用,對抗原起到保護作用。 四、根據抗體作用的對象分類 抗菌抗體( antibacterial antibody):能與相應細菌或其有效成分結合的抗體 抗病毒抗體( antiviral antibody):能與相應病毒結合的抗體,包括中和抗體,血凝抑制抗體等; 抗外毒素抗體( antitoxin antibody):能中和細菌外毒素的抗體,對由破傷風、肉毒梭菌等所產生的外毒素引起的疾病,有治療作用; 溶血素( hemolysin):能與紅細胞結合的抗體 抗抗體( antiantibody):以提純的免疫球蛋白免疫異種動物制備的一種抗體。 抗原 —— 抗體 —— 抗抗體 第七節(jié) 人工制備抗體的種類 一、多克隆抗體( polyclonal antibody, PcAb) 用抗原物質多次免疫動物,采取血液,分離血清,即為抗血清或免疫血清,該血清中含有多克隆抗體。 由 2 個以上的 B 細胞克隆產生的抗體 。 如大腸桿菌有菌體抗原、鞭毛抗原和莢膜抗原三中抗原成分,而每一種抗原成分又有幾個抗原決定簇,每一個決定簇都能刺激一個相對應的 B 細胞分化增殖,產生抗體,故血清中是多種抗體的混合物。 二、單克隆抗體( monoclonal antibody, McAb) 1975年,英國劍橋大學的 Kohler、 Milstein 創(chuàng)立了淋巴細胞雜交瘤技術,育成了一株雜交瘤細胞,產生了高純度的單一抗體 —— McAb。 被稱為劃時代的生物學革命, 1984年獲得諾貝爾獎。 克?。?clone):指由一個祖先細胞分裂繁殖而形成的一個細胞系 ,系內細胞基因和性狀 14 均相同。 McAb:由一個識別一種抗原決定簇的 B 細胞克隆產生的同源抗體,稱為單克隆抗體。 單克隆抗體技術的基本原理及生產的基本過程 ( 1)、小鼠骨髓瘤細胞在體內、外可無限增殖,但不能分泌抗體; ( 2)、經抗原免疫的小鼠脾細胞( B 細胞)能產生大量抗體,但在體外不能無限增殖; ( 3)、用 PEG將免疫脾細胞(使 B 細胞帶有某一抗原決定簇的信息,能產生針對一種抗原決定簇的抗體)與骨髓瘤細胞融合,在 HAT 選擇培養(yǎng)基中,只有融合的雜交瘤細胞能生長; 未融合的骨髓瘤細胞在 HAT 培養(yǎng)基中不能合成 DNA,而脾細胞不能在體外存活,那么,在選擇培養(yǎng)基上生長的細胞都是融合后的細胞。 ( 4)、每個雜交瘤是用一個 B 細胞融合而產生的克?。? 每個融合細胞都是由一個 B 細胞和一個骨髓瘤細胞融合而形成的,有多個融合細胞,如何獲得單一的融合細胞。 ( 5)、經抗體檢測、反復克隆和培養(yǎng),篩選出能產生抗體的單一的穩(wěn)定的雜交瘤細胞; ( 6)、單克隆抗體的生產 小鼠腹腔中繁殖,體外細胞培養(yǎng)等方法,生產大量的單克隆抗體。 單克隆抗體的優(yōu)點 ( 1)、單一特異性,與一個抗原決定簇反應; 高特異性 ( 2)、可重復性,抗體結構高度均一; 高純度 ( 3)、效價高、成本低并可大量生產; 單克隆抗體的應用 ( 1)、血清學診斷 用單克隆抗體可提高血清學方法的特異性、重復性、穩(wěn)定性和敏感性,少或無血清交叉反應。 ( 2)、免疫治療 用單克隆抗體能逐個查明腫瘤抗原的各個成分,將毒素或藥物與單抗(抗腫瘤細胞抗原)連接在一起,免疫毒素或生物導彈。 ( 3)、免疫學研究 :利用單克隆抗體可以更深刻、更全面的分析抗原、抗體構造。 第三章 免疫系統(tǒng)( immune system) 在解剖學上,免疫系統(tǒng)是由淋巴器官及淋巴組織組成。 在功能上,是由各種 免疫細胞的協(xié)同作用完成的。 淋巴組織及免疫細胞分布于全身各處,以完成適宜的免疫防御功能。 免疫系統(tǒng)是機體執(zhí)行免疫功能的組織機構,是產生免疫應答的物質基礎。 免疫系統(tǒng)主宰機體的免疫功能,它們的存在和功能的正常,是維持機體免疫力相對穩(wěn)定的保證,任何部分的缺陷或過度增生,都可引起免疫功能失調,導致抗傳染能力的喪失,或引起 15 各種類型的免疫性疾病。 第一節(jié) 免疫器官( immune an) 免疫器官:是淋巴細胞和其它免疫細胞發(fā)生、分化、成熟、定居和增殖以及產生免疫應答的場所。 執(zhí)行生成免疫細胞的功能。 一 、中樞免疫器官 特點: 形成于胚胎早期; 是免疫細胞發(fā)生、分化和成熟的場所; 切除,影響免疫功能; 逐漸萎縮。 (一)、骨髓( bone marrow) 是哺乳動物的造血和免疫器官; 骨髓是骨腔中綿軟、鮮紅的組織,是成人各種血液細胞再生的場所。成人骨髓總量約為23 升,占體重的 25%。 骨髓中的多能干細胞是紅細胞、淋巴細胞、粒細胞、單核巨噬細胞群的起始細胞; 骨髓也是人類和哺乳動物 B 淋巴細胞成熟的場所。 骨髓功能缺損,將嚴重損害機體的造血和免疫功能。 (二)、胸腺( thymus) 哺乳動物 位于胸腔前部縱隔內,鳥類在頸靜脈一側呈多葉排列。 位于頸部氣管的兩側或胸腔的前下方 是 T 淋巴細胞分化和成熟的場所; 分化 血流 胸腺激素 血流 多能干細胞 —— → 淋巴干細胞 —— → 胸腺 ———— → T 細胞 —— →外周免疫器 官的胸腺依賴區(qū)定居 T 淋巴細胞:胸腺依賴性淋巴細胞 —— Thymus dependent lymphocyte,簡稱 T 細胞。 胸腺的免疫功能 ( 1)、誘導 T 淋巴細胞成熟: ( 2)、產生胸腺激素: 胸腺上皮細胞分泌的,為小分 子的肽類,有胸腺血清因子、胸腺素、胸腺生成素、胸腺體液因子等,對誘導 T 細胞成熟有重要作用,還有免疫調節(jié)作用。 (三)、法氏囊( bursa of Fabricius) 16 又稱腔上囊,是禽類特有的免疫器官,位于泄殖腔的背側; 球形結構,分皮質和髓質,雞 34 月令最大( 34 克) 是 B 淋巴細胞分化、成熟的場所; 分化 囊激素 血循,淋循 多能干細胞 —— → 淋巴干細胞 —— → 腔上囊 ———— → B 細胞 ———— → 外周 免疫器官的囊依賴區(qū)(非胸腺依賴區(qū))定居 B 淋巴細胞:囊依賴性淋巴細胞 —— Bursa dependent ymphocyte 骨髓 依賴性淋巴細胞 —— Bone marrow dependent ymphocyte 某些藥物、病毒可造成法氏囊萎縮或損害。 體液免疫功能降低,影響 MD、 ND 等疫苗的免疫效果。 二、外周免疫器官 先天性低免疫球蛋白癥遺傳病患者, 非胸腺依賴區(qū) 缺陷;先天性胸腺不發(fā)育患者, 胸腺依賴區(qū) 缺陷。 大家有體會,口腔炎,牙周炎,咽喉炎等,下頜淋巴結腫、痛 —— 淋巴細胞 分化增殖,功能旺盛體積增大,數(shù)量增加。 特點: 形成于胚胎晚期; 是 T、 B 細胞定居、增殖的場所; 是抗原刺激產生免疫應答的場所; 切除后,一般不影響免疫功能; 存在于整個成年期。 組成: 全身的淋巴結,脾臟,淋巴小結(消化道、呼吸道和泌尿生殖道)。 (一)、淋巴結( lymph node) 分布于淋巴循環(huán)經路的各個部位,有淋巴循環(huán)及血液循環(huán)雙重系統(tǒng)。 結構: 皮質:淺皮質區(qū):有許多淋巴小結,其中央為生發(fā)中心; 深皮質區(qū):副皮質區(qū)。 髓質:髓索: B 細胞,漿細胞,巨噬細胞; 髓竇:巨噬細胞。 T、 B 細胞的分 布 T 細胞:主要分布在副皮質區(qū) —— 胸腺依賴區(qū) B 細胞:主要分布于生發(fā)中心、皮質淺層和髓索 —— 非胸腺依賴區(qū) 17 免疫功能: 具有過濾和清除異物的作用; 是產生免疫應答的場所。 淋巴結內有淋巴循環(huán)及血液循環(huán)雙重系統(tǒng)。經淋巴結內的淋巴循環(huán),將體表或內臟的病原體及異物引流至局部淋巴結,淋巴液在淋巴竇內流動緩慢,使其中的巨噬細胞有足夠時間吞噬清除病原體及異物,再將“清潔”的淋巴液由輸出淋巴管輸出,從而在淋巴結內完成過濾作用。 巨噬細胞將病原體處理,將抗原信息傳達給 T、 B 細胞,使其分化、增殖;效應 T 細胞、抗體可經血液循 環(huán)到病原微生物所在部位。 淋巴管連接外周免疫器官,形成遍布全身的淋巴管網絡,其分布與血管幾乎完全平行。淋巴管網絡的主要生理功能是回收經毛細血管網絡滲如組織的體液和營養(yǎng)物質,并使淋巴細胞在體內的循環(huán)成為可能。人體每天從淋巴網絡回收的淋巴液達 23 升。淋巴液通過引流淋巴管進入初級和次級淋巴結之后匯入主淋巴管,經胸導管進入左鎖骨下靜脈和血液循環(huán)。 機體局部感染常會引起引流淋巴結的腫脹,其部分原因是淋巴結中的抗原特異性 T 和 B 細胞的迅速擴增。此外, T 細胞被活化后所分泌的各種淋巴因子會造成髓竇中巨噬細胞的聚集和體液的直 溜,導致淋巴結的進一步腫脹。外來抗原被徹底清除之后,活化 T 和 B 細胞因失去了抗原的持續(xù)刺激而凋亡,淋巴結方得以恢復。 (二)、脾臟( spleen) 結構 白髓:脾小體:由密集的淋巴細胞組成,其中心為生發(fā)中心; 中央動脈:貫穿于白髓的小動脈。 紅髓:脾索: B 細胞,漿細胞,巨噬細胞; 脾竇:血細胞。 位于白髓的周圍,脾內有血液循環(huán),但無淋巴循環(huán)。 T、 B 細胞的分布 T 細胞:中央動脈周圍; B 細胞:生發(fā)中心,脾索; 脾中 T 細胞約占 35%, B 細胞約占 55%,約 10%為巨噬細胞。 免疫功能 ( 1) 濾過血液作用 :凈化血液 90%的循環(huán)血液經過脾臟,脾索及脾竇中的 巨噬細胞 能有效直接清除病原體及衰老的紅細胞,而起重要的“過濾作用”。 ( 2)免疫應答的重要場所: 當被血流來的抗原刺激后, T、 B 細胞經克隆擴增,數(shù)目明顯增加(脾體積相應地擴大),產生致敏 T 細胞和漿細胞,建立細胞和體液免疫。 是體內產生抗體的主要器官(骨髓也是產生抗體的主要器官)。 18 ( 3)滯留淋巴細胞的作用:當抗原進入時,循環(huán)中的淋巴細胞被滯留。 ( 4)產生吞噬細胞增強激素:小分子肽類( 4 個氨基酸組成),具有增強吞噬細胞和中性粒細胞的吞噬作用。 (三)、其它 淋巴組織 哈德氏腺:位于眼窩中腹部,眼球后部;是禽類特有。 雛雞滴眼免疫,不受母源抗體的干擾。 扁桃體:見于雞,鵝、鴨有兩對淋巴結(頸胸和腰淋巴結)。 粘膜相關淋巴組織: 消化道、呼吸道和泌尿生殖道黏膜下層的許多淋巴小結和彌散淋巴組織,如腸道黏膜集合淋巴結,這些淋巴組織均含有豐富的 T 細胞、 B 細胞及巨噬細胞( B 細胞比 T 細胞多),參與局部的黏膜免疫作用。 抗體是由外周淋巴組織產生的,主要有:骨髓,脾臟,淋巴結,扁桃體,彌散淋巴組織。 第二節(jié) 免疫細胞 免疫細胞( immunocyte):所有直接 或間接參與免疫應答的細胞 凡是參與機體免疫應答或與免疫應答有關的細胞 免疫細胞的種類多,各司其職,巧妙配合,相互制約,為清除機體的異物共同發(fā)揮作用。 淋巴細胞: T 細胞, B 細胞, K 細胞, NK細胞; 輔佐細胞(抗原遞呈細胞):單核細胞,巨噬細胞,樹突狀細胞; 粒細胞:嗜中性粒細胞,嗜堿性粒細胞,嗜酸性粒細胞,肥大細胞。 免疫活性細胞( immunopetent cell, ICC):受抗原刺激后能分化增殖,產生特異性免疫應答的免疫細胞。 輔佐細胞 (accessory,A cells):在免疫應答過程中起重 要的輔佐作用。 抗原遞呈細胞( antigenpresenting cells, APC):具有捕獲和處理抗原以及能把抗原遞呈給免疫活性細胞的功能。 一、淋巴細胞 在體內分布廣、數(shù)量多,除中樞神經系統(tǒng)外,所有組織均存在。人體內淋巴細胞的總數(shù)與腦細胞或者肝細胞數(shù)量相當。以脾臟和淋巴結等外周免疫器官為“駐扎營地”,在血液和淋巴系統(tǒng)之間不斷循環(huán)。人占白細胞總數(shù)的 2535%, X 109/L。 (一)、 T 細胞 T 細胞的來源與分化 19 1030d 血流 造血干細胞 — →淋巴干細胞 — →前體(祖) T 細胞 — →胸腺 —— → T 細胞 — →外周免疫 抗原 記憶細胞(長壽) ↓ ↗ 器官的胸腺依賴區(qū)定居( T 細胞) — →淋巴母細胞 — →效
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