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正文內(nèi)容

aa發(fā)酵工藝學(xué)(編輯修改稿)

2024-09-26 16:50 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 稱為母體抗體( materal antibody)或母源抗體。 三、根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)分類 完全抗體( plete antibody):與抗原結(jié)合后可出現(xiàn)沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)等可見(jiàn)反應(yīng)。 不完全抗體( in plete antibody):又稱封閉抗體,能與抗原結(jié)合,不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。 封閉抗體與抗原結(jié)合后,影響完全抗體對(duì)抗原的結(jié)合和破壞作用,對(duì)抗原起到保護(hù)作用。 四、根據(jù)抗體作用的對(duì)象分類 抗菌抗體( antibacterial antibody):能與相應(yīng)細(xì)菌或其有效成分結(jié)合的抗體 抗病毒抗體( antiviral antibody):能與相應(yīng)病毒結(jié)合的抗體,包括中和抗體,血凝抑制抗體等; 抗外毒素抗體( antitoxin antibody):能中和細(xì)菌外毒素的抗體,對(duì)由破傷風(fēng)、肉毒梭菌等所產(chǎn)生的外毒素引起的疾病,有治療作用; 溶血素( hemolysin):能與紅細(xì)胞結(jié)合的抗體 抗抗體( antiantibody):以提純的免疫球蛋白免疫異種動(dòng)物制備的一種抗體。 抗原 —— 抗體 —— 抗抗體 第七節(jié) 人工制備抗體的種類 一、多克隆抗體( polyclonal antibody, PcAb) 用抗原物質(zhì)多次免疫動(dòng)物,采取血液,分離血清,即為抗血清或免疫血清,該血清中含有多克隆抗體。 由 2 個(gè)以上的 B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗體 。 如大腸桿菌有菌體抗原、鞭毛抗原和莢膜抗原三中抗原成分,而每一種抗原成分又有幾個(gè)抗原決定簇,每一個(gè)決定簇都能刺激一個(gè)相對(duì)應(yīng)的 B 細(xì)胞分化增殖,產(chǎn)生抗體,故血清中是多種抗體的混合物。 二、單克隆抗體( monoclonal antibody, McAb) 1975年,英國(guó)劍橋大學(xué)的 Kohler、 Milstein 創(chuàng)立了淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù),育成了一株雜交瘤細(xì)胞,產(chǎn)生了高純度的單一抗體 —— McAb。 被稱為劃時(shí)代的生物學(xué)革命, 1984年獲得諾貝爾獎(jiǎng)。 克?。?clone):指由一個(gè)祖先細(xì)胞分裂繁殖而形成的一個(gè)細(xì)胞系 ,系內(nèi)細(xì)胞基因和性狀 14 均相同。 McAb:由一個(gè)識(shí)別一種抗原決定簇的 B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體,稱為單克隆抗體。 單克隆抗體技術(shù)的基本原理及生產(chǎn)的基本過(guò)程 ( 1)、小鼠骨髓瘤細(xì)胞在體內(nèi)、外可無(wú)限增殖,但不能分泌抗體; ( 2)、經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞( B 細(xì)胞)能產(chǎn)生大量抗體,但在體外不能無(wú)限增殖; ( 3)、用 PEG將免疫脾細(xì)胞(使 B 細(xì)胞帶有某一抗原決定簇的信息,能產(chǎn)生針對(duì)一種抗原決定簇的抗體)與骨髓瘤細(xì)胞融合,在 HAT 選擇培養(yǎng)基中,只有融合的雜交瘤細(xì)胞能生長(zhǎng); 未融合的骨髓瘤細(xì)胞在 HAT 培養(yǎng)基中不能合成 DNA,而脾細(xì)胞不能在體外存活,那么,在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)胞都是融合后的細(xì)胞。 ( 4)、每個(gè)雜交瘤是用一個(gè) B 細(xì)胞融合而產(chǎn)生的克?。? 每個(gè)融合細(xì)胞都是由一個(gè) B 細(xì)胞和一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的,有多個(gè)融合細(xì)胞,如何獲得單一的融合細(xì)胞。 ( 5)、經(jīng)抗體檢測(cè)、反復(fù)克隆和培養(yǎng),篩選出能產(chǎn)生抗體的單一的穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞; ( 6)、單克隆抗體的生產(chǎn) 小鼠腹腔中繁殖,體外細(xì)胞培養(yǎng)等方法,生產(chǎn)大量的單克隆抗體。 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) ( 1)、單一特異性,與一個(gè)抗原決定簇反應(yīng); 高特異性 ( 2)、可重復(fù)性,抗體結(jié)構(gòu)高度均一; 高純度 ( 3)、效價(jià)高、成本低并可大量生產(chǎn); 單克隆抗體的應(yīng)用 ( 1)、血清學(xué)診斷 用單克隆抗體可提高血清學(xué)方法的特異性、重復(fù)性、穩(wěn)定性和敏感性,少或無(wú)血清交叉反應(yīng)。 ( 2)、免疫治療 用單克隆抗體能逐個(gè)查明腫瘤抗原的各個(gè)成分,將毒素或藥物與單抗(抗腫瘤細(xì)胞抗原)連接在一起,免疫毒素或生物導(dǎo)彈。 ( 3)、免疫學(xué)研究 :利用單克隆抗體可以更深刻、更全面的分析抗原、抗體構(gòu)造。 第三章 免疫系統(tǒng)( immune system) 在解剖學(xué)上,免疫系統(tǒng)是由淋巴器官及淋巴組織組成。 在功能上,是由各種 免疫細(xì)胞的協(xié)同作用完成的。 淋巴組織及免疫細(xì)胞分布于全身各處,以完成適宜的免疫防御功能。 免疫系統(tǒng)是機(jī)體執(zhí)行免疫功能的組織機(jī)構(gòu),是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ)。 免疫系統(tǒng)主宰機(jī)體的免疫功能,它們的存在和功能的正常,是維持機(jī)體免疫力相對(duì)穩(wěn)定的保證,任何部分的缺陷或過(guò)度增生,都可引起免疫功能失調(diào),導(dǎo)致抗傳染能力的喪失,或引起 15 各種類型的免疫性疾病。 第一節(jié) 免疫器官( immune an) 免疫器官:是淋巴細(xì)胞和其它免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟、定居和增殖以及產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。 執(zhí)行生成免疫細(xì)胞的功能。 一 、中樞免疫器官 特點(diǎn): 形成于胚胎早期; 是免疫細(xì)胞發(fā)生、分化和成熟的場(chǎng)所; 切除,影響免疫功能; 逐漸萎縮。 (一)、骨髓( bone marrow) 是哺乳動(dòng)物的造血和免疫器官; 骨髓是骨腔中綿軟、鮮紅的組織,是成人各種血液細(xì)胞再生的場(chǎng)所。成人骨髓總量約為23 升,占體重的 25%。 骨髓中的多能干細(xì)胞是紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞群的起始細(xì)胞; 骨髓也是人類和哺乳動(dòng)物 B 淋巴細(xì)胞成熟的場(chǎng)所。 骨髓功能缺損,將嚴(yán)重?fù)p害機(jī)體的造血和免疫功能。 (二)、胸腺( thymus) 哺乳動(dòng)物 位于胸腔前部縱隔內(nèi),鳥(niǎo)類在頸靜脈一側(cè)呈多葉排列。 位于頸部氣管的兩側(cè)或胸腔的前下方 是 T 淋巴細(xì)胞分化和成熟的場(chǎng)所; 分化 血流 胸腺激素 血流 多能干細(xì)胞 —— → 淋巴干細(xì)胞 —— → 胸腺 ———— → T 細(xì)胞 —— →外周免疫器 官的胸腺依賴區(qū)定居 T 淋巴細(xì)胞:胸腺依賴性淋巴細(xì)胞 —— Thymus dependent lymphocyte,簡(jiǎn)稱 T 細(xì)胞。 胸腺的免疫功能 ( 1)、誘導(dǎo) T 淋巴細(xì)胞成熟: ( 2)、產(chǎn)生胸腺激素: 胸腺上皮細(xì)胞分泌的,為小分 子的肽類,有胸腺血清因子、胸腺素、胸腺生成素、胸腺體液因子等,對(duì)誘導(dǎo) T 細(xì)胞成熟有重要作用,還有免疫調(diào)節(jié)作用。 (三)、法氏囊( bursa of Fabricius) 16 又稱腔上囊,是禽類特有的免疫器官,位于泄殖腔的背側(cè); 球形結(jié)構(gòu),分皮質(zhì)和髓質(zhì),雞 34 月令最大( 34 克) 是 B 淋巴細(xì)胞分化、成熟的場(chǎng)所; 分化 囊激素 血循,淋循 多能干細(xì)胞 —— → 淋巴干細(xì)胞 —— → 腔上囊 ———— → B 細(xì)胞 ———— → 外周 免疫器官的囊依賴區(qū)(非胸腺依賴區(qū))定居 B 淋巴細(xì)胞:囊依賴性淋巴細(xì)胞 —— Bursa dependent ymphocyte 骨髓 依賴性淋巴細(xì)胞 —— Bone marrow dependent ymphocyte 某些藥物、病毒可造成法氏囊萎縮或損害。 體液免疫功能降低,影響 MD、 ND 等疫苗的免疫效果。 二、外周免疫器官 先天性低免疫球蛋白癥遺傳病患者, 非胸腺依賴區(qū) 缺陷;先天性胸腺不發(fā)育患者, 胸腺依賴區(qū) 缺陷。 大家有體會(huì),口腔炎,牙周炎,咽喉炎等,下頜淋巴結(jié)腫、痛 —— 淋巴細(xì)胞 分化增殖,功能旺盛體積增大,數(shù)量增加。 特點(diǎn): 形成于胚胎晚期; 是 T、 B 細(xì)胞定居、增殖的場(chǎng)所; 是抗原刺激產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所; 切除后,一般不影響免疫功能; 存在于整個(gè)成年期。 組成: 全身的淋巴結(jié),脾臟,淋巴小結(jié)(消化道、呼吸道和泌尿生殖道)。 (一)、淋巴結(jié)( lymph node) 分布于淋巴循環(huán)經(jīng)路的各個(gè)部位,有淋巴循環(huán)及血液循環(huán)雙重系統(tǒng)。 結(jié)構(gòu): 皮質(zhì):淺皮質(zhì)區(qū):有許多淋巴小結(jié),其中央為生發(fā)中心; 深皮質(zhì)區(qū):副皮質(zhì)區(qū)。 髓質(zhì):髓索: B 細(xì)胞,漿細(xì)胞,巨噬細(xì)胞; 髓竇:巨噬細(xì)胞。 T、 B 細(xì)胞的分 布 T 細(xì)胞:主要分布在副皮質(zhì)區(qū) —— 胸腺依賴區(qū) B 細(xì)胞:主要分布于生發(fā)中心、皮質(zhì)淺層和髓索 —— 非胸腺依賴區(qū) 17 免疫功能: 具有過(guò)濾和清除異物的作用; 是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。 淋巴結(jié)內(nèi)有淋巴循環(huán)及血液循環(huán)雙重系統(tǒng)。經(jīng)淋巴結(jié)內(nèi)的淋巴循環(huán),將體表或內(nèi)臟的病原體及異物引流至局部淋巴結(jié),淋巴液在淋巴竇內(nèi)流動(dòng)緩慢,使其中的巨噬細(xì)胞有足夠時(shí)間吞噬清除病原體及異物,再將“清潔”的淋巴液由輸出淋巴管輸出,從而在淋巴結(jié)內(nèi)完成過(guò)濾作用。 巨噬細(xì)胞將病原體處理,將抗原信息傳達(dá)給 T、 B 細(xì)胞,使其分化、增殖;效應(yīng) T 細(xì)胞、抗體可經(jīng)血液循 環(huán)到病原微生物所在部位。 淋巴管連接外周免疫器官,形成遍布全身的淋巴管網(wǎng)絡(luò),其分布與血管幾乎完全平行。淋巴管網(wǎng)絡(luò)的主要生理功能是回收經(jīng)毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)滲如組織的體液和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并使淋巴細(xì)胞在體內(nèi)的循環(huán)成為可能。人體每天從淋巴網(wǎng)絡(luò)回收的淋巴液達(dá) 23 升。淋巴液通過(guò)引流淋巴管進(jìn)入初級(jí)和次級(jí)淋巴結(jié)之后匯入主淋巴管,經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入左鎖骨下靜脈和血液循環(huán)。 機(jī)體局部感染常會(huì)引起引流淋巴結(jié)的腫脹,其部分原因是淋巴結(jié)中的抗原特異性 T 和 B 細(xì)胞的迅速擴(kuò)增。此外, T 細(xì)胞被活化后所分泌的各種淋巴因子會(huì)造成髓竇中巨噬細(xì)胞的聚集和體液的直 溜,導(dǎo)致淋巴結(jié)的進(jìn)一步腫脹。外來(lái)抗原被徹底清除之后,活化 T 和 B 細(xì)胞因失去了抗原的持續(xù)刺激而凋亡,淋巴結(jié)方得以恢復(fù)。 (二)、脾臟( spleen) 結(jié)構(gòu) 白髓:脾小體:由密集的淋巴細(xì)胞組成,其中心為生發(fā)中心; 中央動(dòng)脈:貫穿于白髓的小動(dòng)脈。 紅髓:脾索: B 細(xì)胞,漿細(xì)胞,巨噬細(xì)胞; 脾竇:血細(xì)胞。 位于白髓的周圍,脾內(nèi)有血液循環(huán),但無(wú)淋巴循環(huán)。 T、 B 細(xì)胞的分布 T 細(xì)胞:中央動(dòng)脈周圍; B 細(xì)胞:生發(fā)中心,脾索; 脾中 T 細(xì)胞約占 35%, B 細(xì)胞約占 55%,約 10%為巨噬細(xì)胞。 免疫功能 ( 1) 濾過(guò)血液作用 :凈化血液 90%的循環(huán)血液經(jīng)過(guò)脾臟,脾索及脾竇中的 巨噬細(xì)胞 能有效直接清除病原體及衰老的紅細(xì)胞,而起重要的“過(guò)濾作用”。 ( 2)免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所: 當(dāng)被血流來(lái)的抗原刺激后, T、 B 細(xì)胞經(jīng)克隆擴(kuò)增,數(shù)目明顯增加(脾體積相應(yīng)地?cái)U(kuò)大),產(chǎn)生致敏 T 細(xì)胞和漿細(xì)胞,建立細(xì)胞和體液免疫。 是體內(nèi)產(chǎn)生抗體的主要器官(骨髓也是產(chǎn)生抗體的主要器官)。 18 ( 3)滯留淋巴細(xì)胞的作用:當(dāng)抗原進(jìn)入時(shí),循環(huán)中的淋巴細(xì)胞被滯留。 ( 4)產(chǎn)生吞噬細(xì)胞增強(qiáng)激素:小分子肽類( 4 個(gè)氨基酸組成),具有增強(qiáng)吞噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的吞噬作用。 (三)、其它 淋巴組織 哈德氏腺:位于眼窩中腹部,眼球后部;是禽類特有。 雛雞滴眼免疫,不受母源抗體的干擾。 扁桃體:見(jiàn)于雞,鵝、鴨有兩對(duì)淋巴結(jié)(頸胸和腰淋巴結(jié))。 粘膜相關(guān)淋巴組織: 消化道、呼吸道和泌尿生殖道黏膜下層的許多淋巴小結(jié)和彌散淋巴組織,如腸道黏膜集合淋巴結(jié),這些淋巴組織均含有豐富的 T 細(xì)胞、 B 細(xì)胞及巨噬細(xì)胞( B 細(xì)胞比 T 細(xì)胞多),參與局部的黏膜免疫作用。 抗體是由外周淋巴組織產(chǎn)生的,主要有:骨髓,脾臟,淋巴結(jié),扁桃體,彌散淋巴組織。 第二節(jié) 免疫細(xì)胞 免疫細(xì)胞( immunocyte):所有直接 或間接參與免疫應(yīng)答的細(xì)胞 凡是參與機(jī)體免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞 免疫細(xì)胞的種類多,各司其職,巧妙配合,相互制約,為清除機(jī)體的異物共同發(fā)揮作用。 淋巴細(xì)胞: T 細(xì)胞, B 細(xì)胞, K 細(xì)胞, NK細(xì)胞; 輔佐細(xì)胞(抗原遞呈細(xì)胞):?jiǎn)魏思?xì)胞,巨噬細(xì)胞,樹(shù)突狀細(xì)胞; 粒細(xì)胞:嗜中性粒細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞,肥大細(xì)胞。 免疫活性細(xì)胞( immunopetent cell, ICC):受抗原刺激后能分化增殖,產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的免疫細(xì)胞。 輔佐細(xì)胞 (accessory,A cells):在免疫應(yīng)答過(guò)程中起重 要的輔佐作用。 抗原遞呈細(xì)胞( antigenpresenting cells, APC):具有捕獲和處理抗原以及能把抗原遞呈給免疫活性細(xì)胞的功能。 一、淋巴細(xì)胞 在體內(nèi)分布廣、數(shù)量多,除中樞神經(jīng)系統(tǒng)外,所有組織均存在。人體內(nèi)淋巴細(xì)胞的總數(shù)與腦細(xì)胞或者肝細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)。以脾臟和淋巴結(jié)等外周免疫器官為“駐扎營(yíng)地”,在血液和淋巴系統(tǒng)之間不斷循環(huán)。人占白細(xì)胞總數(shù)的 2535%, X 109/L。 (一)、 T 細(xì)胞 T 細(xì)胞的來(lái)源與分化 19 1030d 血流 造血干細(xì)胞 — →淋巴干細(xì)胞 — →前體(祖) T 細(xì)胞 — →胸腺 —— → T 細(xì)胞 — →外周免疫 抗原 記憶細(xì)胞(長(zhǎng)壽) ↓ ↗ 器官的胸腺依賴區(qū)定居( T 細(xì)胞) — →淋巴母細(xì)胞 — →效
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